武汉市重点科技攻关计划项目(20062001018)
- 作品数：7 被引量：99H指数：5
- 相关作者：刘德立熊丽朱德锐邓灵福高强更多>>
- 相关机构：华中师范大学江汉大学更多>>
- 发文基金：武汉市重点科技攻关计划项目国家教育部博士点基金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：环境科学与工程农业科学化学工程生物学更多>>
- 甲基对硫磷降解菌的分离鉴定及降解特性研究被引量：18
- 2007年
- 从湖北仙桃农药厂附近长期受农药污染的土壤中分离出1株甲基对硫磷降解菌HS-MP12,该菌能利用甲基对硫磷(MP)和对硝基苯酚(PNP)作为唯一的碳源、氮源生长。在24h内,HS-MP12对起始质量浓度为500mg/L和200mg/L的MP降解率分别为86.8%和95.7%,对起始质量浓度为200mg/L的PNP的降解率为92.3%,测定条件为:pH值6,温度30℃。HS-MP12经过形态观察、生理生化鉴定、16SrDNA序列测定和同源性分析,初步鉴定HS-MP12菌株为蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)。实验结果表明,HS-MP12在降解MP时,没有代谢中间产物对硝基苯酚的积累,推测可能存在不同的降解途径。
- 高强邓灵福郑永良熊丽罗勤肖文精刘德立
- 关键词：微生物学甲基对硫磷对硝基苯酚生物降解蜡状芽孢杆菌
- ELISA及电化学法检测藠头中氨基甲酸酯类农药残留被引量：11
- 2009年
- 建立了克百威ELISA检测技术,配合电化学法对200份出口藠头样品进行氨基甲酸酯类农药残留检测。ELISA法对克百威的最低检测限达10-7g/L,检出10例,检出率5﹪;电化学法检测,对乙酰胆碱酯酶抑制率超过60%的样品有7例,检出率3.5%。对比分析检测结果得出2种方法检测结果基本吻合。
- 胡芹芹李娜张华李凤杜丹刘德立熊丽
- 关键词：藠头电化学法高效液相色谱法
- 甲基对硫磷高效降解菌的分离鉴定及降解酶基因的克隆表达被引量：15
- 2008年
- 从湖北沙隆达农药厂污水处理池的活性污泥中分离到一株能以甲基对硫磷(MP)和对硝基苯酚(PNP)为唯一碳源生长的细菌HS-D36,经生理生化试验和16S rDNA同源性分析,初步鉴定为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri).该菌在3h内对浓度为50mg.L-1MP的降解率为90%;在12h内能将50mg.L-1PNP完全降解.HS-D36在以MP为唯一碳源的无机盐培养基上可以耐受800mg.L-1的MP,在LB培养基上可耐受浓度为2000mg.L-1的MP.同时,克隆了甲基对硫磷水解酶基因mpd,并在E.coli中获得高效表达.重组甲基对硫磷水解酶粗酶液活性达到52.5U.mL-1.
- 王彬彬熊丽郑永良张志霞童文羽刘松陈奕和肖文精刘德立
- 关键词：甲基对硫磷对硝基苯酚生物降解降解酶基因
- 蜡状芽孢杆菌好氧反硝化特性研究被引量：38
- 2008年
- 从湖北省洪湖、仙桃等地采集的活性污泥和土壤中分离得到32株好氧反硝化细菌,对其进行反硝化能力测定,其中3株菌的反硝化能力较强,能以NaNO3为唯一氮源生长,分别命名为HS-N25,HS-MP12和HS-MP13.这3株菌可以分别在18,15和12 h内将特定培养基SC中起始浓度为10 mmol/L的NO3-完全降解.通过菌株形态观察、生理生化及16S rDNA分子鉴定,菌株HS-N25,HS-MP12及HS-MP13与蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)亲缘关系最为接近,同源性达99%.初步鉴定这3株菌为蜡状芽孢杆菌.
- 杨希刘德立邓灵福朱德锐高强魏艳红刘松邹煜平熊丽
- 关键词：蜡状芽孢杆菌好氧反硝化RDNA
- 聚磷菌生物除磷机理研究进展被引量：18
- 2008年
- 废水中过量磷酸盐是引起水体富营养化的主要原因之一,生物除磷是一项新型的水处理技术。聚磷菌生物在多聚磷酸盐的合成和降解过程中发挥重要作用。文章综述了目前聚磷菌生物除磷的生化机理,聚磷过程中涉及的主要酶类及磷酸盐转运过程相关基因的表达调控。
- 朱德锐贲亚琍韩睿刘德立
- 关键词：聚磷菌
- 昆明鼠乙酰胆碱酯酶基因克隆与表达被引量：1
- 2008年
- 乙酰胆碱酯酶(AChE)作为有机磷和氨基甲酸酯类农药的最适反应底物,在农药残留的快速检测中得到广泛应用,本实验根据家鼠AChE全基因序列设计并合成一对特异性引物,对昆明鼠脑组织AchE进行RT-PCR扩增,扩增产物经T-载体克隆、酶切鉴定和测序分析,结果表明:昆明鼠AChE编码序列长1 845 bp.经BLAST比对发现该序列与已报道序列(No.BC046327)的同源性为99.78%.构建原核重组表达质粒pET-AChE,并在E.coli中得到高效表达,表达蛋白的分子量约为68 000.运用改进的Ellman法成功检测到重组表达蛋白的活性.
- 张立媛李娜张建华杨俊忠张华杨雪婷袁永泽刘德立
- 关键词：乙酰胆碱酯酶RT-PCRCDNA克隆
- 呋喃丹免疫半抗原的合成与应用
- 2008年
- 以呋喃丹、对硝基苯氯甲酸酯和6-氨基己酸合成呋喃丹半抗原:6-[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]己酸(BFNH).将半抗原与载体蛋白(BSA,OVA)偶联制备呋喃丹人工免疫抗原和包被抗原.利用BFNH-BSA免疫家兔获得抗呋喃丹的多克隆抗体,并通过间接ELISA法测定抗体的效价.结果表明,家兔抗血清效价达1.28×106.采用正辛酸-硫酸铵二步沉淀法纯化抗体,纯化后抗体效价达到1.024×107,经10%SDS-PAGE分析,重、轻链分子量分别约为55kD和22kD.
- 朱德锐贲亚琍胡芹芹陆文昌熊丽刘盛华刘德立
- 关键词：呋喃丹免疫半抗原
