国家科技重大专项(2008ZX09401-05)
- 作品数：20 被引量：134H指数：8
- 相关作者：谢希贤徐庆阳陈宁黄静温廷益更多>>
- 相关机构：天津科技大学中国科学院华北制药集团新药研究开发有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项“十一五”国家科技支撑计划天津市科技支撑计划重点项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学医药卫生更多>>
- 葡萄糖浓度对大肠杆菌发酵L-色氨酸的影响被引量：12
- 2010年
- 利用30L自控发酵罐研究了大肠杆菌TRJTH0709产L-色氨酸的发酵工艺。考察了初始葡萄糖浓度和发酵过程中葡萄糖维持浓度对菌体比生长速率、质粒稳定性、乙酸含量、菌体生物量及L-色氨酸产量的影响。最终确定:初始葡萄糖浓度为20g/L,葡萄糖维持浓度采用葡萄糖限制流加培养方式。根据溶氧响应信号的特征反馈控制葡萄糖的流加速率,可将菌体比生长速率控制在较低水平,有效地减少了发酵过程中乙酸的产生及提高了质粒稳定性,实现了重组大肠杆菌的高密度培养,菌体生物量和L-色氨酸分别为50.21g/L和33.50g/L。
- 程立坤赵春光黄静徐庆阳谢希贤陈宁
- 关键词：大肠杆菌L-色氨酸
- 磷酸盐对Escherichia coli TRJH L-色氨酸发酵代谢流分布的影响被引量：8
- 2009年
- 应用代谢流分析方法研究了磷酸盐对Escherichia coli TRJH L-色氨酸发酵中后期胞内代谢流分布的影响.结果表明:在发酵中后期添加4.0,g/L,KH2PO4时,与不添加KH2PO4相比,L-色氨酸合成的代谢流增加了19.3%,而副产物Lac、HAc和Ala的代谢流仅增加了6.0%、7.8%和6.8%.与添加8.0,g/L,KH2PO4比较,副产物代谢流的增量明显减少,说明磷酸盐的过量添加会使EMP途径代谢流量超过TCA及L-色氨酸合成支路的代谢能力,从而导致副产物的生成增加,L-色氨酸生物合成的转化率相对降低.因此,在L-色氨酸发酵过程中应该严格控制磷酸盐的用量.
- 赵春光谢希贤徐庆阳陈宁
- 关键词：L-色氨酸线性规划代谢流分析磷酸盐
- 氮源对L-色氨酸发酵的影响被引量：12
- 2011年
- 以L-色氨酸生产菌E.coli TRTH为供试菌株,研究了氮源对L-色氨酸发酵的影响。利用30 L发酵罐进行分批补料发酵试验,确定了最佳有机氮源和无机氮源分别为酵母粉和硫酸铵,进一步确定酵母粉和硫酸铵的最佳用量为1 g/L和10 g/L,最后采用NaOH和氨水混合补料控制发酵液中NH4+浓度在120 mmol/L以下,发酵38 h,菌体生物量和L-色氨酸产量分别达到53.42 g/L和32.6 g/L,实现了大肠杆菌的高密度培养。
- 黄静史建明霍文婷徐庆阳谢希贤陈宁
- 关键词：L-色氨酸氮源分批补料发酵
- 溶氧对L-缬氨酸发酵过程的影响被引量：5
- 2010年
- 目的:以黄色短杆菌XV0505为供试菌,探索溶氧对L-缬氨酸发酵过程的影响及其控制策略。方法:利用5L发酵罐,考察了不同溶氧浓度对L-缬氨酸发酵的影响,并采用代谢流分析对其结果进行阐述,提出分阶段溶氧控制策略。结果:采用分阶段溶氧控制策略,即在0～24h溶氧浓度为20%,24～60h溶氧浓度为5%,发酵60h,L-缬氨酸可达到58.36g/L,比5%和20%溶氧浓度下分别提高了18.95%和13.56%。结论:溶氧浓度对L-缬氨酸发酵有重要影响。
- 马雷秦永峰徐庆阳谢希贤
- 关键词：L-缬氨酸溶氧代谢流分析发酵
- 大孔树脂法分离纯化那他霉素的工艺研究被引量：11
- 2010年
- 目的研究大孔吸附树脂分离纯化那他霉素发酵液的工艺,提高那他霉素成品质量,得到高纯度药用级那他霉素。方法用HPLC检测方法,以那他霉素的洗脱率为指标,考察大孔树脂分离纯化那他霉素的吸附性能和洗脱参数。结果那他霉素从发酵液中的最佳溶出pH值为11;分离纯化那他霉素的有效吸附剂为大孔吸附树脂HZ816,其动态吸附量为150mg/mL,解吸收率在90%以上,成品纯度大于98%。结论该高纯度药用级那他霉素的规模化分离纯化方法为国内首次应用,工艺简单可靠,分离效果好,适于工业化生产。
- 王海燕李晓露王健张丽林旸张金娟张雪霞
- 关键词：分离纯化
- HPLC快速测定发酵液中L–色氨酸被引量：15
- 2010年
- 建立一种测定发酵液中L–色氨酸的高效液相色谱(HPLC)方法.以Agilent C18(5μm,150.mm×4.6.mm)为分离柱,V(0.03%的KH2PO4溶液)﹕V(甲醇)=90﹕10为流动相,流量为1 mL/min,在278.nm处检测L–色氨酸.该方法简便、快速、准确,在0.000～1.000.g/L范围内线性关系良好(R2=0.999 9),平均回收率为98.93%,精密度(RSD)为0.247%,可有效应用于发酵液中L–色氨酸含量的测定.
- 程立坤徐庆阳谢希贤陈宁
- 关键词：L-色氨酸HPLC
- 温度对大肠杆菌L-色氨酸发酵过程的影响被引量：12
- 2009年
- 目的:研究变温控制对大肠杆菌TRTHL-色氨酸补料分批发酵过程中生物量、色氨酸产量、比生长速率及质粒稳定性的影响。方法:利用5L自控发酵罐对L-色氨酸补料分批发酵过程进行温度控制,对不同温度下相关参数进行分析比较,确定优化的温度控制方案。结果:以30～36℃顺序升温的工艺进行发酵得到理想结果,与单一温度控制策略相比,L-色氨酸产量提高了15.4%;色氨酸的比合成速率提高了21.6%;质粒稳定性增加,未出现质粒丢失现象,质粒拷贝数保持在恒定水平。结论:温度对大肠杆菌L-色氨酸发酵有重要影响。
- 赵春光谢希贤程立坤徐庆阳陈宁
- 关键词：L-色氨酸变温控制质粒稳定性发酵大肠杆菌
- 鸟苷产生菌解淀粉芽孢杆菌的选育被引量：2
- 2010年
- 出发菌GR001通过形态观察、生理生化实验、16S rDNA同源性序列分析及部分特异性基因序列分析鉴定为解淀粉芽孢杆菌.以GR001为出发菌,通过化学诱变选育出一株遗传标记为腺嘌呤营养缺陷、6–巯基嘌呤抗性以及蛋氨酸亚砜抗性(Ade-+MSOr+6-MPr)的突变株GR600.以GR600为受体菌,采用原生质体转化法获得转化子GR607(Ade-+MSOr+6-MPr+kmr),鸟苷产量高达20.82,g/L.
- 吴飞史建明谢希贤陈宁
- 关键词：鸟苷解淀粉芽孢杆菌诱变原生质体
- 有机氮源对谷氨酸棒杆菌发酵L-缬氨酸的影响被引量：10
- 2012年
- 以L-缬氨酸生产菌谷氨酸棒杆菌XV0505为供试菌株,研究有机氮源对L-缬氨酸发酵的影响,确定了玉米浆代替豆饼水解液作为有机氮源的发酵工艺,降低了发酵成本;考察不同玉米浆浓度对谷氨酸棒杆菌XV0505发酵生产L-缬氨酸过程中生物量、耗糖速率、L-缬氨酸产量、副产物积累及氨消耗等方面影响,确定了玉米浆的适宜添加浓度;考察了玉米浆与生物素不同配比对L-缬氨酸分批发酵过程的影响,确定了最适生物素添加浓度。与原工艺相比,新工艺的菌体生物量及产酸提高了13.2%和18.5%。
- 徐庆阳孙家凯吴晓娇王晶谢希贤陈宁
- 关键词：有机氮源L-缬氨酸玉米浆生物素
- 一株植物内生无花果拟盘多毛孢菌的系统化学研究
- 拟盘多毛孢属(P estalotiopsis)真菌在自然界中分布广泛、习性多样，是常见的真菌类型之一，主要包括植物内生、病原和腐生三种生存方式.近年来，对该属真菌的化学研究发现了约100个结构类型丰富、活性广泛的次生代谢...
- 刘玲郭良栋车永胜
- 关键词：植物内生真菌次生代谢产物新结构
