安徽省自然科学基金(1308085MH133) 作品数:5 被引量:14 H指数:2 相关作者: 刘付宝 谢坤 赵义军 耿小平 张雪 更多>> 相关机构: 安徽医科大学第一附属医院 安徽医科大学第二附属医院 安徽医科大学 更多>> 发文基金: 安徽省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
3个VHL综合征家族的基因检测及临床调查 被引量:5 2015年 目的明确von Hippel-Lindau综合征(VHL综合征)家族基因突变及临床表现特点,筛查出家族内基因突变携带者行临床筛查,综合家族发病特点行家族健康指导。方法通过流行病学调查,共3例先证者临床诊断VHL综合征。抽取先证者及家族自愿者外周血,应用聚合酶链反应(PCR)体外扩增得到vhl基因片段,通过测序得到基因信息;再对家族内具有vhl基因突变的携带者进行头颅MRI、腹部B超等对全身多系统行临床筛查;综合家族发病特点给出家族健康指导。结果 3例先证者均发现vhl基因发生突变,家族1中5例成员基因阳性,突变方式为外显子1 c.330C>A;家族2先证者外显子3488del C;家族3发现7例基因阳性者,突变方式为外显子1 c.233G>A。其中,家族成员1III3、3III1、3III4、3IV3确定为基因突变携带者,临床检查显示其中3例成员已发病,1III3表现为双肾多发囊肿,胰腺多发囊肿;3III1表现为胰腺多发囊肿;3III4表现为视网膜血管母细胞瘤、胰腺多发囊肿,视网膜血管母细胞瘤接受激光治疗。3IV3由于年龄较小,临床检查未见明显异常。所有基因携带者接受规范化随访。结论基因检测可早期确诊VHL综合征,临床上对vhl基因突变患者需进行严密随访,从而提高患者治疗效果、延长生存期或改善生活质量。 吴鑫尧 陈江明 赵义军 谢坤 刘付宝 耿小平关键词:VHL 综合征 VHL 基因 基因检测 胰腺囊性肿瘤的诊治近况 被引量:2 2013年 胰腺囊性肿瘤(cystic neoplasms of the the pancreas,PCN)是一类相对少见的肿瘤,术前诊断困难,误诊、漏诊率高,随着对其认识的逐渐深化,其诊疗日趋规范化。从美国麻省总医院回顾33年间851例PCN病例来看,术前对PCN类型及恶性度的评估越来越准确,手术指征日趋针对潜在恶性度高的PCN,而潜在恶性度低及恶性PCN占手术比例越来越少。 耿小平关键词:胰腺 肿瘤 siRNA靶向沉默ZFX基因对肝内胆管癌细胞生物学功能的影响 被引量:4 2018年 目的探讨siRNA沉默X染色体连锁的锌指蛋白(ZFX)基因的表达后对肝内胆管癌细胞(HCCC-9810)的增殖、克隆、迁移及侵袭能力的影响。方法通过脂质体lipofectamine 3000介导转染肝内胆管癌细胞株HCCC-9810,抑制ZFX基因在肝内胆管癌细胞系中的表达,RT-PCR检测ZFX基因的mRNA表达水平的变化,Western blot检测ZFX基因的蛋白表达水平的变化。ZFX基因下调后分别用软琼脂克隆形成实验检测克隆形成能力,CCK-8增殖实验检测细胞增殖情况,Transwell检测细胞的迁移、转移情况。结果RT-PCR及Western blot结果表明与Cell组、NC-siRNA组相比,ZFX-siRNA组有效降低了HCCC-9810细胞系ZFX的mRNA水平及蛋白水平的表达。克隆形成实验显示:ZFX基因沉默后,该细胞系克隆形成能力明显减弱。CCK-8增殖实验证明实验组细胞增殖能力明显降低。Transwell实验显示,Cell组、NC-siRNA组细胞迁移、转移能力明显高于ZFX-siRNA组细胞。各组实验中Cell组、NC-siRNA组之间均未见明显差异。结论本实验siRNA成功降低肝内胆管癌细胞系HCCC-9810中ZFX基因的表达并证明ZFX的表达降低后与肝内胆管癌细胞的克隆形成、增殖、迁移、转移能力相关。推测ZFX在肝内胆管癌的发生发展中发挥重要的作用,可作为该基因治疗的新靶点。 张雪 刘国东 林群 方强 谢坤 赵义军 刘付宝关键词:肝内胆管细胞癌 细胞生物学 PTEN、Kindlin-2和DcR3在老年结直肠癌的表达及其对预后的判断价值 被引量:1 2015年 目的探讨PTEN、Kindlin-2和DcR3在老年结直肠癌的表达及其对预后的判断价值。方法选取80例健康对照者为对照组,80例结直肠癌患者为观察组,应用流式细胞术检测结肠黏膜组织PTEN、Kindlin-2和DcR3蛋白的表达。比较各组PTEN、Kindlin-2和DcR3表达情况及其与结直肠癌患者不同临床特征的关系,PTEN、Kindlin-2和DcR3蛋白表达量与患者生存的关系。结果相比于对照组,观察组PTEN蛋白表达量明显下降(P<0.05);观察组Kindlin-2蛋白表达量明显上升(P<0.05);观察组DcR3蛋白表达量明显上升(P<0.05)。PTEN、Kindlin-2和DcR3的表达与结直肠癌的淋巴结转移、Dukes分期及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达密切相关(P<0.05)。结直肠癌患者PTEN(χ2=12.23,P=0.031),Kindlin-2(χ2=7.23,P=0.042)与DcR3(χ2=14.35,P=0.021)与生存密切相关,PTEN蛋白表达阴性、Kindlin-2蛋白表达阳性、DcR3蛋白表达阳性的患者预后较差。结论结直肠癌中PTEN、Kindlin-2和DcR3异常表达对肿瘤的进展有重要意义,联合检测三者表达可能有助于预后判断。 马靖靖 刘付宝关键词:结直肠癌 PTEN DCR3 二甲双胍联合索拉菲尼对肝癌HepG2细胞的协同抗肿瘤作用 被引量:2 2018年 目的研究二甲双胍(Met)与索拉菲尼(Sor)联合对肝癌HepG2细胞的生长抑制与凋亡的影响,探讨其潜在的机制。方法MTT法检测Met、Sor及两者联合对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用,计算单药的半数抑制浓度(IC50)及联用时的联合指数(CI);荧光染色法观察细胞凋亡的形态学改变;流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率; Western blot法检测p-Erk、p-Akt及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax等蛋白表达水平。结果 Met与Sor联合对HepG2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导作用明显强于各单药组,且呈剂量依赖效应,表现出明显的协同效应(CI值<1)。Western blot结果表明,与对照组和单药组比较,Met联合Sor可明显下调HepG2细胞中磷酸化Erk蛋白、磷酸化Akt蛋白及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平,上调促凋亡蛋白Bax的表达水平。结论 Met联合Sor对肝癌HepG2细胞具有协同抗肿瘤作用,机制可能与诱导细胞凋亡和下调磷酸化Erk蛋白、磷酸化Akt蛋白有关。 刘国东 张雪 林群 方强 单深良 谢坤 刘付宝关键词:肝癌 索拉菲尼 二甲双胍