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马铃薯A病毒液相芯片快速检测方法的建立被引量：2: 2013年; 旨在建立可检测马铃薯A病毒(Potato virusA,PVA)的液相芯片快速检测技术,用Primer Premier5.0软件对GenBank中PVA核苷酸序列进行分析,设计其特异性探针并用生物素标记。探针偶联荧光编码微球后与PVA的PCR产物杂交反应,用液相芯片检测仪检测荧光信号。结果显示该法具有较好的特异性,不与侵染马铃薯的番茄黑环病毒(Tomato black ring virus,TBRV)、马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTVd)、马铃薯Y病毒(Potato virusY,PVY)及番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)反应;检测灵敏度约为10pg/μL总RNA。该方法可用于PVA的快速检测。; 刘洪义张永江刘忠梅辛言言李桂芬张洪祥; 关键词：马铃薯A病毒液相芯片病毒检测

番茄黑环病毒液相芯片快速检测方法的建立: 2013年; 为建立番茄黑环病毒(Tomato black ring virus,TBRV)的液相芯片检测技术,对GenBank中的TBRV核苷酸序列进行分析,设计其特异性探针并用生物素标记。探针偶联荧光编码微球后与TBRV的RT-PCR产物进行杂交,用液相芯片检测仪检测荧光信号。结果表明:建立的方法具有良好的特异性,能够有效区分侵染马铃薯的TBRV、马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)、马铃薯A病毒(PVA)及番茄斑萎病毒(TSWV);检测灵敏度约为1pg/μL总RNA,与常规RT-PCR灵敏度相当。实际样品检测结果表明该方法可用于TBRV的日常检测。; 张永江辛言言李桂芬刘忠梅刘洪义; 关键词：液相芯片技术

进境玉米种子中玉米褪绿斑驳病毒的检测鉴定被引量：7: 2011年; 2011年3月,黑龙江出入境检验检疫局技术中心植检室先后接收两批进境的玉米种子,标明来自德国,报验号分别为:11201100021、11201100022,要求检测玉米褪绿斑驳病毒等检疫性有害生物。分别选取300粒种子进行两组室内盆栽试植试验,11201100021组观察到两株具有典型褪绿斑驳症状的病苗;11201100022组观察到褪绿斑驳和褪绿畸形不同症状的两株病苗。对11201100021组病苗进行RT-PCR检测,扩增出约711bp的特异性片断,通过正反向引物测PCR产物的序列,拼接后可知扩增的目的基因片断大小为711bp,在NCBIBLAST中进行核苷酸序列比对,可知该目的片断是玉米褪绿斑驳病毒的CP全长基因,进一步验证了RT-PCR扩增结果。核苷酸序列分析结果表明,核苷酸序列与美国GenBank上登录号为GU594293的MCMV外壳蛋白序列完全相同。与其他分离物外壳蛋白基因核苷酸序列同源性为97%～99.8%对11201100022组病苗进行了针对MCMV的ELISA检测,结果1株为阳性,另1株为弱阳性。根据以上检测鉴定结果判断这两批进境玉米种子携带玉米褪绿斑驳病毒。; 刘洪义刘忠梅张金兰张洪祥; 关键词：玉米种子外壳蛋白基因 ELISA检测

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国家质检总局科技计划项目(2009IK255)