广东省自然科学基金(6033508)
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
- 相关作者：冯家琳蒲泽锦吴灵飞苏剑东更多>>
- 相关机构：遵义医学院第五附属（珠海）医院汕头大学医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 腺苷体外对人肝癌HepG2细胞凋亡的诱导作用及其作用机制被引量：7
- 2008年
- 目的研究腺苷及其代谢途径对人肝癌HepG2细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法将腺苷2.0mmol.L-1作用于HepG2细胞24和48h,采用流式细胞术(FCM)测定细胞周期及凋亡率;观察腺苷膜转运体抑制剂双嘧达莫、腺苷脱氨酶抑制剂红-9-(2-羟基-3-壬烷基)腺嘌呤(EHNA)和腺苷激酶抑制剂5′-氨基5′-脱氧腺苷(AMDA)对腺苷抑制细胞存活的影响,应用MTT法测定细胞存活率;应用Western蛋白印迹法检测P53和Bcl-2蛋白的表达。结果腺苷与HepG2细胞作用24和48h,HepG2细胞出现特征性的亚二倍体凋亡峰,细胞凋亡百分率分别由对照组的(1.2±0.4)%和(4.1±1.6)%增加到(24.3±4.8)%和(38.6±7.4)%,细胞周期阻滞于G0/G1期。腺苷与HepG2细胞作用24h明显抑制细胞存活,P53表达明显增强,Bcl-2表达降低。预先分别给予双嘧达莫,AMDA和AMDA+双嘧达莫处理后,各处理组HepG2细胞存活率较腺苷组升高,细胞凋亡百分率和P53表达降低,Bcl-2表达无明显变化;EHNA预处理组细胞存活率、细胞凋亡百分率、P53和Bcl-2表达与腺苷组比较均无明显变化。结论腺苷可诱导HepG2细胞凋亡,腺苷在胞内可能通过腺苷激酶而不是通过转氨酶的代谢途径参与诱导细胞凋亡的过程。腺苷对HepG2细胞凋亡的诱导作用还可能与其增加P53蛋白表达有关。
- 吴灵飞苏剑东李国平蒲泽锦冯家琳
- 关键词：腺苷细胞凋亡细胞周期
- NF—κB、Caspase-3在腺苷诱导人HepG2细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2009年
- 目的研究NF—κB、Caspase-3在腺苷（AD0）体外诱导人肝癌HepG2细胞凋亡中的作用。方法将不同浓度的ADO（0．1～5mmol／L）作用于HepG2细胞，采用MTT法测定ADO抑制细胞增殖的时间效应和剂量效应。2．0mmol／LADO单用或联合NF-κB抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC，100μmol／L）作用HepG2细胞12h、24h，采用Hoechst33342荧光染色法及流式细胞术（FCM）观察细胞凋亡及细胞周期，Western blot技术检测NF—κB蛋白表达；荧光比色法测定Caspase-3酶活性。结果ADO对HepG2细胞生长具有显著抑制作用，并呈一定的量效和时效关系。药物作用24h、48h的IC50分别为2．52mmol／L和1．89mmol／L。ADO单独处理HepG2细胞12h和24h或联合PDTC处理后，细胞凋亡率分别为8．30％、22．32％；20．18％、30．89％，均显著高于对照组（0．81％，P〈0．001）；ADO作用HepG2细胞后荧光显微镜观察到细胞凋亡的形态学改变，FCM分析药物处理组显示典型特征性的亚二倍体凋亡峰（sub—G1），细胞生长周期阻滞于G0／G1期；同时伴有Caspase-3活性显著升高（P〈0．05）。ADO处理后显著增加了NF-κB蛋白表达（P〈O．05）；PDTC有效抑制了NF-κB表达，同时增加了Caspase-3活性及ADO的细胞毒作用（P〈0．05）。结论ADO诱导了HepG2细胞凋亡并活化Caspase-3。抑制NF-κB活性可通过Caspase-3途径增强AD0的细胞毒作用。
- 吴灵飞李国平苏剑东蒲泽锦冯家琳
- 关键词：腺苷细胞凋亡NF-ΚBCASPASE-3
