国家自然科学基金(30772499)
- 作品数：5 被引量：27H指数：2
- 相关作者：陈红松张恒辉费然王莉魏来更多>>
- 相关机构：北京大学北京大学肝病研究所桂林医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乙肝病毒核心蛋白的结构与功能及其在抗病毒治疗中的应用被引量：1
- 2010年
- 王雪艳陈红松王宇
- 关键词：病毒核心蛋白质类抗病毒治疗
- Foxp3 siRNA特异性抑制肝癌患者调节性T细胞进而增强抗肿瘤免疫应答的体外实验研究被引量：7
- 2009年
- 目的:设计、合成Foxp3 siRNA序列,并体外干扰肝癌患者调节性T细胞(regulatory T cells,Treg),评价Foxp3 siRNA干扰后对Treg表型及抑制功能的影响以及是否能上调肝癌患者抗肿瘤免疫应答的能力。方法:设计并化学合成Foxp3 siRNA,将Foxp3 siRNA通过脂质体转染的方式体外转染Treg。通过实时定量PCR以及流式细胞术分析Foxp3 siRNA对Treg中Foxp3表达的抑制效能,并通过流式细胞术评价Foxp3 siRNA干扰后对Treg表面分子CD127、CTLA-4、GITR的表达以及对CD4+CD25-T细胞的抑制作用。通过酶联免疫斑点法(enzyme-linked im-munospot assay,Elispot)以及五聚体(pentamer)分析法评价Foxp3 siRNA干扰肝癌患者Treg后对经肿瘤特异性抗原NY-ESO-1b诱导的肿瘤特异性免疫应答的影响。结果:通过Foxp3 siRNA的转染可实现对Treg Foxp3表达的部分沉默,并且上调Treg表面CD127分子的表达,下调CTLA-4和GITR的表达。肝癌患者Treg Foxp3表达的沉默可下调Foxp3+Treg对CD4+CD25-T效应性细胞增殖抑制的能力。通过五聚体法及Elispot法检测发现,Foxp3 siRNA以及siRNA-control转染组NY-ESO-1157-165特异性的细胞毒T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的数量分别为0.21%±0.17%和0.57%±0.39%(P<0.05),与siRNA-control进行干扰的肝癌患者组相比,Foxp3 siRNA干扰后的Treg与特异性CTL共培养后,肿瘤特异性CTL数量及分泌的干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的数量显著上调(132±55vs27±11,P<0.05)。结论:通过Foxp3 siRNA对于肝癌患者Treg中Foxp3表达的沉默,可在体外干扰肝癌患者Treg免疫抑制功能,继而增强肝癌患者经肿瘤抗原诱导的CTL抗肿瘤免疫应答。
- 张恒辉费然谢兴旺王莉罗昊王雪艳魏来陈红松
- 慢性乙型肝炎患者CD4＋CD25＋调节性T细胞免疫抑制功能的研究被引量：16
- 2008年
- 目的探讨慢性乙型肝炎患者CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）免疫抑制功能。方法收集北京大学人民医院22例慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血单个核细胞（PBMC）以及18名健康对照的PBMC标本，以流式分析对PBMC中CD4＋CD25＋Treg的频率进行分析；5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）掺入法评价CIM＋CD25＋Treg的免疫抑制功能；并同时通过磁珠分选去除CHB患者PBMC中的CIM＋CD25＋Treg，分别以MHC-肽-五聚体法和酶联斑点免疫法（Elispot）检测HBVcore18-27抗原肽刺激对HBV特异性的细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）的频率以及IFN-γ的分泌。结果CHB患者外周血中CD4＋CD25＋Treg细胞群所占CIM＋T细胞群的比例明显高于健康对照（t=3．74，P〈0．01）；CHB患者CD4＋CD25＋Treg细胞可非特异抑制自身活化的CIM＋CD25。T细胞，并呈剂量依赖的特点，且抑制能力与健康对照相比无明显差异；在经HBVcore18-27抗原肽诱导条件下，去除CD4＋CD25＋TregCHB患者，HBVcore18-27特异性CTLs的频率以及CTLs分泌IFN-1的频数与未去除CD4＋CI）25＋Treg组比出现显著上调（t=4．75，t=7．828，P〈0．01）。结论CHB患者循环中CD4＋CD25＋Treg细胞频率升高。在体外去除CHB患者PBMC的CIM＋CD25＋Treg后可显著地增强HBV抗原诱导的抗HBV细胞免疫应答。
- 张恒辉郭芳费然马慧丛旭魏来陈红松
- 关键词：肝炎乙型慢性T淋巴细胞CD4
- 转录因子Foxp3在肝癌细胞中的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的研究转录因子Foxp3在肝癌细胞中的表达及其对肿瘤免疫微环境的作用。方法用常规RT-PCR和基因表达谱芯片检测Foxp3在10种肝癌细胞系中的表达,进一步用Western blot、免疫组化和流式细胞术验证其蛋白水平的表达;将表达Foxp3的肿瘤细胞及用Foxp3 shRNA沉默后的肿瘤细胞分别与CD4+CD2-5T细胞共培养,CFSE评价免疫效应细胞增殖情况。结果 Foxp3在所有的肝癌细胞系中均出现表达;肝癌细胞与CD4+T细胞进行共培养,可显著抑制共培养体系中CD+4T细胞增殖及其表面标记的表达;肝癌细胞Foxp3表达沉默后,可显著逆转共培养体系中肝癌细胞对CD4+T细胞增殖的表达抑制。结论在肝细胞癌(HCC)细胞系及部分HCC患者组织中均发现Foxp3的表达,肝癌细胞Foxp3的表达参与对肿瘤微环境中效应性T细胞增殖的抑制。
- 王莉梅铭惠孙煦化陈红松张恒辉费然谢兴旺
- 关键词：肝肿瘤FOXP3
- 转录因子Foxp3在肿瘤免疫微环境中的作用被引量：1
- 2010年
- 王莉梅铭惠孙煦化陈红松张恒辉
- 关键词：FOXP3
