国家自然科学基金(30772486)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：杨帆姜冠潮刘军王俊陈应泰更多>>
- 相关机构：北京大学北京市海淀医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺癌相关基因SLC35F2RNA干扰重组慢病毒载体的构建和鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的 针对肺癌相关基因SLC35F2构建RNA干扰（RNAi）重组慢病毒质粒并进行慢病毒包装,建立SLC35F2表达稳定抑制的H1299肺癌细胞株,并探讨SLC35F2基因的功能.方法 应用pGCSIL-PUR慢病毒载体构建针对SLC35F2的ShRNA载体,转染包装293T细胞,收集病毒上清转染肺癌细胞株H1299,经嘌呤霉素（puromycin）筛选并扩大培养得到稳定克隆;实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot检测癌细胞内SLC35F2的表达;CCK-8比色法检测细胞增殖;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡.结果 成功构建SLC35F2-ShRNA慢病毒载体（SLC-siRNA）及SLC35F2表达稳定抑制的肺癌细胞株,经过检测证实SLC-siRNA慢病毒载体对SLC35F2的抑制效率达81.8%;CCK-8检测显示SLC-siRNA稳定转染的H1299细胞株生长抑制率达16.3%,稳定转染株凋亡细胞百分比较阴性对照组明显升高（14.88%比3.16%,P＜0.05）.结论 慢病毒载体介导的靶向SLC35F2的RNAi可有效抑制SLC35F2表达,降低肺癌细胞的增殖能力,增加其凋亡比例.
- 黄宇清李晓陈克终陈应泰杨帆姜冠潮刘军王俊
- 关键词：肺癌RNAI慢病毒载体细胞增殖
- SLC35F2在非小细胞肺癌中的表达及意义被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨人类溶质载体家族35成员F2（SLC35F2）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及意义.方法 选取于我中心行手术治疗的NSCLC患者52例,43例使用Trizol法处理肿瘤组织提取总RNA,9例将手术切除标本制成冰冻切片,使用激光捕获显微切割（LCM）技术分离得到NSCLC组织中的单一纯净癌细胞提取总RNA,两组均采用荧光实时定量PCR SYBR GREEN法检测SLC35F2基因表达,并与癌旁正常肺组织进行对比.结果 普通方法与LCM方法检测的SLC35F2基因在NSCLC细胞或组织中的表达量均明显高于其在癌旁正常肺组织中的表达（NSCLC 2.460±0.970比癌旁正常0.006±0.001,P〈0.05）,相关性分析及方差分析均证实病理分期与SLC35F2在NSCLC组织中相对表达量明显相关（早期0.30±0.14比晚期4.80±1.93,P〈0.01）.结论 SLC35F2可能是与NSCLC发病相关的原癌基因.
- 卜梁姜冠潮杨帆王云刘军王俊
- 关键词：非小细胞肺癌
