黑龙江省自然科学基金(C201047)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：蔡雪辉涂亚斌王延群张璐王刚更多>>
- 相关机构：东北农业大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划黑龙江省自然科学基金哈尔滨市科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体制备及线性抗原表位鉴定被引量：2
- 2014年
- 为制备猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白单克隆抗体(MAb)及鉴定其抗原表位,本研究采用PCV2去核定位信号Cap蛋白(dCap),通过杂交瘤技术制备1株杂交瘤细胞株(4E2),制备小鼠腹水效价达1∶64 000,亚类鉴定为IgG1/κ链。Western blot分析显示,该株MAb与毕赤酵母表达的dCap和原核表达的Cap蛋白均可以发生特异性免疫反应。采用肽扫描法对MAb的非核定位信号区进行抗原表位鉴定,结果表明该MAb可以识别的线性表位区域为131TKATALTYDPYVNYSS146。本实验结果为进一步研究Cap蛋白的结构和PCV2临床检测方法的建立奠定基础。
- 张璐王延群郝立沙高明明李爱东陶冶李莉涂亚斌蔡雪辉路义鑫
- 关键词：猪圆环病毒2型DCAP单克隆抗体表位
- 牛α干扰素在毕赤酵母中的高效分泌表达及活性鉴定被引量：4
- 2013年
- 为高效分泌表达牛α干扰素(boIFN-α),本研究通过人工合成boIFN-α基因,将目的基因克隆至表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K-boIFN-α,将其电转化于毕赤酵母菌株GS115,利用抗药选择压力G418筛选重组菌,对重组菌诱导表达,取上清进行SDS-PAGE和western blot检测,并优化重组菌的诱导表达条件。结果显示:筛选获得高效分泌表达boIFN-α的重组菌,其最佳诱导条件为:250 r/min,26℃培养,1%甲醇浓度诱导,诱导72 h。上清中目的蛋白表达量最高可达200μg/mL,本研究为boIFN-α在生产中的应用奠定了基础。
- 王延群张璐李玉明汪志艳金家民刘永刚王刚王淑杰姜成刚涂亚斌蔡雪辉
- 关键词：毕赤酵母分泌表达
