国家自然科学基金(61361014)
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
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- 高浓度氯化镍胁迫下酿酒酵母组蛋白H4K5去乙酰化调控金属硫蛋白基因的表达被引量：1
- 2020年
- 金属硫蛋白(MTs)具有重金属解毒功能.组蛋白乙酰化/去乙酰化是表观遗传因子之一,并且参与基因的表达调控.然而,组蛋白乙酰化/去乙酰化在真核生物响应氯化镍胁迫过程中对金属硫蛋白基因的调控作用还不清楚.以酿酒酵母突变株H4K5R(该菌株模拟组蛋白H4赖氨酸5去乙酰化的状态)为试验材料,采用流式细胞术检测不同浓度氯化镍处理下酵母细胞的死亡率,发现突变菌株的生长状态和细胞存活率明显优于野生型菌株BY4741;qRT-PCR检测5 mmol/L氯化镍处理后,酿酒酵母金属硫蛋白基因Cup1、Crs5、Sod1及转录因子Cup2的表达量.结果显示,高浓度氯化镍胁迫下,野生型菌株中基因的表达水平均显著降低;耐镍菌株H4K5R中,金属硫蛋白基因Cup1表达量上调7.4倍,Crs5表达量显著下调2.56倍,Sod1表达量不显著上调,转录因子Cup2表达量上调3.81倍,并且表达水平均显著高于镍处理后的BY4741.本研究表明突变菌株H4K5R具有较强的镍耐受性;镍胁迫下,突变菌株中金属硫蛋白Cup1与转录因子Cup2的表达变化趋势与BY4741相反,说明组蛋白H4K5的去乙酰化可能通过改变基因表达模式,从而在酿酒酵母响应镍胁迫时发挥重要的调控作用.
- 郭艳飞黄勇霖张苗苗蔡禄赵秀娟
- 关键词：金属硫蛋白组蛋白乙酰化表观遗传
- 酿酒酵母组蛋白H3K56A突变菌株的构建及其对细胞生长的影响
- 2016年
- 组蛋白修饰,例如甲基化、乙酰化等修饰对基因表达和细胞生长至关重要。为揭示组蛋白H3第56位赖氨酸(K)修饰对酵母细胞生长的重要性,构建H3K56定点突变为丙氨酸(A)的组蛋白突变株H3K56A,并对其在高温、高盐等条件下的生长状况进行初步检测。根据酵母同源重组的原理,采用两步替换法构建H3K56A突变菌株,用分光光度法测定突变菌株的生长曲线,并分别在高盐、高温条件下检测突变体的表型。结果表明,酿酒酵母组蛋白H3K56A突变菌株构建成功,其生长曲线与野生型无明显差异;H3K56A突变株对高温、高盐条件均较敏感,且在高盐条件下,菌体生长缓慢、菌落偏小,表明组蛋白H3K56位点的修饰可能与酿酒酵母抗高盐、高温机制有关。
- 薛涛涛边金伍陆赵秀娟崔向军蔡禄
- 关键词：酿酒酵母组蛋白修饰高盐环境抗逆机制
- 氯化镍胁迫对酿酒酵母突变菌株H4I26A抗氧化酶活性及海藻糖含量的影响
- 2022年
- 工业发展增加了镍化合物和镍合金在环境中的释放,造成了镍污染,引起人们的关注。前期工作表明酿酒酵母突变菌株H4I26A具有镍耐受性,为了探究其耐受性与胞内海藻糖含量的关系,本研究对氯化镍胁迫下突变菌株H4I26A细胞内ROS、SOD、GSH以及海藻糖含量进行了测定,并对海藻糖合成酶相关基因TPS1和TSL1的表达量进行了检测。结果表明:在不同的氯化镍胁迫浓度下,突变菌株H4I26A中ROS、SOD、GSH的含量显著低于野生型BY4741。突变菌株H4I26A中海藻糖含量及TPS1和TSL1表达量显著高于野生型菌株BY4741。推测细胞内海藻糖含量的增加可能提高了菌株的抗氧化性,从而使突变株H4I26A对重金属镍有一定的耐受性,该研究为进一步探索突变菌株H4I26A耐镍机制提供理论依据。
- 黄勇霖包娜娜高雅红蔡禄赵秀娟
- 关键词：酿酒酵母抗氧化酶
- 酿酒酵母YPH499 Ⅲ号染色体上ARS形成核小体能力的比较
- 2014年
- 核小体定位是复制起始调控的重要因素,但是核小体定位是如何调控真核生物的复制起始,目前还不是很清楚。研究酵母Ⅲ号染色体上的不同活性复制起始序列形成核小体能力对探究真核生物DNA复制起始机制有着重要的生物学意义。酿酒酵母Ⅲ号染色体上的10个复制起始序列分为高活性和低活性两组复制起始序列,利用核小体体外组装技术,将回收纯化的高活性和低活性复制起始序列分别与组蛋白八聚体在体外进行梯度盐透析组装形成核小体,并进行Biotin标记检测,然后用Image J软件分析不同复制起始序列组装形成核小体能力的强弱。结果表明,用Image J软件对核小体组装能力强弱进行分析:ARS304>ARS303>ARS313>ARS302>ARS306>ARS314,ARS305,ARS307,ARS309,ARS315。低活性复制起始序列较高活性复制起始序列更易形成核小体;复制起始位点偏好出现于核小体缺乏区。
- 赵秀娟郑晓东薛涛涛蔡禄
- 关键词：酿酒酵母核小体定位
