国家质检总局科技计划项目(2009IK225)
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 相关作者：顾大勇张妮奇赵纯中徐云庆刘春晓更多>>
- 相关机构：生物技术有限公司深圳博尔美生物科技有限公司深圳出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 四种重要生物恐怖毒素液相芯片多重检测方法的建立被引量：5
- 2012年
- 目的建立包括蓖麻毒素B(Ricin toxion B,RTB)、肉毒梭菌毒素A(Clostri botulinum toxin A,CBTA)、金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)及产气荚膜毒素ε(Clostridium perfringens toxinε,CPTε)在内的4种重要生物恐怖因子的多重液相芯片检测方法。方法采用双抗夹心法原理和液相芯片技术平台,通过优化偶联抗体浓度和检测抗体浓度以及抗原抗体最佳孵育时间,建立4种生物恐怖因子液相芯片多重检测方法。结果反应条件优化实验结果表明,RTB、CBTA、SEA和CPTε偶联抗体的最佳用量分别为20μg、40μg、80μg、80μg;RTB、CBTA、SEA和CPTε检测抗体的最佳稀释比分别为1∶5000、1∶1000、1∶2000、1∶4000;4种毒素抗原抗体最佳孵育时间为60min。多重检测结果表明,本研究建立的毒素液相芯片多重检测方法可有效检测上述任意1种毒素、任意2种毒素组合、任意3种毒素组合并能同时检测4种毒素。灵敏度检测结果表明,RTB、CBTA、SEA、CPTε检测灵敏度分别为1 ng/ml、10 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml。结论本研究建立的4种常见生物恐怖毒素液相芯片多重检测方法通过1次检测能同时检测RTB、CBTA、SEA、CPTε,是一种准确、灵敏、快速和高通量的检测方法。
- 徐华顾大勇胡春凌李永进史蕾刘春晓赵纯中张妮奇徐云庆姜声扬
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素B液相芯片生物恐怖毒素
- 假互补肽核酸及其分子生物学效应
- 2013年
- 假互补肽核酸(pseudocomplementary peptide nucleic acids,pcPNAs)是肽核酸(peptide nucleicacids,PNA)的一种衍生物,通过碱基修饰可以使pcPNAs同时与双链DNA两条链中相应的靶序列结合;而在pcPNAs识别靶序列并结合时,pcPNAs自身两条链间由于空间位阻作用,不会自身互补结合.pcPNAs与DNA、RNA甚至肽核酸相比具有独特的杂交特性,因此具有非常广泛的分子生物学效应.本文就pcPNAs寡聚体的结构、与核酸杂交的特点及杂交模式,分子生物学效应以及应用等方面进行介绍.
- 季明辉欧青叶顾大勇
- 关键词：肽核酸双链DNA
- 8种重大烈性传染病病毒液相芯片检测方法的建立被引量：12
- 2012年
- 目的建立基于多重PCR技术结合液相芯片技术同时检测汉坦病毒(HTV)、裂谷热病毒(RVFV)、黄热病毒(YFV)、西尼罗病毒(WNV)、克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)、拉沙热[下同]病毒(LFV)、埃博拉病毒(EBV)和马尔堡病毒(MBV)的方法。方法建立8种病毒同时扩增的多重PCR反应体系,分别用各种病毒特异的核酸探针偶联不同编码的微球,将获得的PCR产物与偶联核酸探针的微球混合物进行杂交,建立液相芯片检测方法,并对建立的液相芯片检测方法进行灵敏度及特异性检测评价。结果建立的8种重大烈性传染病病毒的液相芯片筛查方法具有较高的特异性和敏感性,能对8种病毒进行特异的检测。灵敏性实验结果表明,RVFV为10 ng/PCR、WNV为1 ng/PCR、EBV为10 ng/PCR、CCHFV为10 pg/PCR、MBV为1 ng/PCR、HTV为100 pg/PCR、LFV为1 ng/PCR、YFV为10 pg/PCR。结论本研究建立的病毒液相芯片筛查方法能快速、敏感、特异地同时检测8种重大烈性传染病病毒,对口岸入境人员是否携带重大烈性传染病病毒的快速筛查具有广阔的应用前景。
- 欧青叶顾大勇胡春凌李永进史蕾刘春晓赵纯中徐云庆张妮奇
- 关键词：多重PCR液相芯片
