博士科研启动基金(20700905)
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 相关作者：杜华茂王丽丽徐建国叶长芸崔志刚更多>>
- 相关机构：西南大学学研究院中国疾病预防控制中心更多>>
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- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 4株猪链球菌的病原生物学特性分析被引量：12
- 2010年
- 对4株新分离猪链球菌NJ25、SH29、SH40和RC4726进行病原学特性分析,以评估其对公共卫生的威胁性。利用中国疾病预防控制中心传染病所制定的猪链球菌2型鉴定方案,对4株新分离猪链球菌NJ25、SH29、SH40和RC4726进行毒力相关基因检测、细菌染色体酶切片段多态性分析(PFGE)、多位点序列分型(MLST),并用C57BL/6小鼠作致病性试验。结果显示,NJ25株为ST7序列型,SH29、SH40为ST1序列型,3株菌的基因型均为sly+mrp+ef+;RC4726的7个管家基因座位分别为aroA(18)、cpn60(34)、dpr(24)、gki(12)、mutS(1),recA(1)、thrA(4),是一个新的MLST型,基因型为sly+mrp-ef-。PFGE分析显示NJ25、SH29、SH40与SC84有60%的相似性,RC4726与SC84的相似性仅为20%。用108CFU攻击C57BL/6小鼠,除RC4726外,NJ25、SH29、SH40均能致小鼠发病、死亡。结果表明,NJ25、SH29、SH40可能是高致病性猪链球菌,RC4726是1株非致病性猪链球菌。
- 杜华茂丁玉春王丽丽崔志刚刘佩红叶长芸徐建国
- 关键词：猪链球菌MLSTPFGE病原生物学
- 1株新ST型猪链球菌的分离鉴定
- 2010年
- 从健康仔猪鼻腔分离到1株血清8型猪链球菌,基因型为mrp-efsly+,命名为RC4726。对青霉素类、头孢菌素类、磺胺类、喹诺酮类药物敏感,对红霉素、阿齐霉素、克林霉素和四环素耐药,MIC值分别为0.5 mg/mL,2 mg/mL,0.5 mg/mL,4 mg/mL。4×108CFU不能使C57BL6小鼠发病。MLST结果显示,RC4726的7个管家基因的座位分别为18,34,24,12,1,1,4。试验结果表明RC4726是一个新ST型,属于非致病性猪链球菌。
- 杜华茂丁玉春孙娜王丽丽白雪梅叶长芸徐建国
- 关键词：猪链球菌多位点序列分型血清型
- 重组猪溶素的生物学活性分析被引量：4
- 2009年
- 【目的】通过研究重组猪溶素(Recombinant Suilysin,rSLY)的生物学活性来分析猪溶素(Suilysin,SLY)在猪链球菌致病过程中的作用。【方法】利用原核表达载体pET30a(+)表达SC22株猪链球菌的猪溶素基因(sly),经Ni2+亲和柱、阴离子交换柱和凝胶过滤纯化获得rSLY制品。用微量法测定rSLY对人红细胞的溶血效价,用LDH法测定rSLY对人外周血白细胞、人胚胎肺源细胞、人胚胎肝细胞和人胚胎心肌细胞的毒性强度,并用水溶性胆固醇、人血清和特异性抗体阻断rSLY的溶血活性。用Luminex测定rSLY刺激小鼠后血清中前炎性细胞因子的浓度。【结果】我们测得重组猪溶素的溶血效价仅为0.125nmol/L,但1nmol/Lr SLY对人外周血白细胞等的细胞毒性强度为20%～25%。水溶性胆固醇可阻断等摩尔浓度的rSLY,人血清样品(游离胆固醇的平均浓度为1～2mmol/L)仅能阻断1nmol/Lr SLY的溶血作用。在人血清中添加15mg/ml兔源抗猪溶素IgG可使10nmol/Lr SLY的裂解强度从77%降到5%,将猪溶素浓度提高到100nmol/L时,红细胞裂解强度为60%。C57BL/6小鼠经腹腔注射rSLY后血清中白介素6、趋化因子KC持续上升,这与注射牛血清白蛋白的对照组小鼠血清中相应细胞因子浓度有显著性差异。【结论】重组猪溶素不仅能直接损伤宿主细胞还能导致机体产生强烈的炎症反应,并进而损伤招募到炎症部位的免疫细胞;血清阻断rSLY溶血作用的能力很有限,特异性抗猪溶素抗体的保护作用表现为剂量依赖性。
- 杜华茂许凌峰王晓玲李雪梅叶长芸徐建国
- 关键词：猪链球菌细胞因子胆固醇抗体
