河南省教育厅科学技术研究重点项目(13A320852)
- 作品数：10 被引量：35H指数：4
- 相关作者：田中伟付丹丹李敏李占国胡华更多>>
- 相关机构：新乡医学院第一附属医院新乡医学院更多>>
- 发文基金：河南省教育厅科学技术研究重点项目河南省医学科技攻关计划项目新乡市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 表没食子儿茶素没食子酸酯抑制白细胞介素17诱导的角质形成细胞增殖和凋亡被引量：1
- 2016年
- 目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对白细胞介素17（IL-17）诱导的角质形成细胞损伤的保护作用及其机制。 方法 实验分空白对照组、IL-17组、IL-17 ＋ EGCG组、IL-17 ＋ SP600125组和IL-17 ＋ EGCG ＋ 茴香霉素组。CCK-8试剂盒检测细胞增殖；流式细胞仪检测细胞凋亡；ELISA试剂盒检测IL-6、IL-23和 IL-8的表达；Western 印迹检测JNK和P-JNK的表达。 结果 IL-17促进HaCaT细胞增殖，且增殖率与IL-17浓度有关，90 μg/L IL-17组的细胞增殖率最高（P 〈 0.05）。60 μmol/L EGCG显著抑制90 μg/L IL-17诱导的细胞增殖（P 〈 0.05），促进细胞凋亡（P 〈 0.05），降低IL-6、IL-23和 IL-8的表达（P 〈 0.05）。与IL-17组相比，IL-17 ＋ EGCG组、IL-17 ＋ SP600125组的P-JNK表达显著下调（P 〈 0.05），细胞增殖率降低（P 〈 0.05），IL-6、IL-23和 IL-8的表达减少（P 〈 0.05）；与IL-17 ＋ EGCG组相比，IL-17 ＋ EGCG ＋ 茴香霉素组的P-JNK表达显著上调（P 〈 0.05），细胞增殖率和IL-6、IL-23、IL-8的表达均明显上升（P 〈 0.05）。 结论 EGCG对IL-17诱导的HaCaT细胞增殖凋亡、炎症反应等损伤具有保护作用，其保护作用可能与抑制JNK信号通路有关。
- 付丹丹胡华孙敏李敏田中伟
- 关键词：角蛋白细胞儿茶素白细胞介素17细胞增殖表没食子儿茶素没食子酸酯
- 小干扰RNA沉默KIAA0101的表达对皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞增殖和迁移的影响
- 2013年
- 目的探讨KIAA0101蛋白表达下调对皮肤鳞状细胞癌（SCC）SCL-1细胞增殖和细胞侵袭能力影响的分子机制。方法将KIAA0101siRNA和对照siRNA分别转染SCL-1细胞，将SCL-1细胞分为3组：未转染组、对照siRNA组和KIAA0101siRNA组。Western印迹检测3组细胞中KIAA0101蛋白的表达，CCK-8试剂检测细胞增殖，用Boyden小室检测细胞侵袭能力，Westem印迹检测细胞增殖和细胞侵袭相关蛋白的表达。结果KIAA0101siRNA组中KIAA0101蛋白的相对表达量为0．062±0．095，显著低于未转染组（0．359±0．044）和对照siRNA组（0．379±0．025），P〈0．05，SCL-1细胞的增殖和侵袭能力亦降低（P〈0．05）。此外，与未转染组和siRNA对照组相比，KIAA0101siRNA组中p21蛋白表达显著上升，而基质金属蛋白酶2表达显著下调（P〈0．05）。结论KIAA0101表达下调介导的SCL-1细胞增殖抑制和侵袭能力降低与p21和基质金属蛋白酶2表达变化相关。
- 李敏夏永华刘冬付丹丹李占国田中伟
- 关键词：鳞状细胞RNA小分子干扰
- IL-33与TNF-α的协同作用对角质形成细胞增殖和凋亡的影响
- 2016年
- 目的研究白细胞介素33(IL-33)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的协同作用对角质形成细胞增殖和凋亡的影响及其调节机制。方法分别构建腺病毒表达载体AAV-IL-33和AAV-TNF-α转染HaC aT细胞。将细胞随机分为4组:control组,IL-33组,TNF-α组和L-33+TNF-α组。Western blot法检测各组细胞中IL-33和TNF-α的水平,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡水平,ELISA检测IL-6,IL-8和IFN-γ的含量,并检测细胞核内NF-κB和IκBα蛋白的磷酸化水平。结果 IL-33和TNF-α能够促进HaC aT的增殖并降低其凋亡,提升IL-6,IL-8和IFN-γ的含量,增加细胞中NF-κB和IκBα的蛋白水平,且在其协同作用下效果更加显著。结论 IL-33和TNF-α的协同作用能增强HaC aT细胞增殖和炎症反应水平,抑制细胞凋亡,这可能与NF-κB信号通路的激活有关。
- 付丹丹胡华李占国李敏田中伟
- 关键词：角质形成细胞白介素-33肿瘤坏死因子-Α核因子-ΚB
- Runx3对寻常性银屑病患者Th17/Treg细胞分化的影响及其作用机制被引量：1
- 2015年
- 目的探讨Runx3对银屑病患者Th17,Treg细胞分化的影响及作用机制。方法收集58例银屑病患者和50例健康对照者血液样本,应用密度梯度离心法分离外周血CD4^+T细胞,qRT-PCR检测Runx3的mRNA水平;采用RNA干扰法下调Runx3的表达水平,流式细胞仪检测Th17和Treg细胞水平;ELISA法测定外周血IL-17,IL-23,TGF-β,IL-10含量;实时定量PCR法检测RORγt,Foxp3的mRNA水平。结果与对照组相比,银屑病患者外周血CD4^+T细胞中Runx3的表达明显升高。Runx3-siRNA转染后,Th17/Treg细胞比值降低,同时伴随有Th17型炎性因子IL-17,IL-23表达下降以及Treg型抗炎因子TGF-β,IL-10的上调。机制分析证实,Runx3沉默后,细胞中Th17转录因子RORγt明显下降,而Treg转录调节因子Foxp3水平增加。结论 Runx3可通过RORγt,Foxp3调控CD4^+T细胞向Th17,Treg型细胞的分化,影响银屑病患者Th17/Treg比例的失衡,提示其可作为银屑病防治的新方向。
- 付丹丹宋向凤李占国李敏刘冬夏永华田中伟
- 关键词：银屑病RUNX3CD4+T细胞TH17/TREG
- 白花蛇舌草提取物对表皮生长因子诱导的HaCaT细胞增殖、凋亡和TNF-α诱导的炎症因子影响被引量：15
- 2016年
- 目的观察白花蛇舌草提取物(Hedyotis diffusa extract,HDE)对HaCaT细胞增殖、凋亡和炎症因子的影响,并探究可能的分子机理。方法实验分为3组:空白组不加表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和HDE处理,对照组只加EGF而不加HDE处理,白花蛇舌草组分别用25、50、100mg/mL HDE和EGF共培养。CCK-8法检测HaCaT细胞增殖情况,流式细胞仪检测HaCaT细胞生长周期和凋亡率,Western blot法测定Ki67、Bcl-xL、cIAP1、procaspase-3、cleaved caspase-3的蛋白表达,ELISA法检测HaCaT细胞培养基上清液中IL-6、IL-8、IL-10的浓度,Western blot检测NF-κB p65亚基磷酸化(p-p65)水平。结果与空白组比较,对照组HaCaT细胞吸光度及Ki67蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),p-p65、IL-6、IL-8水平升高(P<0.05,P<0.01),IL-10水平降低(P<0.01);与对照组比较,白花舌草组25、50、100mg/mL浓度时HaCaT细胞吸光度及Ki67蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),p-p65、IL-6、IL-8水平降低,IL-10水平升高(P<0.05,P<0.01);同时白花蛇舌草组各浓度组凋亡率较对照组增加(P<0.05,P<0.01)。对照组处于G1期的细胞数量百分比为52.85%,白花蛇舌草组25、50、100mg/mL浓度时分别是58.51%、73.12%和79.95%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与白花蛇舌草组25mg/mL比较,白花蛇舌草组50和100mg/mL处于G1期的细胞数量百分比及凋亡率升高(P<0.01),且白花蛇舌草组100mg/mL时处于G1期的细胞数量百分比及凋亡率高于白花蛇舌草组50mg/mL(P<0.05)。与对照组比较,白花蛇舌草组100mg/mL时Bcl-xL和cIAP1蛋白表达降低(P<0.01,);caspase-3总量变化差异无统计学意义(P>0.05),cleaved caspase-3表达升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HDE可能通过将HaCaT细胞阻滞在G1期而抑制其增殖,通过抑制Bcl-xL和cIAP1蛋白表达、提高cleaved caspase-3蛋白表达而促进HaCaT细胞凋亡,通过调控NF-κB而抑制HaCaT细胞炎症反应。
- 付丹丹宋向凤李占国李敏刘冬夏永华田中伟
- 关键词：白花蛇舌草提取物
- 葡萄糖6磷酸脱氢酶表达下调对皮肤鳞癌细胞系A431细胞凋亡和侵袭能力的影响被引量：4
- 2016年
- 皮肤鳞癌是世界范围内第二大最常见的皮肤癌。具有侵袭表型的皮肤鳞癌能增加转移的风险，导致患者的存活率显著下降，具有淋巴结转移的皮肤鳞癌患者的5年生存率仅为26％．34％。因此寻找新的分子靶点治疗皮肤鳞癌显得极为重要。
- 李敏夏永华刘冬付丹丹田中伟李占国
- 关键词：葡萄糖6磷酸脱氢酶皮肤癌鳞癌细胞系表达下调皮肤鳞癌
- 熊果酸对干扰素γ刺激HaCaT细胞产生白细胞介素33的影响被引量：2
- 2016年
- 目的：探讨熊果酸对干扰素γ（IFN？γ）刺激HaCaT细胞产生白细胞介素33（IL？33）的影响及其机制。方法不同浓度熊果酸（0、0.1、1、5、10、20、40、80μmol/L）分别刺激HaCaT细胞24、48、72 h，MTT法检测其对细胞增殖的影响。将HaCaT细胞与200μg/L IFN？γ共培养建成炎性细胞模型，再与10和15μmol/L熊果酸共培养，以IFN？γ诱导的HaCaT炎性细胞模型为对照，探讨熊果酸的抗炎作用，RT？PCR法检测IL？6和IL？33 mRNA的表达，Western印迹法检测IL？33、p？ERK1/2和ERK1/2蛋白的表达。结果 MTT法检测显示，5~20μmol/L熊果酸作用24 h对细胞活力影响不大，而40~80μmol/L熊果酸在各个时间点均可明显抑制HaCaT细胞增殖（P〈0.05），故后续实验采用10和15μmol/L浓度。HaCaT细胞经IFN？γ刺激后，IL？33 mRNA（0.812±0.036）、IL？6 mRNA（0.947±0.091）表达量和IL？33蛋白表达（1.317±0.119）均显著高于空白对照组（分别为0.412±0.021、0.595±0.030和0.147±0.036，均P〈0.05）；而IFN？γ＋10μmol/L熊果酸组（分别为0.447±0.042、0.437±0.099和0.923±0.058）和IFN？γ＋15μmol/L熊果酸组（分别为0.438±0.028、0.350±0.075和0.564±0.113）又较IFN？γ组（分别为0.812±0.036、0.947±0.091和1.317±0.119）显著降低（均P〈0.05），且这两个熊果酸组IL？33 mRNA水平与空白对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05），而IFN？γ＋15μmol/L熊果酸组IL？33蛋白水平显著低于IFN？γ＋10μmol/L熊果酸组（P〈0.05）。HaCaT细胞分别经IFN？γ刺激5、60 min后，p？ERK1/2蛋白表达均明显高于空白对照组。IFN？γ＋15μmol/L熊果酸5 min组和60 min组p？ERK1/2蛋白的相对表达量（0.458±0.053、0.302±0.054）分别低于IFN？γ5 min组（0.941±0.042）和60 min组（0.509±0.032），差异均有统计学意义（P〈0.05），而总ERK1/2蛋白表达量不变。结论熊果酸能够降低IFN？γ刺激的HaCaT细胞IL？33的表达量，
- 胡华宋向凤孙敏付丹丹李敏田中伟
- 关键词：熊果酸干扰素Γ细胞外信号调节MAP激酶类HACAT细胞
- 白细胞介素-33及其受体ST2在寻常型银屑病皮损中的表达被引量：4
- 2016年
- 目的研究白细胞介素-33(IL-33)及其受体ST2在寻常型银屑病(PV)皮损中的表达情况。方法选取PV患者30例(PV组)和非PV患者15例(正常对照组)为研究对象,取PV组患者的皮损区和正常对照组患者的正常皮肤采用免疫组织化学和免疫荧光法检测IL-33和ST2的表达水平。结果与正常对照组比较,PV组患者皮损组织中IL-33及其受体ST2从表皮细胞的基底层到颗粒层均存在高表达。IL-33在PV组患者的阳性表达率为90.00%,高于正常对照组的阳性表达率46.67%(P<0.05)。ST2在PV组阳性表达率为83.33%,高于正常对照组的阳性表达率53.33%(P<0.05)。结论 IL-33及其受体ST2在PV皮损中表达显著增高,提示IL-33和ST2可能在PV的发生发展中发挥着重要的作用。
- 王秋梅付丹丹李敏胡华田中伟
- 关键词：寻常型银屑病白细胞介素-33ST2免疫荧光
- IL-33/ST2/NF-κB在银屑病中作用的研究进展被引量：7
- 2016年
- 银屑病是一种常见的炎症性皮肤疾病。近年来的研究发现多种细胞因子在其发病过程中发挥着重要的作用。IL-33是新发现的IL-1家族的炎症性细胞因子,通过与其受体ST2结合转导信号于细胞内,其后通过下游的NF-κB转录因子在细胞的增殖和分化中发挥重要的调节作用。
- 孙敏田中伟
- 关键词：银屑病炎症性细胞因子葫芦素皮损区
- 熊果酸对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的影响及其可能通路。方法40只清洁级BALB/c雌性小鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、UA低剂量组和UA高剂量组。模型组和UA组在背部和耳部外涂5%咪喹莫特,建立银屑病样皮损模型,建模第1天开始UA灌胃给药,连续6d,每天观察小鼠背部皮损情况并评分,测量耳朵厚度。在药物处理后第7天取材,用HE染色检测小鼠皮损组织病理学变化,免疫组化检测小鼠组织中IL-33,ST2,CD4及CD8表达。结果与正常对照组相比,模型组小鼠耳朵皮肤增厚,背部皮损出现鳞屑和红斑,组织学显示表皮增厚,表皮突延伸伴有角化不全、微脓肿。与模型组相比,UA组小鼠背部皮损鳞屑、红斑及增厚均明显缓解,UA高剂量组症状缓解更明显。免疫组化显示模型组皮损中IL-33,ST2,CD4及CD8较正常对照组表达显著增多,而UA低剂量组IL-33,ST2,CD4及CD8较模型组表达减少,UA高剂量组皮损中IL-33,ST2,CD4及CD8较模型组表达较少更明显。结论 UA可改善咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的发生和发展,其机制可部分通过调节T淋巴细胞和IL-33而实现。
- 孙敏宋向凤胡华任文静付丹丹田中伟
- 关键词：银屑病熊果酸ST2CD8
