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国家自然科学基金(30571817)

作品数：22 被引量：89H指数：6
相关作者：王春友刘涛杨明吴河水赵刚更多>>
相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属协和医院中山大学更多>>
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文献类型

  • 21篇中文期刊文章

领域

  • 20篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 19篇胰腺
  • 15篇胰腺癌
  • 15篇腺癌
  • 13篇细胞
  • 9篇肿瘤
  • 7篇胰腺肿瘤
  • 7篇腺肿瘤
  • 5篇增殖
  • 5篇干细胞
  • 4篇蛋白
  • 4篇胰腺癌细胞
  • 4篇肿瘤干细胞
  • 4篇腺癌细胞
  • 4篇癌细胞
  • 3篇凋亡
  • 3篇信号
  • 3篇胰腺癌组织
  • 3篇腺癌组织
  • 3篇癌组织
  • 2篇蛋白质

机构

  • 16篇华中科技大学
  • 2篇华中科技大学...
  • 1篇咸宁学院
  • 1篇中山大学

作者

  • 18篇王春友
  • 10篇刘涛
  • 6篇吴河水
  • 6篇杨明
  • 5篇赵刚
  • 4篇万赤丹
  • 4篇胡伟国
  • 4篇殷涛
  • 4篇周峰
  • 4篇熊炯炘
  • 3篇张维康
  • 2篇周静
  • 2篇徐建波
  • 2篇熊炯圻
  • 2篇周蒙滔
  • 2篇黄鹏
  • 2篇陶京
  • 2篇牛彦锋
  • 2篇张景辉
  • 2篇罗威

传媒

  • 5篇中华实验外科...
  • 3篇中华肝胆外科...
  • 2篇中国普通外科...
  • 2篇Journa...
  • 1篇中国癌症杂志
  • 1篇山东医药
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  • 1篇癌症
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  • 1篇Hepato...

年份

  • 1篇2013
  • 1篇2010
  • 2篇2009
  • 5篇2008
  • 7篇2007
  • 5篇2006
共 22 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
携带Notch-1受体胞内段基因重组腺病毒载体的构建及其在胰腺腺泡细胞中的表达被引量：1
2007年
目的构建并鉴定携带Notch-1受体胞内段基因(NICD)的腺病毒表达载体,同时观察重组腺病毒在胰腺腺泡细胞中的表达。方法提取K562细胞总RNA,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增NICD并将其克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,经PmeⅠ酶切线性化质粒后与pAdeasy-1质粒在大肠杆菌BJ5183中同源重组。将鉴定正确的同源重组质粒线性化后转染293细胞进行包装、扩增得到重组腺病毒颗粒Ad-NICD。将该病毒感染胰腺腺泡细胞并通过实时定量PCR检测其表达。结果经PCR、基因测序和酶切鉴定证实重组质粒pAd-NICD构建成功,将重组质粒导入293细胞可以观察到绿色荧光蛋白(GFP)的表达,实时定量PCR证实病毒颗粒Ad- NICD感染腺泡细胞后可以有效地增加NICD表达。结论成功构建Ad-NICD并证实其在腺泡细胞中的表达,为进一步研究Notch信号传导途径及其与胰腺的疾病的关系奠定了基础。
张维康王春友殷涛张景辉杨明刘涛万赤丹
关键词：腺病毒腺泡细胞胰腺
ω-3脂肪酸对胰腺癌细胞的抗肿瘤作用及其分子机制被引量：6
2007年
背景与目的:流行病学调查表明:饮食中高ω-3脂肪酸摄入的人群恶性肿瘤的发病率明显降低,但其抗肿瘤的具体机制尚不明确,且目前对其是否具有抗胰腺癌作用及其机制研究甚少。本研究探讨ω-3脂肪酸对胰腺癌细胞株增殖、凋亡及细胞周期调控蛋白cyclinEmRNA转录的影响。方法:采用EPA、DHA作用于胰腺癌细胞株SW19900～48h,MTT法检测对细胞生长抑制的影响,采用实时定量PCR分析40μg/mlDHA和EPA作用于0～48h后细胞周期蛋白cyclinEmRNA表达变化,流式细胞技术观察DHA和EPA处理后细胞凋亡率的变化。结果:EPA、DHA能以时间和剂量依赖方式抑制SW1990细胞的生长(P<0.01,见表1);EPA、DHA还能显著抑制cyc-linEmRNA的表达,其效应具有时间依赖性(P<0.05,见图1C);不同浓度的EPA和DHA能以剂量依赖性方式诱导SW1990细胞发生凋亡(P<0.01)。结论:ω-3脂肪酸可以抑制胰腺癌细胞株SW1990的增殖并促进其凋亡,ω-3脂肪酸对cyclinE表达的抑制可能是其抗肿瘤的分子机制之一。
张维康钱晓辉龙跃平张景辉王春友
关键词：Ω-3脂肪酸CYCLINEMTTFCM
Notchl信号系统对胰腺癌干细胞增殖与分化的调控被引量：1
2010年
目的 探讨激活的Notch1信号系统对PANC-1胰腺癌干细胞增殖与分化的调控.方法 向体外培养的胰腺癌干细胞中分别加入Notch1激活剂rhNF-κB和抑制剂MW167,空白对照加PBS缓冲液.RT-PCR、Western印迹和流式细胞术等方法 检测Notch1信号系统的表达,及加入激活剂rhNF-κB和抑制剂MW167后,CD44和CD24的表达,以及细胞周期的变化.结果 胰腺癌干细胞中Notch信号系统的4个受体只有Notch1表达,配体只有JAG1表达;对照组的S期和G2期为21.5%和12.7%,使用MW167诱导时,细胞周期的S期和G2期所占的百分比降为17.2%和10.5%,干细胞所表达的CD44和CD24亦显著降低（P〈0.05或P〈0.01）;而使用rhNF-κB诱导,则S期和G2期所占的百分比显著增高为29.3%和15.2%,同时CD44和CD24表达也增高（P〈0.05或P〈0.01）.结论 当Notch信号系统被激活时,胰腺癌干细胞进行增殖;当Notch信号系统被抑制时,胰腺癌干细胞进行分化.
黄鹏王春友吴河水熊炯炘
关键词：胰腺肿瘤NOTCH信号肿瘤干细胞增殖分化
胰腺癌肿瘤干细胞样侧群细胞的分离鉴定被引量：3
2009年
目的分离鉴定胰腺癌中的侧群（SP）细胞亚群。方法应用Hoechst33342染色，流式细胞仪检测5个胰腺癌细胞系及3个原代培养的临床胰腺癌标本中sP细胞的含量。以PANC-1为例，通过平板克隆形成试验和NOD-SCID小鼠异种移植成瘤实验比较sP细胞与non-SP细胞的克隆形成能力及成瘤能力，通过对体外培养的SP细胞和SP细胞衍生肿瘤的Hoechst33342复染SP再分析判断其是否具有分化潜能。结果除了BXPC-3，其他胰腺癌细胞系及原代培养标本都存在Verapamil敏感的SP细胞。SP细胞与non—SP细胞比较具有较高的克隆形成能力[（43．67±3．10）％比（8．33±1．63）％，P〈0．01]，并且能够分化产生non—SP细胞并维持自身SP细胞的比例在一个较稳定的水平。SP细胞的成瘤能力是non-SP细胞的100倍以上。而且SP细胞在体内亦可发生不对称分裂生成SP细胞和non—SP细胞。
周静周峰刘涛吴河水熊炯圻赵刚陶京杨明周蒙滔王春友
关键词：胰腺癌肿瘤干细胞
AKT2在胰腺癌组织中的表达及意义被引量：2
2006年
目的探讨胰腺癌组织中蛋白激酶B(AKT)2的表达及其在胰腺癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化SABC法检测63例胰腺癌组织和23例胰腺良性病变组织中AKT 2的表达,分析其与胰腺癌临床病理因素的关系。结果AKT 2在胰腺癌组织中的阳性表达率为39.7%(25/63),明显高于胰腺良性病变组织的13%(3/23),P<0.05。AKT 2表达与胰腺癌组织学分级、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)。结论AKT 2在胰腺癌组织中表达增高,可能在胰腺癌发生、发展、转移中起重要作用。
杨鹏王春友牛彦锋徐建波罗威
关键词：胰腺肿瘤蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶
特异性阻断Shh信号通路对胰腺癌细胞系SUIT-2增殖和凋亡的影响被引量：3
2006年
目的研究组抑胚胎发育相关信号通路Sonic hedgehog(Shh)对人胰腺癌细胞系SUIT-2增殖和凋亡的影响。方法用四唑蓝(MTT)比色试验检测Shh信号通路特异性抑制剂cyclopam ine对胰腺癌细胞系SUIT-2增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞增殖指数(PI)和凋亡指数(AI);用裸鼠移植瘤模型检测cyclopam ine对移植瘤生长的抑制作用。结果cyclopam ine对SUIT-2细胞株增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性。cyclopam ine作用后使胰腺癌细胞周期阻滞在G0/G1期,细胞凋亡增加;SUIT-2的AI为1 4.3±0.3 5,PI为3 6.1±0.4 4,对照组分别为1.3±0.2 4和5 2.3±0.2 8(均P<0.0 5)。在裸鼠移植瘤模型中,cyclopam ine同时给药组肿瘤生长明显受到抑制,而延期给药组对肿瘤生长的抑制作用较弱。结论shh信号分子对胰腺癌细胞的增殖起维持作用;通过特异性阻断该信号通路,可以抑制胰腺癌细胞增殖,并促进细胞凋亡。
胡伟国王春友刘涛赵刚
关键词：细胞分裂
胰腺癌干细胞的体外增殖与鉴定
2008年
目的建立胰腺癌干细胞体外增殖体系并鉴定所获细胞。方法ASPC-1胰腺癌细胞以1000细胞／ml的密度培养于含碱性成纤维生长因子、表皮生长因子、胰岛素、转铁蛋白、硒及牛血清白蛋白的DMEM-F12培养基中。待培养10～14d，部分ASPC-1细胞增殖为细胞球后，收集细胞球进行鉴定。鉴定方法包括克隆形成实验、Hoechst33342染料染色、CD44抗体免疫细胞化学染色以及实时定量逆转录PCR检测CD44mRNA水平。结果小部分ASPC-1细胞可在干细胞体外增值体系中增殖为细胞球。此体系增殖所获细胞中能够排出Hoechst33342染料的细胞比例远高于普通培养体系中的细胞（〉95％vs2％～3％），且具更高的克隆形成能力[（10．92±3．38）％比（10．92±3．38）％，P〈0．01]。此外，此增值体系中所获细胞CD44表达率更高[（86．00±5．85）％比（18．71±3．64）％，P〈0．01]。结论部分ASPC-1细胞可在本研究所建立的于细胞体外增殖体系中增殖，增殖所获细胞具有肿瘤干细胞特性。
刘涛万赤丹勾善森吴河水熊炯炘王春友
关键词：肿瘤干细胞胰腺肿瘤
胰腺癌细胞株PANC-1中肿瘤干细胞生物学行为的研究被引量：6
2008年
目的研究人胰腺癌细胞株PANC-1中肿瘤干细胞的生物学特性。方法将PANC-1细胞进行培养,以CD44和CD24作为细胞表面标志。利用流式细胞仪,从该细胞株中分离出细胞亚群。将所得到的有CD44-CD24-,CD44+CD24+表面标志的PANC-1细胞和未分选的PANC-1细胞置于含有10ng/mL成纤维细胞生长因子、20ng/mL上皮生长因子和ITS(胰岛素、转铁蛋白和硒混合溶液)无血清DMEM/F12(1:1)培养基中,以MTT法检测不同亚群细胞体外增殖活性;通过裸鼠体内接种成瘤实验,鉴定各亚群细胞体内增殖能力;通过ABC法检测成瘤组织和PANC-1细胞株中CD44和CD24的表达。结果PANC-1细胞系中CD44+和CD24+的表达分别为5.1%～17.5%和21.8%～70.1%,CD44+CD24+的表达为0.9%～3.5%;与CD44-CD24-亚群比较,CD44+CD24+亚群生长缓慢,第7天才出现指数生长的趋势,增殖能力较低,倍增时间更长,而前者第5天已出现指数生长的趋势。裸鼠皮下植入5×103个CD44+CD24+亚群细胞,4周即可见明显的新生肿瘤块(2/8),而植入1×105个D44-CD24-亚群细胞,12周也难形成种植瘤。前者体外成瘤能力比后者至少强20～50倍(P<0.05或P<0.01);所形成的肿瘤和PANC-1细胞系无组织学差异。结论CD44和CD24可作为分选PANC-1中肿瘤干细胞的表面标志;分选出的CD44+CD24+亚群细胞具有肿瘤干细胞的初步特征。
黄鹏王春友吴河水熊炯炘
关键词：胰腺肿瘤干细胞
Modulatory Effects of EPA and DHA on Proliferation and Apoptosis of Pancreatic Cancer Cells被引量：2
2007年
In order to investigate the effects of eicosapentaenoic acid(EPA) and docosahexaenoic acid(DHA) on the proliferation,apoptosis of pancreatic cancer cell line SW1990 cells and the expression of cyclin E mRNA,the SW1990 cells were treated with different concentrations of EPA or DHA(20,40,60 μg/mL) for 0,12,24,36 and 48 h respectively.By using MTT method,the inhibitory effects of EPA or DHA on the cell growth were assayed.Real time PCR was used to detect the expression changes of cyclin E mRNA after the SW1990 cells were treated with 40 μg/mL EPA or DHA for different time.Flow cytometry was used to test the changes of apoptostic rate in the SW1990 cells treated with different concentrations of EPA or DHA for 24 h.The results showed that EPA and DHA could inhibit the growth of SW1990 cells in a time-and concentration-dependent manner(P<0.01).EPA or DHA could also significantly inhibit the expression of cyclin E mRNA in a time-dependent manner(P<0.05).EPA or DHA could induce the apoptosis of SW1990 cells in a concentration-dependent manner(P<0.01).It was concluded that ω-3 fatty acid could inhibit the proliferation of pancreatic cancer cell line SW1990 cells and promote their apoptosis.The down-regulation of the cyclin E expression by ω-3 fatty acid might be one of the mechanisms for its anti-tumor effect on pancreatic
张维康龙跃平张景辉王春友
关键词：胰腺癌细胞凋亡细胞增殖脂肪酸
转化生长因子-β_1诱导的上皮向间叶转化对胰腺癌侵袭和转移的意义被引量：7
2007年
目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)所诱导的上皮向间叶转化对胰腺癌侵袭的意义。方法采用免疫组织化学的方法检测29例胰腺癌组织中TGF-β1的表达,并与临床病理资料作对照分析,同时体外通过TGF-β1诱导胰腺癌细胞株Panc-1,观察上皮向间叶转化(EMT)的发生情况以及对细胞侵袭能力的影响。结果在29例胰腺癌组织中有12例TGF-β1呈阳性表达(41.4%),TGF-β1的阳性表达和肿瘤的侵袭范围(P=0.035)以及淋巴结转移(P=0.047)都存在着相关性。TGF-β1在体外可以诱导Panc-1发生明显的EMT以及侵袭能力的增加。结论TGF-β1可以通过诱导胰腺癌细胞发生上皮向间叶转化和肿瘤细胞侵袭能力的增加,进而导致了胰腺癌高度侵袭性的生物学行为。
殷涛王春友赵刚刘涛周峰陶京
关键词：胰腺癌转化生长因子-Β1
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