国家教育部博士点基金(20060114004)
- 作品数：7 被引量：34H指数：4
- 相关作者：祁金顺郭芬李新毅武美娜景玮更多>>
- 相关机构：山西医科大学山西医科大学第一医院山西省肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金山西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 平行绑定多电极技术研究大鼠基底核毁损对海马自发放电的影响
- 2010年
- 目的:研究应用平行绑定多电极细胞外记录技术探讨海人藻酸(KA)注射毁损Meynert基底核(NBM)后海马CA1区自发放电活动的改变。方法:雄性SD大鼠在水合氯醛麻醉和脑立体定位仪引导下,KA注射后破坏双侧NBM,一周后用改装的平行绑定多电极记录大鼠海马CA1区自发放电活动。结果:(1)与传统的细胞外单电极或多电极记录相比,本方法电极制备简单、灵活、造价低廉,细胞损伤小,可同时记录单个核团内多个神经元或相邻脑区多个神经元的活动,便于进一步对神经元环路活动进行分析。结合锋电位分类技术,可对单一通道获得的多个神经元活动进行甑别,大大提高实验精度和效率;(2)比较NBM毁损组和对照组核团放电发现:NBM毁损组大鼠CA1区自发放电频率明显减少,其中单个放电与爆发式(burst)放电类型的平均放电频率同时降低;NBM毁损组自发放电类型发生改变,burst数量增加,但burst内发放频率下降,burst间隔延长。结论:(1)平行绑定多电极技术简便、易行、灵活,结合多通道记录技术可为开展神经元环路活动研究提供有力工具;(2)NBM毁损可致大鼠海马CA1区自发放电频率减少和放电模式改变,提示NBM胆碱能系统参与海马环路的神经活动调控,NBM损伤所致海马自发放电活动的改变可能有助于解释阿尔茨海默病认知功能的下降。
- 陈小荣潘艳芳沈煜泰祁金顺
- 关键词：自发放电海马
- 双电极绑定技术记录在体大鼠海马CA1区长时程增强被引量：4
- 2007年
- 目的:探讨双电极绑定条件下记录大鼠在体海马CA1区长时程增强的可行性。方法:雄性Wistar大鼠乌拉坦麻醉;脑立体定位仪上埋置脑室导管;安装自制的刺激/记录绑定电极;引导基础性场兴奋性突触后电位(fEP-SP);强直刺激诱导长时程增强(LTP)。结果:绑定后的刺激和记录电极能可靠地引起海马CA1区fEPSP,fEPSP的出现率几乎100%;基础性fEPSP记录可保持长时间稳定;高频刺激成功诱导出LTP并维持达3h以上,诱导率约67%;双脉冲易化记录稳定、可靠;脑室注射β淀粉样蛋白(Aβ)对LTP显示出明显的压抑作用。结论:采用双电极绑定技术进行在体海马LTP记录简便易行、节省资源、引导fEPSP和诱导LTP的成功率较高,有望成为一项重要的研究学习和记忆机制的电生理辅助手段。
- 郭芬武美娜景玮祁金顺
- 关键词：长时程增强海马
- 激光共聚焦扫描显微镜技术在大鼠皮层神经元细胞内钙离子浓度动态测定中的应用被引量：16
- 2008年
- 目的探讨激光共聚焦扫描显微镜(LCSM)技术在动态测定神经元细胞内钙离子浓度中的应用。方法采用原代培养大鼠皮层神经元,用LCSM测定给KCl前后细胞内钙离子浓度的动态变化。结果培养神经元状态良好,用LCSM准确、稳定、可靠地测出细胞内钙离子浓度的动态变化。结论LCSM在动态测定神经元细胞内钙离子浓度中具有明显优势。
- 武美娜李新毅白玮郭芬祁金顺
- 关键词：细胞内钙离子浓度皮层神经元
- N型胆碱能受体参与淀粉样β蛋白片段引起的大鼠大脑皮层神经元胞内钙水平升高(英文)被引量：4
- 2009年
- 淀粉样β蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)诱导的细胞内钙稳态失调被认为是Aβ所致神经元损伤的最后通路。然而,Aβ导致钙超载的机制,尤其是Aβ所致的细胞内钙浓度([Ca2+]i)升高是否与烟碱受体相关尚需进一步研究。本实验用激光扫描共聚焦显微成像技术观察了Aβ25-35和Aβ31-35对原代培养大鼠皮层神经元[Ca2+]i的作用,探讨了其N型胆碱能受体机制。结果显示:(1)Aβ25-35可剂量依赖性地引起皮层神经元[Ca2+]i升高;(2)Aβ的更小片段Aβ31-35也能增加[Ca2+]i,其效应与Aβ25-35相比没有显著性差异,但Aβ31-35的反序列即Aβ35-31对[Ca2+]i无明显影响;(3)使用烟碱受体的非特异性拮抗剂美加明(mecamylamine,MCA)预处理后,Aβ25-35和Aβ31-35诱导的[Ca2+]i升高效应被明显抑制,并表现出一定程度的剂量依赖性;(4)使用α4β2亚型烟碱受体拮抗剂二氢-β-刺桐啶碱(dihydro-β-erythroidine,D-β-E)同样能够部分阻断Aβ25-35和Aβ31-35诱导的[Ca2+]i升高,但其作用弱于相同浓度的MCA。这些结果表明,两种Aβ片段均能引起培养大鼠皮层神经元[Ca2+]i增高,Aβ31-35序列是Aβ分子中具有同样生物活性的更短片段;中枢烟碱受体的过度激活参与了Aβ25-35和Aβ31-35诱导的[Ca2+]i升高。由此提示,阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)时发生的认知功能障碍可能与中枢烟碱受体激活引起的细胞内钙超载有关,N型胆碱能受体可能是AD时Aβ发挥神经毒作用的靶点之一。
- 武美娜李新毅郭芬祁金顺
- 关键词：淀粉样Β蛋白皮层神经元细胞内钙浓度
- 蛋白酪氨酸激酶参与β-淀粉样蛋白对大鼠在体海马CA1区长时程增强的抑制被引量：9
- 2009年
- β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)对突触可塑性和认知功能的伤害效应已被广泛报道,但机制尚不明确。本研究通过观察Aβ25-35和蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)特异性抑制剂genistein对大鼠在体海马CA1区长时程增强(long-term potentiation,LTP)的效应,揭示Aβ抑制海马LTP可能的PTK机制。实验采用电生理学方法,利用自制的刺激/记录绑定电极引导和记录大鼠在体海马CA1区场兴奋性突触后电位(field excitatory postsynaptic potentials,fEPSPs)、双脉冲易化(paired-pulse facilitation,PPF)以及高频刺激(high-frequency stimuli,HFS)诱导的LTP。结果显示:(1)侧脑室内注射Aβ25-35(20nmol)不影响基础性fEPSPs,但能显著抑制HFS诱导的LTP,fEPSPs平均幅度较对照组明显降低;(2)类似于Aβ25-35的效应,侧脑室内注射genistein(200nmol)也不影响基础性fEPSPs,但明显抑制HFS诱导的LTP,具有与Aβ25-35有相似的压抑程度;(3)联合给予Aβ25-35(20nmol)和genistein(200nmol)后,两者对LTP产生的抑制效应并未进一步加强,与单独给予Aβ25-35或genistein的压抑效应相比,没有显著区别;(4)分别或联合给予Aβ25-35和genistein均未影响海马CA1区PPF。以上结果表明,脑室内注射Aβ25-35能够明显抑制大鼠在体海马CA1区HFS诱发的LTP,提示阿尔茨海默病时脑内产生的Aβ有可能通过影响海马突触可塑性而伤害学习和记忆功能;Aβ25-35和PTK抑制剂genistein对海马LTP表现出的同等程度抑制以及联合给药后效应维持不变,提示PTK系统可能参与了Aβ对在体大鼠海马LTP的抑制。
- 郭芬李新毅王晓晖祁金顺
- 关键词：蛋白酪氨酸激酶Β-淀粉样蛋白长时程增强海马
- 多电极同步记录中的锋电位分拣技术被引量：1
- 2009年
- 沈煜泰祁金顺
- 关键词：多电极阵列分拣神经电生理学神经元神经系统
- β-淀粉样蛋白31-35及25-35片段对海马CA1细胞兴奋性和抑制性受体通道电流的影响
- 2009年
- 在Alzheimer病(AD)出现神经变性前的早期记忆功能障碍中,可溶性β-淀粉样蛋白(Aβ)发挥了重要作用.Aβ及其活性片段对海马长时程增强(LTP)的压抑效应与其对学习记忆认知行为的伤害作用具有密切联系,但其机制仍不清楚.鉴于突触后兴奋性和抑制性受体/通道在突触传递、包括LTP的诱导中起着关键性调制作用,利用全细胞膜片钳技术观察了β-淀粉样蛋白31-35片段(Aβ31-35)和25-35片段(Aβ25-35)对急性分离的海马CA1区锥体细胞谷氨酸(Glu)受体、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体和γ-氨基丁酸(GABA)受体通道电流的影响.结果显示:急性给予Aβ25-35或Aβ31-35可对Glu受体电流和GABA受体电流产生相反的调制作用.Aβ25-35预处理剂量依赖性地减小了Glu和NMDA引起的全细胞内向电流,相反,GABA受体电流被明显增强;小片段的Aβ31-35也选择性抑制了Glu和NMDA受体电流,增强了GABA受体电流;然而,给予Aβ31-35的反序列Aβ35-31预处理后,Glu,NMDA和GABA引起的受体电流均未出现明显改变.这些结果表明,Aβ25-35和Aβ31-35片段急性处理可导致海马锥体细胞NMDA受体和GABAA受体分别受到抑制和易化影响,这可能有助于解释AD早期可溶性Aβ对海马LTP及认知行为造成的伤害作用.同时,Aβ25-35和Aβ31-35片段具有的类似效应提示,31-35序列很可能是Aβ发挥神经毒性作用的活性中心.
- 张俊芳侯磊高秀萍郭芬景玮乔健天祁金顺
