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过量表达辣椒CaNPR1提高烟草对青枯菌的抗性被引量：2: 2012年; 对水稻和拟南芥等模式植物的研究表明,NPR1(nonexpressor of pathogenesis-related genes 1)是依赖于SA通路的防御反应调节基因,但在辣椒和烟草等茄科作物中该蛋白的功能还鲜有报道。研究从辣椒cDNA文库中分离获得一个NPR1的类似物全长cDNA(CaNPR1),并获得了其超表达的转基因烟草T1代株系。研究结果表明,这些株系与其野生型植株没有明显表型差异,但却表现出较野生型植株更高的抗青枯菌侵染活性。同时,研究还发现CaNPR1的超表达还显著提高了防御相关基因的表达,表明NPR1在不同植物间具有较强的功能保守性。; 党峰峰林金辉陈成聪陈永萍黄国栋官德义何水林; 关键词：辣椒 NPR1 青枯菌

GCC盒和JERE盒介导的信号途径在水稻应答逆境中的作用: 2012年; 植物应答逆境的防御反应在很大程度是在基因转录水平调节的,其中转录因子与目标基因启动子上顺式作用元件的识别和结合起着关键的调节作用.本研究将从双子叶植物中发现的GCC盒(应答乙烯)和JERE盒(应答JA和激发子)与CaMV35S核心启动子融合构建成诱导型启动子,利用GUS报告基因构建其表达载体并进行农杆菌介导的水稻遗传转化.利用T1代株系分析了GCC盒和JERE盒水稻植株对不同逆境胁迫和激素处理的应答.结果表明在转基因植株中它们都具有很低的本底表达.稻瘟病侵染、稻纵卷叶螟取食和机械损伤处理可不同程度提高GUS基因的表达.另外,脱落酸(ABA)、水杨酸(SA)和茉莉酸(JA)也能提高GUS的表达.实验结果暗示JERE和GCC盒介导的信号途径在单子叶和双子叶之间有一定的保守性.; 牟少亮黄定全刘志钦何水林; 关键词：信号途径水稻

水稻Xa21基因启动子序列分析及其在不同条件下的表达特征: 2012年; 以水稻品种‘日本晴’(Oryza sativa‘Nipponbare’)为实验材料,根据GenBank上公布的同品种水稻的基因组DNA序列设计1对引物,对水稻Xa21基因启动子进行克隆并测序,通过PCR扩增获得的Xa21基因启动子序列长1 982 bp,其中除包含启动子基本元件外,还包含一些与逆境信号相关的元件(GCC-box、A-box、TC-rich repeats、MBS、LTR和W-box等)。利用GUS组织化学染色和定量分析方法,研究了转基因水稻T1代株系不同器官和发育阶段Xa21基因启动子的表达特异性及其在不同逆境和激素处理条件下的表达特征,结果显示:在转基因水稻的叶、茎和根部均能检测到GUS活性,但根部GUS活性最高,特别是在根尖的中柱区活性最强;随苗龄增长(3叶期、5叶期和8至9叶期)叶片中GUS活性逐渐增加,8至9叶期GUS活性最高;机械损伤和100μmol.L-1茉莉酸甲酯(MeJA)处理可使叶片中GUS活性显著或极显著提高,而干旱、500μmol.L-1水杨酸(SA)和100μmol.L-1脱落酸(ABA)处理则对叶片中GUS活性无明显影响。研究结果表明:外界逆境胁迫对水稻Xa21基因启动子的表达有诱导作用;该启动子的表达受水稻发育阶段的调控并具有一定的器官组织特异性,在根中的表达量最高;其介导的抗病反应依赖于茉莉酸(JA)信号通路。; 牟少亮刘志钦赖燕蔡汉阳何水林; 关键词：水稻 GUS活性

辣椒种质资源抗青枯病的鉴定与评价被引量：8: 2013年; 采用青枯菌FJC100301菌株对田间辣椒(Capsicum annuum)抗病品种76a和感病品种TW-1分别作了不同温度、不同接种量和不同接种方法的接种试验。结果表明,辣椒青枯病抗性的室内鉴定以接种温度28℃、浸根20 min和3×108cfu/mL接种浓度为宜;辣椒种质田间抗青枯病接种鉴定宜选择5月上旬进行,浸根20 min,接种浓度为3×108cfu/mL。采用田间抗性接种鉴定的方法,用青枯菌FJC100301菌株对106份辣椒材料进行了抗性鉴定。田间接种后每隔10 d统计病情指数,划分辣椒抗青枯病鉴定分级标准,获得了高抗材料14份、抗病材料8份、中抗材料23份、中感材料23份、感病材料20份、高感材料18份;采用离体叶片接种法对田间筛选得到的高抗和高感纯度较高品种进行抗性分析,结果与田间鉴定一致。; 党峰峰雷玉芬官德义王再兴何水林; 关键词：辣椒青枯菌种质资源

水稻蛋白磷酸酶ABI2基因启动子的克隆和功能分析被引量：2: 2011年; 分离了水稻PP2C家族中的一个成员OsABI2的启动子,测序鉴定后构建其GUS融合表达载体,通过农杆菌介导的方法获得水稻转基因植株。GUS蛋白组织化学染色结果表明,OsABI2启动子驱动的GUS基因在水稻根茎叶中都有表达,在根中表达量最高,叶中表达量最低,而且根部分生组织区明显高于根部其他组织。另外在萌发的芽中也有明显表达。OsABI2启动子在T1代转基因植株的诱导表达的GUS蛋白活性分析结果表明,在机械损伤、稻瘟病、干旱逆境和ABA、MeJA和SA处理条件下,OsABI2启动子驱动的GUS活性都出现了明显上调。上述研究结果说明,OsABI2很可能参与了发育,生物和非生物逆境胁迫的调控。; 牟少亮李秀娟官德义赖燕何水林; 关键词：启动子功能分析

过量表达水杨酸羟基酶NahG降低烟草对青枯菌的抗性: 2013年; 研究构建了pMDC32-NahG植物表达载体,并获得了其超表达的转基因烟草T1代株系。结果表明:这些株系与其野生型植株没有明显表型差异,但却表现出较野生型植株更敏感的青枯菌侵染抗性。同时,研究还发现NahG的超表达还显著提高了茉莉酸(JA)-依赖的基因NtPR1-b的表达,降低了(SA)-依赖的相关基因NtPR3和NtPRQ的表达。这表明SA累积的缺陷降低了烟草对青枯菌侵染的抗性。; 党峰峰林金辉陈成聪陈永萍官德义何水林; 关键词：水杨酸 NAHG 青枯菌

水稻Xa1基因启动子的克隆及功能分析被引量：4: 2012年; Xa1是一个能对日本白叶枯病优势小种(小种1号)产生专化性抗性的R基因,虽已有该基因克隆、表达和功能方面的研究,但对其表达调控分子机制还不很清楚。本研究利用Xa1启动子与GUS报告基因的转基因T1株系,研究了Xa1启动子的时空表达及对不同外源激素的应答特征。结果表明,Xa1启动子驱动的GUS基因在水稻根中的表达量明显高于茎和叶,且在根部的中柱区GUS的表达量明显高于周围组织;在外源MeJA作用下GUS的表达显著增强,在SA和ABA处理下也有一定程度的增强,这些结果暗示Xa1的抗病作用与其在根系中柱的组织特异性表达存在一定的相关性,MeJA对Xa1启动子的活性起重要的调控作用。; 牟少亮官德义林琳赖燕何水林; 关键词：水稻启动子功能分析

水稻Pi-ta启动子的克隆及其功能分析被引量：7: 2013年; 本研究分离了水稻品种日本晴Pi-ta基因的启动子,并构建其GUS融合表达载体,通过农杆菌介导的遗传转化获得了其转基因植株。以获得的转基因水稻为材料进行GUS组织染色和GUS(β-葡萄糖苷酸酶)酶活性分析,结果表明,GUS基因在根、茎和叶中都有表达,转基因植株在接种稻瘟病菌后GUS活性显著增加。用抗病信号分子水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(MeJA)处理后,Pi-ta启动子驱动的GUS活性也显著增加。以上结果表明,Pi-ta启动子是一个对稻瘟病菌应答的诱导型启动子,同时Pi-ta启动子还受到SA和MeJA的诱导表达。; 牟少亮蔡金森严雁邱爱连官德义何水林; 关键词：启动子 GUS 转基因水稻

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国家自然科学基金(30971718)

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