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国家自然科学基金(30872708)
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唐四元
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Apelin抑制小鼠成骨细胞MC3T3-E1凋亡
2011年
目的观察Apelin对小鼠成骨细胞MC3T3-E1凋亡的作用。方法 ELISA和吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞Bcl-2和Bax表达以及cytochrome c的分泌,通过荧光素(AFC、AMC)标记的底物来检测活性。结果 Apelin抑制无血清饥饿诱导的MC3T3-E1细胞凋亡;Apelin抑制无血清饥饿诱导的cyto-chrome c的分泌和caspase-3、caspase-8c、aspase-9的活化;Apelin抑制地塞米松或肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的MC3T3-E1细胞凋亡。结论 Apelin可抑制成骨细胞凋亡。
邓春雷
张磊屹
吕国华
唐四元
关键词:
APELIN
成骨细胞
凋亡
孕激素对成骨细胞凋亡的影响及其机制
2010年
目的探讨孕激素对成骨细胞凋亡的影响及其机制。方法以Western blot分析测定鼠原成骨细胞(MC3T3-E1)孕激素受体的表达水平和细胞色素C释放,吖啶橙/溴乙碇(AO/EB)染色和夹心法酶免法分析测定细胞凋亡,荧光底物显色法估计半胱天冬蛋白酶-9/3的活性。结果在孕激素浓度为10^-10mol/L、10^-9mol/L及10^-8mol/L细胞培养中,细胞凋亡程度分别为1.93±0.12、1.57±0.13和0.79±0.14,均明显低于无血清细胞培养(2.97±0.22),差异有统计学意义(均为P〈0.01);添加10μmol/L孕激素受体拮抗剂RU486后,细胞凋亡程度与无血清培养差异无统计学意义(2.88±0.21,P〉0.05);孕激素对细胞色素C的释放及半胱天冬蛋白酶-9/3活性的抑制作用均被逆转。结论孕激素通过激素受体及其下游的线粒体信号通路抑制成骨细胞凋亡,这可能与孕激素促进骨形成的作用机制有关。
王清平
谢辉
唐四元
王旦
李辉
罗湘杭
廖二元
关键词:
孕激素
成骨细胞
细胞凋亡
Apelin促进小鼠成骨细胞MC3T3-E1的增殖
2011年
目的观察Apelin对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖和分化的作用,探讨其可能的作用机制。方法 RT-PCR检测MC3T3-E1细胞APJ(Apelin受体)的表达、Western blot、ELISA、放射免疫法和[3H]TdR-掺入法检测MAPKs和Akt的激活,以及MC3T3-E1细胞的增殖和分化指标;用PI3-K抑制剂LY294002,AKT抑制剂HIMO和JNK抑制剂SP600125预处理以观察Apelin影响MC3T3-E1细胞增殖的信号转导机制。结果 MC3T3-E1细胞表达APJ;Apelin对MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶(alkali phosphatase,ALP)活性、骨钙素(osteocalcin,OC)和Ⅰ型胶原(type Ⅰ collagen)的分泌及Runx2蛋白的表达无影响;Apelin促进MC3T3-E1细胞增殖;Apelin诱导JNK和PI3-K/AKT的磷酸化;PI3-K抑制剂LY294002,AKT抑制剂HIMO和JNK抑制剂SP600125均可以抑制Apelin对MC3T3-E1细胞的促增殖作用。结论 MC3T3-E1细胞表达APJ;Apelin通过JNK和PI3-K信号转导通路促进MC3T3-E1细胞增殖,但对其分化无影响。
邓春雷
张磊屹
吕国华
唐四元
关键词:
APELIN
成骨细胞
增殖
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