国家自然科学基金(30971704)
- 作品数：11 被引量：45H指数：5
- 相关作者：刘卫群戚元成胡曼王菲菲宋海龙更多>>
- 相关机构：河南农业大学河南工业大学黔西南民族职业技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省教育厅自然科学基金国家粮食丰产科技工程更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 转录因子NAC及其在植物生长发育中的作用被引量：8
- 2019年
- NAC蛋白是植物特异性转录因子家族中最大家族之一,参与植物生命过程中的基因表达调控,广泛存在于陆生植物中。NAC蛋白的结构决定了其对应的生物学功能。因此,对于NAC蛋白的结构研究有助于了解和阐述其在植物生长发育中生物学功能的多样性。本研究主要围绕结构和功能两方面进行综述:首先从NAC蛋白的起源、结构和分类角度出发来对NAC蛋白结构进行总结;其次就植物生长发育和对胁迫的应答反应两个方面概述其生物学功能,并评述了NAC蛋白的调控机制。同时,结合本课题组在烟草NAC蛋白方面的研究工作,对NAC转录因子在烟草中的研究进展进行概述。
- 李桂玲李桂玲刘卫群
- 关键词：NAC转录因子烟草
- 水稻幼苗特异应答H_2O_2的miRNA169b启动子表达载体的构建
- 2011年
- 目的:研究microRNA169b(miRNA169b)启动子不同长度片段的活性及自身调控。方法:用生物信息学方法分析水稻中miRNA169b前体上游1500 bp序列,并从水稻幼苗基因组DNA中扩增miRNA169b前体上游500、1000和1500 bp启动子片段,分别将3个片段克隆至萤光素酶报告基因载体p5XGal4-LUC上。结果:构建了miRNA169b启动子重组载体,序列分析表明与预期结果一致。结论:miRNA169b启动子调控的萤光素酶报告基因表达载体的构建,为研究水稻中miRNA基因自身的转录奠定了基础。
- 徐文王正明刘进元刘卫群
- 关键词：水稻微小RNA启动子H2O2
- 油菜素内酯对裸燕麦常温和高温胁迫下生长形态及生理特性的影响被引量：11
- 2017年
- 【目的】探讨油菜素内酯对裸燕麦生长发育和抗氧化代谢的调节机理,为提高裸燕麦耐热性和生产力提供参考依据。【方法】以喷蒸馏水为对照(CK),对长势一致的裸燕麦喷施浓度为0.01、0.10和1.00 mg/L的油菜素内酯,进行常温(白天20℃/晚上15℃)和高温(白天38℃/晚上25℃)环境培养,处理7 d后进行形态和生理生化指标测定。【结果】在常温下,喷施油菜素内酯可增加裸燕麦的叶绿素含量,增强光合作用,促进有机物质的积累,进而提高其生物量,其中株高、鲜重和干重以1.00 mg/L处理最高,分别高于常温CK 23%、26%和123%;叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总含量均以0.10 mg/L处理最高,分别高于常温CK 81%、98%和86%。高温胁迫下喷施油菜素内酯可明显提高裸燕麦的耐热性,提高其根系活力及抗氧化酶活性,降低膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)含量,其中以0.10 mg/L处理根系活力最高(154.16μg/g·h),MDA含量最低(17.54 nmol/g),可溶性蛋白、可溶性糖含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性均达最大值,分别为28.75 mg/g、26.75 mg/g、842.71 U/g FW和199.43 U/g·min。【结论】常温环境下,喷施0.10和1.00 mg/L的油菜素内酯对裸燕麦生长发育的促进作用最显著;高温胁迫下,喷施0.10 mg/L的油菜素内酯对提高裸燕麦耐热性的效果最佳。
- 王传凯郭淼
- 关键词：裸燕麦油菜素内酯高温胁迫光合色素抗氧化酶
- 烟碱生物合成分子机制的研究进展被引量：5
- 2011年
- 烟碱是烟草主要的生物碱,其生物合成受烟株生长时期、激素水平、生物和非生物胁迫等诸多因素的调控。从烟碱生物合成途径及相关酶、参与烟碱合成的调控因素、用于解析烟碱生物合成相关基因的方法等方面,综述了有关烟碱生物合成代谢的分子机制及其调控的研究进展,旨在为烟碱生物合成的基因调控、代谢工程提供参考。
- 戚元成刘卫群
- 关键词：烟草分子机制
- 烟草转录因子NtWRKY-R1的转录激活域鉴定
- 2015年
- 为确定烟草转录因子Nt WRKY-R1的转录激活域,本研究将Nt WRKY-R1的编码区分为7个不同片段,分别构建到酵母表达载体p GBKT7中与GAL4的DNA结合域融合,通过酵母双杂交试验确定,Nt WRKY-R1本身具有能够激活GAL4 BD转录起始的激活结构域,并将转录激活区定位于该转录因子蛋白肽链的N端75个氨基酸残基和C端80个氨基酸残基中。
- 杨金淼宋丹丹周祁宋海龙赵钰泽刘卫群
- 关键词：烟草酵母双杂交
- 打顶烟草根尖组织抑制性消减cDNA文库的构建及其序列分析被引量：2
- 2011年
- 【目的】构建烟草打顶后根尖组织的消减文库,寻找调控烟碱生物合成的相关候选基因。【方法】以打顶株为测验子(tester)、以非打顶株为驱赶子(driver),利用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)和反向Northern杂交技术构建和筛选烟草打顶前后根尖组织消减文库,并对差异表达克隆进行生物信息学分析。【结果】构建了具有高消减效率的cDNA文库。PCR验证消减文库阳性克隆的插入片段为200—1 000 bp。经反向Northern杂交,从850个克隆中筛选到560个杂交信号差异明显的克隆,测序后得到273条有效序列。对273个已知功能基因的ESTs进行分类,生物碱合成类占4%、植物激素代谢类占3%、信号转导和转录因子类占18%、胁迫和防御类占32%、蛋白质代谢占9%、碳代谢占6%、其它代谢占15%、功能未知类占13%。RT-PCR结果显示,NTAT84和NTAT71序列在烟株打顶后转录活性均升高。【结论】应用SSH技术构建了烟草打顶前后根尖组织消减cDNA文库。
- 戚元成马雷王菲菲刘卫群
- 关键词：烟草烟碱
- 烟草WRKY-R1基因的克隆及瞬时表达分析被引量：2
- 2014年
- 以烟草根尖组织cDNA为模板,RT-PCR结合电子克隆得到NtWRKY-R1基因的完整ORF,序列分析显示,NtWRKY-R1具有WRKY转录因子家族典型的WRKYGQK保守结构域及C2H2的锌指结构,属于WRKY转录因子家族第Ⅱ类。采用生物信息学方法对NtWRKY-R1蛋白的理化性质、进化关系和磷酸化位点进行预测和分析,结果表明,NtWRKY-R1与茄科植物保守结构域的同源性及系统进化关系最近;磷酸化位点分析显示该蛋白可能通过磷酸化作用修饰,进而对其相应的代谢活动进行调节。通过构建真核表达载体、建立瞬时表达分析体系,结果显示,NtWRKY-R1基因的过表达导致JA信号途径标记基因PDF1.2及烟碱合成关键酶基因PMT1表达量降低,推测NtWRKY-R1基因影响JA信号途径,进而调控烟碱合成。
- 胡曼宋丹丹杨金淼刘卫群
- 关键词：烟草基因克隆生物信息学分析瞬时表达分析信号途径
- 烟草花叶病毒侵染对光合组织中蛋白质的影响及其防治研究被引量：1
- 2018年
- 为了提高烟草对烟草花叶病毒(TMV)侵染的耐受性,筛选有效防治TMV的制剂,采用i TRAQ技术探寻TMV侵染烟草后不同时间段蛋白质组的变化。结果显示:光合系统、卟啉代谢和叶绿素代谢途径中PSⅡ32 ku protein、PSⅠP700 apoprotein A1、Cytochrome b/f complex subunitⅣ、Oxygen-evolving enhancer protein 1、Geranylgeranyl diphosphate reductase及Short-chain dehydrogenase TIC 32的表达量在TMV侵染后发生显著变化。在此基础上,筛选了对植物叶片组织具有保护作用的复配制剂A和B。采用qRT-PCR检测结果显示,制剂B提高了烟株光合途径和卟啉代谢与叶绿素代谢途径中关键基因(Oxygen-evolving enhancer protein 1、Short-chain dehydrogenase TIC32)的表达水平,降低了TMV对光合系统的破坏。进一步检测抗性基因N和PR1-a的表达量,并结合半叶枯斑试验,均表明制剂B对烟草花叶病具有显著的防治效果。
- 郝风声李丽华王静姚欣石永春赵佳佳郭红祥刘卫群
- 关键词：烟草花叶病毒蛋白质组光合系统
- 烟草中NAC类转录因子基因的克隆及分析被引量：4
- 2011年
- 【目的】克隆烟草NAC类转录因子基因,分析其序列特征和表达特性,为深入研究NAC类转录因子对烟草打顶后根系的生长发育与烟碱生物合成之间的关系奠定基础。【方法】采用电子克隆结合RT-PCR获得烟草NtNAC-R1全长cDNA序列,并进行生物信息学分析,用pRESTB原核表达系统进行该基因的原核表达。分别采用RT-PCR和Northern杂交对烟草打顶前、后根尖组织中NtNAC-R1的表达模式进行分析。【结果】烟草NtNAC-R1开放性阅读框架长度为936 bp,编码311个氨基酸,具有NAC转录因子家族典型的保守结构域。系统进化分析表明,该基因与矮牵牛NAC亲缘关系较近,属茄科植物特异NAC家族,在原核细胞中具有表达活性。该基因在烟草根中的表达水平最高,在烟草打顶后2—4 h表达水平下降,随后上升。【结论】从烟草根尖组织中克隆了一个NAC转录因子基因NtNAC-R1,该基因在根系中具有高水平表达,在烟草打顶后2—4 h表达水平显著降低,具有响应烟草打顶所导致的信号传递作用。
- 戚元成王菲菲刘卫群高美娟
- 关键词：烟草RT-PCRNORTHERN杂交
- 外源ALA对常温和高温条件下裸燕麦生长发育及抗氧化酶活性的影响被引量：7
- 2017年
- 以盆栽裸燕麦为试验材料,研究了常温和高温条件下喷施0、10、50、100 mg/L的5-氨基乙酰丙酸(ALA)对裸燕麦生长发育和抗氧化酶活性的影响,以期为提高裸燕麦耐热性和生产力提供参考依据。结果表明,在常温条件下,施用ALA增加了裸燕麦株高、叶长、叶宽、叶面积、干鲜质量、叶绿素a含量、叶绿素a/b、类胡萝卜素含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性。其中,叶面积、叶宽、干鲜质量、SOD和POD活性均以50 mg/L ALA处理最高,株高、叶长、叶绿素a含量、类胡萝卜素含量、叶绿素a/b、CAT活性均以100 mg/L ALA处理最高。在高温条件下,裸燕麦生长受到抑制,喷施ALA可减轻高温胁迫对裸燕麦的伤害,以50 mg/L ALA处理效果最佳,该处理下裸燕麦株高、叶面积、叶长、叶宽、鲜质量、干质量、叶绿素a含量、类胡萝卜素含量、叶绿素a/b及SOD、POD、CAT活性最高,分别较不施用ALA处理提高13.0%、43.6%、53.5%、39.6%、116.4%、34.5%、54.5%、21.8%、47.4%、19.1%、38.9%、105.4%。
- 王传凯郭淼
- 关键词：裸燕麦5-氨基乙酰丙酸高温胁迫抗氧化酶
