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国家自然科学基金(30600667)

作品数:8 被引量:19H指数:3
相关作者:高庆蕾叶飞谢大兴马丁周剑锋更多>>
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文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生

主题

  • 4篇细胞
  • 3篇凋亡
  • 3篇基因
  • 3篇寡核苷酸
  • 3篇核苷酸
  • 3篇反义
  • 3篇反义寡核苷酸
  • 3篇PTEN
  • 2篇顺铂
  • 2篇顺铂诱导
  • 2篇周期
  • 2篇细胞凋亡
  • 2篇细胞周期
  • 2篇细胞周期检测...
  • 2篇细胞周期检测...
  • 2篇敏感性
  • 2篇激酶
  • 2篇放疗
  • 2篇癌细胞
  • 2篇AKT

机构

  • 6篇华中科技大学

作者

  • 5篇叶飞
  • 5篇高庆蕾
  • 4篇谢大兴
  • 3篇马丁
  • 3篇周剑锋
  • 3篇卢运萍
  • 1篇王俊
  • 1篇邢辉
  • 1篇朱涛
  • 1篇王世宣
  • 1篇雷霆
  • 1篇黄晓园
  • 1篇卢云萍
  • 1篇夏曦

传媒

  • 2篇中国妇幼保健
  • 2篇中华肿瘤杂志
  • 1篇现代妇产科进...
  • 1篇中华实验外科...
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇Journa...

年份

  • 4篇2009
  • 4篇2008
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
灭活Chk1/2基因增强H4细胞放疗后凋亡敏感性
2009年
目的观察反义封闭Chk1和/或Chk2基因,阻断细胞周期检测点信号传导通路对胶质瘤H4细胞放疗后细胞周期和凋亡的影响,评价Chkl和Chk2基因作为肿瘤治疗靶点的有效性。方法流式细胞仪检测不同剂量^60Co照射引起的H4细胞周期和凋亡的动力学特点,以建立G2/M期细胞周期阻滞模型;Western blot法检测转染Chk1和Chk2正、反义寡核苷酸后,细胞内Chk1和Chk2蛋白表达;Annexin V—PI法检测单转染或联合转染Chk1/2反义寡核苷酸对放疗后H4细胞凋亡的影响。结果不同剂量的^60Co照射可引起H4细胞G2/M期阻滞,以10Gy^60Co照射12h G2/M期阻滞最明显;单独反义封闭Chk1或Chk2基因可增强放疗后凋亡敏感性100%-200%,而同时反义封闭Chk1和Chk2基因具有协同作用,增强放疗后凋亡敏感性300%,其机制是通过解除G2/M期阻滞实现的。结论放疗可激活细胞周期检测点信号传导通路导致放疗抵抗,而阻断该信号通路的关键激酶Chk1和Chk2可显著增强放疗后凋亡敏感性。
叶飞高庆蕾王俊雷霆
关键词:反义寡核苷酸类脱噬作用
PTEN coding product:a new marker for tumorigenesis and progession of endometrial carcinoma
2008年
Objective:To investigate the expression of PTEN in carcinogenesis and development of endometrial carcinoma.Methods:The expression of PTEN was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)methods from 24 cases with endometrial carcinoma,10 cases with endometrial atypical hyperplasia,10 cases with endometrial hyperplasia and 10 cases with normal endometrium and by SP immunohistochemical methods from 73 cases with endometrial carcinoma,25 cases with endometrial atypical hyperplasia,71 cases with endometrial hyperplasia and 31 cases with normal endometrium.Results:PTEN expression of both RNA and protein in patients with endometrial carcinoma and endometrial atypical hyperplasia was significantly lower than that of patients with endometrial hyperplasia and normal endometrium.mRNA relative value was 0.35±0.13,0.46±0.11,2.32±0.32,2.45±0.51,respectively.Loss of PTEN expression rates were 66.67%(38/57),76.00%(19/25),5.63%(4/71),0(0/31),repectively.The results were also compared with clinical parameters.Loss of PTEN expression in patients with endometrial carcinoma was significantly related to histological classification(P<0.0001)and differentiation(P<0.05).It was not related to depth of myometrium invasion and clinical stage(P>0.05).Conclusion:Loss of PTEN expression is an early event in endometrial tumorigenesis.Detection of PTEN protein may be a diagnostic biomarker for endometrial precancers and adenocarcinoma.
Gao Qinglei Li Jing Xing Hui Lu Yunping Zhou Jianfeng Ma Ding
关键词:PTEN基因
下调Chk1和Chk2基因促进射线照射后HeLa细胞凋亡被引量:1
2009年
目的探讨下调Chk1和Chk2基因对HeLa细胞射线照射后细胞周期和凋亡的影响及其作用机制。方法应用流式细胞仪检测不同剂量^60Co照射引起的HeLa细胞周期和凋亡的动力学变化,以激光共聚焦显微镜和Western blot法检测转染Chk1和Chk2正义寡核苷酸(sODN)和反义寡核苷酸(AsODN)对Chk1和Chk2蛋白表达的影响,以AnnexinV—PI法、凋亡细胞的周期特异性检测法及透射电镜观察单独或联合转染Chk1和Chk2反义寡核苷酸对射线照射后HeLa细胞凋亡的影响。结果不同剂量的^60Co照射可引起HeLa细胞不同程度的G2/M期阻滞,15 Gy的^60Co照射48h后,G2/M期细胞可达75.53%±3.72%。当细胞周期阻滞解除后,细胞凋亡明显增加。转染Chk1 AsODN组的早期凋亡、晚期凋亡和死亡细胞共有94.42%±4.78%,明显高于转染Chk1 sODN组(44.35%±2.08%,P〈0.0001);转染Chk2 AsODN组的凋亡细胞共有93.08%±5.24%,明显高于转染Chk2 sODN组(48.98%±-3.35%,P〈0.0001);而共转染Chk1和Chk2 AsODN组的凋亡细胞共有94.26%±4.92%,明显高于共转染Chk1和chk2 sODN组(42.46%±2.56%,P〈0.0001);共转染Chk1和chk2 AsODN组与仅转染Chk1 AsODN或Chk2 AsODN组比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。凋亡细胞的周期特异性检测结果显示,转染Chk1和Chk2 sODN引起的凋亡主要来自于G1期细胞,而转染Chk1 AsODN或Chk2 AsODN后,G1期、S期、G2/M期的凋亡细胞均较对应sODN转染组明显增加,尤其共转染Chk1和Chk2 AsODN组更为显著。结论射线照射激活细胞周期检测点信号传导通路引起细胞自我保护,是临床上产生放疗抵抗的主要原因,而阻断该信号通路的关键激酶Chk1或Chk2,可显著增强细胞的放射敏感性,其机制在于改变了凋亡细胞的周期特异性,凋亡细胞可以来自G1、S、G2/M各周期的细胞。
高庆蕾叶飞邢辉谢大兴卢运萍周剑锋马丁
关键词:辐射耐受性HELA细胞系凋亡
Chk1/2反义寡核苷酸对顺铂诱导的A549细胞生物学行为的影响被引量:1
2008年
目的观察顺铂作用下A549细胞的细胞周期变化规律和Chk1、Chk2(Chk1/2)反义寡核苷酸(AsODN)对顺铂(DDP)诱导的A549细胞生物学行为的影响。方法流式细胞术SubG1法检测DDP作用下A549细胞周期和凋亡的动力学变化;蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测转染Chk1/2AsODN后Chk1/2蛋白的表达;流式细胞仪AnnexinⅤ-FITC法和SubG1法检测转染Chk1/2AsODN后DDP作用下的细胞周期和凋亡变化。结果10μmol/LDDP作用12h后A549细胞出现明显的S期阻滞,Chk1/2AsODN对A549细胞中Chk1/2蛋白表达有明显抑制作用,转染Chk1/2AsODN可显著增加DDP诱导下A549细胞的凋亡率约200%~300%,而联合转染Chk1/2AsODN与单转染相比,凋亡无明显增加(P>0.05)。转染Chk1/2AsODN引起化疗增敏的机制是通过解除S期阻滞这种肿瘤细胞的自我保护机制实现的。结论Chk1/2可作为肺癌化疗药物增敏治疗的有效靶点,灭活Chk1/2基因可以显著增强肿瘤细胞化疗的敏感性。
叶飞高庆蕾黄晓园谢大兴卢运萍周剑锋
关键词:顺铂
Correlation between PTEN Expression and PI3K/Akt Signal Pathway in Endometrial Carcinoma被引量:7
2009年
In order to investigate the role of the PTEN expression in carcinogenesis and development of endometrial carcinoma and clarify whether and how PTEN and PI3K/Akt pathway relate to endometrial carcinoma, the expression of PTEN and phospho-Akt was detected by semiquantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) methods and Western-blot from 24 cases of endometrial carcinoma, 10 cases of endometrial atypical hyperplasia, 10 cases of endometrial hyperplasia, and 10 cases of normal endometriurn. SP immunohistochemical methods were used to measure levels of PTEN protein expression in following 5 study groups: 31 cases of endometrium in proliferative phase, 30 cases of endometrium in secretory phase, 71 cases of endometrial hyperplasia, 25 cases of atypical hyperplasia and 73 cases of endometrial carcinoma. Immunostaining score of PTEN was 3.39±0.15 in proliferative phase, 1.90±0.21 in secretory phase, 3.34±0.29 in endometrial hyperplasia, 0.62±0.11 in atypical hyperplasia, and 0.74±0.19 in endometrial carcinoma, respectively. PTEN mRNA relative value in normal endometrium, endometrial hyperplasia, endometrial atypical hyperplasia, and endometrial carcinoma was 2.45±0.51, 2.32±0.32, 0.46±0.11, and 0.35±0.13 respectively. The expression levels of PTEN mRNA and protein in patients with endometrial carcinoma and atypical hyperplasia were significantly lower than in those of proliferative phase and with endometrial hyperplasia. The level of PTEN expression in patients with endometrial carcinoma was significantly related to tissue type (P〈0.005), differentiation (P〈0.05) and clinical stage (P〈0.05), but not to depth of myometrium invasion (P〉0.05). Western blot analysis revealed that Phospho-Akt level in PTEN negative cases was significantly higher, and there was a negative correlation between PTEN and phospho-Akt (r=-0.8973, P〈0.0001). It was suggested that loss of PTEN expression was an early event in endometrial tumorigenesis. The phosphorylation of Akt indu
高庆蕾叶飞夏曦邢辉卢运萍周剑锋马丁
关键词:PTENAKTIMMUNOHISTOCHEMISTRY
灭活细胞周期检测点激酶基因对顺铂诱导肺癌细胞凋亡的影响被引量:1
2009年
目的观察顺铂(DDP)作用下肺癌A549细胞系的细胞周期和凋亡的动力学特点,以及灭活细胞周期检测点激酶1(Chk1)和细胞周期检测点激酶2(Chk2)基因对DDP诱导的肺癌细胞凋亡的影响。方法优化转染条件后,将肺癌A549细胞分为8组进行转染,分别为正常组(未经任何处理的A549细胞)、对照组(A549细胞接受10μmol/L的DDP作用12h)、转染Chk1正义寡核苷酸链(sODN)组、转染Chk1反义寡核苷酸链(AsODN)组、转染Chk2sODN组、转染Chk2AsODN组、联合转染Chk1和Chk2sODN组以及联合转染Chk1和Chk2AsODN组,其中后6组转染24h后再以10μmol/L的DDP处理12h。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法,检测转染Chk1或Chk2sODN、AsODN后,A549细胞中Chk1或Chk2mRNA和蛋白的表达。采用流式细胞仪Annexin V-FITC法和Sub-G1法,检测转染Chk1和(或)Chk2 sODN、AsODN后,DDP作用下A549细胞的细胞周期和凋亡变化。结果10μmol/L的DDP作用12h后,非同步化处理的A549细胞出现了明显的S期阻滞现象。转染24h后,Chk1或Chk2AsODN可明显抑制A549细胞中Chk1mRNA和蛋白或Chk2 mRNA和蛋白的表达。与单独转染Chk1或Chk2sODN组相比,单独转染Chk1或Chk2 AsODN组DDP诱导下A549细胞的凋亡率约提高了1—2倍(P〈0.05);但联合转染Chk1和Chk2 AsODN组与单独转染Chk1 AsODN或Chk2 AsODN组相比,A549细胞凋亡率的差异无统计学意义(P=0.521和P=0.339)。结论灭活Chk1和Chk2基因引起化疗增敏的机制可能是通过解除S期阻滞这种肿瘤细胞的自我保护机制实现的,Chk1和Chk2基因可作为肺癌化疗药物增敏治疗的有效靶点。
叶飞谢大兴卢运萍高庆蕾
关键词:化学疗法CHK1CHK2细胞周期凋亡
灭活细胞周期检测点激酶增强乳腺癌细胞放疗敏感性被引量:5
2008年
目的:乳腺癌是严重威胁妇女健康的重要疾病,放疗常常作为乳腺癌综合治疗的重要手段。研究表明,临床上产生放疗抵抗的主要原因是由于放疗激活细胞周期检测点信号传导通路引起细胞自我修复而逃避凋亡,因而目前通过抑制细胞周期检测点信号通路增强肿瘤放、化疗敏感性,已成为国际上抗肿瘤治疗的一个重要方向和研究热点。Chk1和Chk2是细胞周期检测点中最重要的丝氨酸/苏氨酸激酶,本研究通过反义封闭Chk1和/或Chk2基因,阻断细胞周期检测点信号传导通路,研究对乳腺癌MDA-MB-231细胞放疗后细胞周期和凋亡的影响,从而评价Chk1和Chk2基因作为肿瘤治疗靶点的有效性。方法:Western-Blot法检测转染Chk1和Chk2正、反义寡核苷酸后,细胞内Chk1和Chk2蛋白表达情况;流式细胞仪AnnexinV-PI法和SubG1法检测单转染或联合转染Chk1/2反义寡核苷酸对放疗后MDA-MB-231细胞凋亡和细胞周期的影响。结果:反义封闭Chk1或Chk2基因可解除G2/M期阻滞,增强放疗后凋亡敏感性,而同时反义封闭Chk1和Chk2基因具有协同作用。结论:阻断细胞周期检测点信号通路的关键激酶Chk1和Chk2可显著增强放疗后凋亡敏感性。
高庆蕾叶飞谢大兴卢云萍周剑锋马丁
关键词:反义寡核苷酸
子宫内膜组织中PTEN表达与Akt信号通路的相关性被引量:4
2008年
目的:探讨抑癌基因PTEN与子宫内膜癌发生、发展的关系及与Akt信号传导通路的相关性。方法:应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法和Western-blot方法测定24例子宫内膜癌、10例子宫内膜非典型增生、10例子宫内膜增殖症和10例正常子宫内膜组织PTENmRNA和蛋白水平的表达及Akt磷酸化水平的变化;免疫组织化学SP法检测增生期内膜31例(增生期组),分泌期内膜30例(分泌期组),内膜增殖症71例(增殖症组),非典型增生内膜25例(非典型增生组),子宫内膜癌73例(内膜癌组)组织中PTEN蛋白水平的表达,将结果与各病例的组织学类型、组织学分级、肌层浸润深度和临床分期等生物学行为进行相关性分析。结果:PTEN在增生期组、分泌期组、增殖症组、非典型增生组、内膜癌组的免疫组化染色强度分别为:3.39±0.15、1.90±0.21、3.34±0.29、0.62±0.11、0.74±0.19,mRNA相对含量在正常内膜、增殖症、非典型增生及内膜癌组中分别为2.45±0.51、2.32±0.32、0.46±0.11、0.35±0.13。在转录和蛋白水平子宫内膜腺癌组和癌前病变组中PTEN的表达明显低于内膜增殖症组和正常子宫内膜组(P<0.0001)。PTEN蛋白表达与组织学类型、组织学分级和临床分期有关(P<0.05),与子宫内膜癌肌层浸润深度无关(P>0.05)。Western-blot结果显示,phospho-Akt表达水平在PTEN表达阴性病例中明显升高,与PTEN表达呈负相关(r=-0.8973,P<0.0001)。结论:PTEN表达缺失是子宫内膜癌发生的早期事件;PTEN蛋白表达缺失导致Akt信号传导通路持续活化参与了子宫内膜癌的发生、发展。
高庆蕾夏曦朱涛卢运萍王世宣马丁
关键词:子宫内膜PTENAKT
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