国家自然科学基金(30571881)
- 作品数：5 被引量：26H指数：3
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- 相关机构：安徽医科大学第一附属医院安徽医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠Wnt-3a基因在NIH3T3细胞中的表达及其活性的初步分析
- 2006年
- 目的:表达具备生物活性的重组小鼠Wnt-3a信号蛋白.方法:应用脂质体转染试剂将重组真核表达载体pSecTag2/HygroB-Wnt3a转染并筛选稳定表达的NIH3T3细胞,WesternBlot鉴定重组Wnt-3a蛋白的表达,并对Wnt3a/NIH3T3细胞的融合密度及抗凋亡能力给予检测.结果:Wnt-3a信号蛋白在Wnt3a/NIH3T3细胞中获得稳定表达,Wnt-3a信号蛋白能够明显提高NIH3T3细胞的融合密度及抗凋亡能力.结论:在NIH3T3细胞中表达的重组Wnt-3a信号蛋白具备生物活性.
- 尹宗生张辉张胜权王伟华兴一胡勇李光武
- 关键词：真核表达细胞凋亡
- 急性脊髓挫伤性模型的制备及观察被引量：10
- 2007年
- 目的:制备急性挫伤型脊髓损伤动物模型.通过观察其行为学变化和脊髓组织的病理改变,为临床治疗脊髓损伤提供理论依据.方法:成年雌性SD大鼠,咬除T10棘突及相应椎板,用改良的Allen法制成脊髓背侧挫伤型模型,对照组仅咬除椎板,分不同的时间行为学评分和病理检测.结果:对照组麻醉恢复后能站立行走,脊髓结构正常;实验组行为学评分较低,脊髓损伤区域出现明显的病理改变,但随着时间的推移,可以部分的恢复.结论:实验组和对照组相比具有显著差异,此模型的建立为进一步了解挫伤型脊髓损伤的发病机制,研究此损伤的病理生理改变及筛选有效的预防治疗提供了良好的基础.
- 祖波尹宗生张辉
- 关键词：脊髓损伤疾病模型病理学
- 成体小鼠脊髓实质神经干细胞的分离培养及其多能性的鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的从成年小鼠脊髓实质中分离培养并鉴定成体神经干细胞。方法采用无血清培养基及单细胞克隆技术,从成年小鼠脊髓实质中分离培养获得大量具备单细胞克隆能力的细胞,经免疫荧光染色证实单克隆细胞表达Nestin抗原并在分化后表达各种特异性的神经细胞抗原。结果从成年小鼠脊髓实质中分离培养获得的具备连续克隆能力的细胞可表达神经干细胞的Nestin抗原,并且分化后表达神经元及胶质细胞的特异性抗原。结论成功地从成年小鼠的脊髓实质中分离出具备增殖分化能力的成体神经干细胞,为进一步利用其进行脊髓损伤治疗的研究提供了实验基础。
- 张辉尹宗生王伟华兴一胡勇张胜权李光武
- 关键词：神经干细胞细胞培养脊髓损伤
- 新生小鼠脊髓神经干细胞体外增殖及其多潜能分化特性
- 2006年
- 目的:观察新生小鼠脊髓神经干细胞的体外增殖及其分化特性。方法:实验于2005-11/2006-02在安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室完成。①在无菌条件下,利用显微解剖分离新生小鼠(出生后2d内)脊髓,采用原代机械吹打使其成为单细胞悬液,离心,弃去上清液,加入干细胞培养液(含20μg/L碱性成纤维细胞生长因子,20μg/L表皮生长因子,B27辅助培养液),以1×108L-1密度接种于25mL培养瓶中,进行原代培养。②将原代培养7d左右的细胞再次离心,弃去上清,加入干细胞培养液,机械吹打成单细胞悬液,以5×107L-1密度进行传代培养,每六七天传代1次。③机械吹打制成的单细胞悬液,经过传代培养,重新增殖为神经球,采用巢蛋白抗体鉴定培养细胞,用体积分数为0.1的胎牛血清诱导神经干细胞分化后,用神经元和星型胶质细胞标志物微管相关蛋白,胶质纤维酸性蛋白相应抗体检测神经干细胞分化情况。结果:①脊髓源性神经干细胞形态学观察:在细胞培养第3,4天即可见培养基中出现由几个或十几个细胞组成的结构紧密、大小不等的悬浮细胞团块,称之为“神经细胞球”;随着培养时间的延长和多次传代换液,细胞增殖迅速,神经细胞球数目明显增多。②脊髓神经干细胞的分化与鉴定:将神经球转入含体积分数为0.1的胎牛血清的培养液中,数小时内迅速贴壁并开始分化,5d后分化的细胞呈现出3种典型的神经细胞形态;免疫细胞化学检测神经细胞球巢蛋白染色阳性及其分化的神经元和星型胶质细胞微管相关蛋白、胶质纤维酸性蛋白分别染色阳性。结论:新生小鼠脊髓存在具有多分化潜能的神经干细胞,它们可以在体外大量增殖,经过诱导可朝神经元和胶质细胞的方向分化。
- 祖波尹宗生张辉
- 关键词：脊髓干细胞中间丝蛋白质类小鼠
- 机械性脊髓损伤模型的建立及其评价被引量：13
- 2006年
- 目的:了解国内外机械性脊髓损伤模型的研究进展,为临床治疗脊髓损伤提供理论依据。资料来源:应用计算机检索Medline、万方数据库、重庆维普数据库和学术期刊数据库,检索时间段为1983-01/2004-07,检索内容为关于机械性脊髓损伤模型的文章,英文检索词“animalmodel,spinalcordinjury”,中文检索词“脊髓损伤,动物模型”。资料选择:对检索到的文献进行初审,排除题目中不含“脊髓、模型”等词的文章。然后剩余文献查找全文。资料提炼:共收集中文112篇,排除题目中不含“脊髓、模型”等词的文章后纳入29篇。收集到含“animalmodel,spinalcordinjury”英文文献119篇,与模型建立有关19篇,与治疗有关12篇,与解剖和功能评定有关6篇。进一步查看全文,排除重复的文献,最后对25篇文献进行综述。资料综合:机械性脊髓损伤模型的种类有锐性损伤模型(如脊髓全切模型、脊髓半切模型等)、挫伤型模型(包括脊髓背侧损伤模型和脊髓腹侧损伤模型)和钳夹压迫型脊髓损伤模型,各模型均有着各自的特点,可用来研究解决不同的神经生物方面的问题。机械性脊髓损伤模型的研究目前主要集中在构建,解剖和功能变化及治疗运用。结论:此模型的建立对进一步了解机械性脊髓损伤的发病机制,研究此种损伤的病理生理改变及筛选有效的预防治疗提供了良好的基础。
- 祖波尹宗生
- 关键词：脊髓损伤
