安徽省自然科学基金(11040606M176)
- 作品数：10 被引量：25H指数：3
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- 相关机构：安徽医科大学附属省立医院安徽医科大学更多>>
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- 新生鼠卵巢中卵泡膜干细胞的分离培养及鉴定
- 2012年
- 目的分离、培养、鉴定小鼠卵巢组织中的卵泡膜干细胞。方法取2～4 d新生鼠卵巢组织,胶原酶、胰蛋白酶联合消化获得单个细胞悬液,GSM-K无血清培养基培养细胞观察细胞球形成;RT-PCR法检测膜基因Ptch1和透明带基因Zp1、Zp2、Zp3的表达,免疫荧光法检测干细胞标记物碱性磷酸酶(AKP)、Oct4、膜细胞标记物Gli3与颗粒细胞标记物FSHR的表达;体外诱导分化,RT-PCR法检测分化标记物Gli2,油红O染色后观察。结果 GSM-K中培养2 d形成细胞球;Ptch1、AKP、Oct4和Gli3表达阳性,不表达Zp1、Zp2、Zp3和FSHR;诱导分化后,Gli2表达,油红O染色阳性。结论新生鼠卵巢组织中存在卵泡膜干细胞,且具有分化潜能。
- 刘然冯定庆宣恒华凌斌
- 关键词：卵巢分化
- Piwil2基因表达诱导NIH3T3细胞恶性转化被引量：4
- 2013年
- 目的通过建立稳定表达外源Piwil2基因的NIH3T3细胞,初步探讨Piwil2基因对NIH3T3细胞生物学特性的调控作用。方法通过脂质体介导的方法和G418的筛选,建立稳定表达Piwil2基因的NIH3T3细胞株,之后利用细胞集落形成实验、细胞增殖实验、细胞周期分析和裸鼠成瘤实验,观察Piwil2基因表达对NIH3T3细胞的生物学特性的影响。结果建立了稳定过表达Piwil2基因的NIH3T3细胞株。与对照组空白载体细胞系相比,过表达Piwil2基因的NIH3T3细胞增殖和集落形成能力增强;细胞周期G0/G1期减少、S期明显升高;接种裸鼠后形成的肿瘤体积显著大于对照组。结论 Piwil2基因在NIH3T3细胞中稳定表达具有诱导正常NIH3T3细胞发生恶性转化的重要生物功能。
- 李跃波冯定庆凌斌程敏
- 关键词：基因表达3T3细胞
- NS-398抑制SKOV3细胞恶性生物学特性的机制被引量：2
- 2014年
- 目的探讨环氧合酶2(COX2)抑制剂NS-398对卵巢癌细胞恶性生物学特性的影响。方法以卵巢癌细胞株SKOV3为研究对象,根据NS-398的处理分为对照组、实验组。利用MTS法和免疫组化法检测Ki-67蛋白表达,从而监测NS-398对SKOV3细胞增殖的影响;采用划痕实验和侵袭实验分别观察细胞迁移和侵袭能力的变化,采用RT-PCR法检测基质金属蛋白酶(MMP)mRNA的表达情况;采用实时荧光定量PCR及Western blot检测上皮间质转化(EMT)相关分子表达情况。结果 1 MTS增殖实验表明NS-398对SKOV3细胞增殖作用无影响,免疫组化结果与之一致;2划痕实验和侵袭实验分别显示,NS-398显著下调SKOV3细胞的迁移和侵袭能力,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR检测结果表明NS-398抑制MMP的mRNA表达;3 Western blot结果表明NS-398上调SKOV3细胞E-cadherin的表达,下调Vimentin、Slug、Snail的表达。结论 COX2抑制剂通过阻止MMP的表达和EMT的发生,从而下调SKOV3细胞的迁移、侵袭能力。
- 赵婷婷凌斌冯定庆申震周颖
- 关键词：卵巢上皮癌NS-398迁移
- E-cadherin表达和AKT磷酸化水平与宫颈病变的相关性分析被引量：5
- 2014年
- 目的探讨E-cadherin的表达和AKT的磷酸化水平与宫颈病变程度的相关性。方法收集20例正常宫颈组织、30例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织、50例宫颈鳞癌组织,采用荧光实时定量PCR和免疫组化方法分别检测组织中Ecadherin、β-catenin、p-AKT和Loricrin的mRNA及蛋白表达情况,分析E-cadherin表达和AKT磷酸化水平的相关性,及其与宫颈病变程度和宫颈鳞癌分化程度的相关性。结果免疫组化结果显示,随着宫颈病变的进展,E-cadherin、Loricrin的表达逐渐降低,甚至缺失(P<0.05);在正常宫颈上皮β-catenin表达于胞膜,随着宫颈病变的进展,逐渐由胞膜向胞质和胞核转移,且表达阳性率逐渐降低(P<0.05);上述指标定量PCR结果与免疫组化结果基本一致。p-AKT的表达则随病变进展而逐渐升高(P<0.05)。相关分析显示,Ecadherin的表达与宫颈病变的程度及鳞癌的分化程度呈负相关(rs=-0.688,-0.438;P<0.01),而与p-AKT的表达则呈正相关(rs=0.462,0.692;P<0.01);E-cadherin与p-AKT的表达呈负相关(rs=-0.828,P<0.01)。结论 Ecadherin的表达缺失与AKT磷酸化水平的增高与宫颈病变的发生发展密切相关;二者联合可用于监测宫颈病变的进展,指导临床治疗方案。
- 田园冯定庆伍娇娇徐兵孙多祥胡卫平
- 关键词：E-CADHERINP-AKTLORICRIN宫颈鳞癌
- piRNA与PIWI蛋白家族功能的研究进展
- 2013年
- 生物体中的RNA可以分为编码RNA和非编码RNA两大类,非编码RNA中存在许多小分子RNA,它们组成了细胞中的RNA调控网络。近年来在哺乳动物的睾丸内发现了一种新型的非编码小分子RNA-piRNA,这种小分子RNA与Argonaute家族中的PIWI蛋白成员相结合才能发挥调控作用。两者共同参与基因表达和调控、蛋白质翻译、配子发生等生物学过程,对生物的生长发育产生了深远的影响。该文对piRNA和PIWI蛋白的结构、特性以及相互作用进行综述。
- 李跃波冯定庆凌斌
- 关键词：小分子RNA
- 组蛋白乙酰化修饰调控RAR-β2表达与宫颈病变的相关性被引量：3
- 2014年
- 目的：探讨组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达及宫颈病变发生发展的关系。方法：收集正常宫颈、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅱ-Ⅲ和宫颈鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）组织，分别采用免疫组织化学和WesternBlot方法检测AcH3、RAR—B：和Involucrin的表达；分析组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达及宫颈病变程度的关系。结果：随着宫颈病变的进展，AcH3、RAR-β2和Involucrin的表达逐渐降低，甚至缺失，组间差异有统计学意义（P〈0．05）；组蛋白乙酰化水平与RAR-β2表达呈正相关（r=0．797，P〈0．05），AcH3和RAR-β2的表达均与宫颈病变程度呈负相关[r=-0．5479（Ach3）,r=-0．585（RAR-β2），P〈0．05]。结论：组蛋白乙酰化修饰与RAR-β2表达调控有关，并可能参与宫颈癌的发生。
- 伍娇娇冯定庆田园徐汉杰李兵凌斌
- 关键词：宫颈上皮内瘤变宫颈鳞状细胞癌分化
- 肿瘤组蛋白乙酰化修饰及其临床应用研究进展
- 2013年
- 肿瘤的发生通常认为与基因突变所引起的各种调控蛋白的上调或者下调有关,然而最近观点认为,表观遗传学在肿瘤的发生及分化中起了关键性的作用.目前认为,在细胞生命活动的选择性基因沉默或基因表达过程中,包裹于染色质中的基因组DNA序列一般不发生改变;但细胞核内的染色质结构可以发生高度的动态变化,使一些特定基因组区域的转录活性呈现相应的改变.这种影响基因转录活性而不涉及DNA序列改变的基因表达调控方式称为表观遗传调控[1],其分子基础有两个方面,即针对DNA本身的修饰和对组蛋白的修饰.DNA和组蛋白的修饰通常以一种高度保守的方式,通过染色质修饰酶动态地发生改变.现在发现至少有4种不同的DNA修饰和16种组蛋白修饰方式[2,3].在肿瘤中,许多参与组蛋白修饰过程的蛋白常常失去调控.本文将目前研究最广泛的组蛋白修饰方式——组蛋白乙酰化和去乙酰化作用及其临床应用综述如下.
- 田园冯定庆胡卫平
- 关键词：肿瘤组蛋白乙酰化组蛋白去乙酰化酶抑制剂
- FSH和LH联合上调卵巢上皮性癌细胞侵袭能力的机制研究被引量：1
- 2014年
- 卵巢上皮性癌（卵巢癌）的病死率居妇科恶性肿瘤之首,约90％的卵巢癌被认为起源于正常卵巢表面上皮（ovarian surface epithelium,OSE）或内衬OSE的包涵囊肿.但卵巢癌发生发展的确切机制尚不明确.卵巢癌病情隐匿,易出现侵袭和转移,70％的患者确诊时已处于晚期.目前认为,妇女绝经后或卵巢功能不全者存在高促性腺激素状态,FSH和LH持续刺激可导致细胞过度增殖,最终可引发卵巢癌.
- 赵婷婷冯定庆凌斌
- 关键词：卵巢上皮性癌FSHLH妇科恶性肿瘤高促性腺激素
- 干细胞条件培养液促进小鼠卵母细胞体外成熟被引量：3
- 2012年
- 目的：研究骨髓问充质干细胞（MSCs）条件培养液对小鼠未成熟卵母细胞体外成熟的作用。方法：分离、培养小鼠MSCs，获得MSCs条件培养液。收集3类生发泡期卵母细胞，分别在对照培养基和条件培养液中培养，观察卵母细胞成熟率，判断最佳时间点；FDA、Hoechst33258和PI联合染色评价细胞活力；荧光标记检测皮质颗粒分布、迁移及纺锤体复合物的形成情况。结果：条件培养液组3类生发泡期卵母细胞的成熟率高于对照培养基组；其中，完全／大部分裸露的生发泡卵母细胞和周围有疏松的颗粒细胞包裹的生发泡卵母细胞的最佳体外成熟时间为16h，有完整的数层颗粒细胞紧密包裹的生发泡卵母细胞的最佳体外成熟时间为24h。体外成熟卵母细胞活力良好，皮质颗粒分布及纺锤体复合物形成与体内成熟卵母细胞一致。结论：MSCs条件培养液有利于小鼠体外成熟卵母细胞核、细胞质同步成熟，提高卵母细胞质量，是一种较好的体外成熟培养体系。
- 宣恒华冯定庆刘然赵卫东
- 关键词：卵母细胞间充质干细胞体外成熟皮质颗粒纺锤体
- 宫颈癌预后相关分子标志物的研究进展被引量：7
- 2013年
- 宫颈癌是女性常见的第三大恶性肿瘤。虽然宫颈癌筛查检测已经在临床广泛应用，诊断率和治疗机会有着明显的提升，但仍有许多患者死于转移和复发．肿瘤细胞通过各种途径转移播散至邻近和远处器官，如盆腔淋巴结、腹膜后等，是治疗失败和死亡的原因。因此，寻找敏感、
- 伍娇娇冯定庆凌斌
- 关键词：宫颈癌筛查相关分子标志物预后盆腔淋巴结治疗机
