国家自然科学基金(30600633)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：天津市环湖医院天津中医药大学天津医科大学更多>>
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- 针对bak的siRNA抑制由胶质瘤细胞诱导的树突状细胞凋亡及其机制被引量：4
- 2009年
- 目的探讨针对bak的siRNA抑制由胶质瘤诱导的树突状细胞的凋亡及其可能机制。方法转染表达针对bak的siRNA序列的质粒（A：229序、B：310序、C：579序、D：NC序）进入树突状细胞，并利用C418筛选出稳定表达株，通过Western blot和逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）的方法鉴定出稳定表达有效干扰序列的树突状细胞；稳定表达有效干扰序列的树突状细胞和胶质瘤细胞共培养（b组），设置a组空白DC2．4、c组胶质瘤细胞和DC2．4共培养2个对照组，24h后采用噻唑蓝（MTT）比色法观察其活性，同时通过Western blot检测Casoase-3、Caspase-8、胞质中细胞色素c（Cytc）的含量。结果含有效siRNA的质粒转染入树突状细胞后，通过C418筛选出了稳定表达株。Western blot和RT—PCR检测出310序列bak的表达降低（Western blot：A：0．83、B：0．14、C：0．75、D：0．89、未转染：0．92；RT—PCR：A：0．42、B：0．08、C：0．39、D：0．46、未转染：0．49，P〈0．05）。稳定表达有效干扰序列的树突状细胞和胶质瘤细胞共培养后，与c组比较树突状细胞的活性较高，树突状细胞的Caspase-8表达量差异无统计学意义（a：0．78、b：0．75、C：0．77，P〉0．05），Caspase-3及胞质中的Cytc减少（Caspase-3：a：0．67、b：0．70、C：0．21；Cytc：a：0．70、b：0．71、C：0．17，P〈0．05）。结论胶质瘤可诱导树突状细胞凋亡，凋亡途径可能是线粒体途径；关于bak的siRNA可抑制胶质瘤细胞诱导的树突状细胞的凋亡。
- 冯珂珂戴科芳黄楹
- 关键词：胶质瘤脱噬作用
- AAV-AS联合环磷酰胺治疗大鼠皮下胶质瘤效果观察被引量：1
- 2011年
- 目的观察腺相关病毒为载体血管抑素重组质粒(AAV-AS)联合环磷酰胺(CTX)治疗大鼠皮下胶质瘤的效果。方法大鼠皮下抑制胶质瘤C6细胞,建立荷C6胶质瘤大鼠模型,当肿瘤体积达250～280 mm3时,随机分为对照组、CTX组、AAV-AS组及联合组,分别腹腔内注射生理盐水、CTX、AAV-AS、CTX+AAV-AS。每隔3 d测量肿瘤的长、短径计算体积;于22 d后处死大鼠,采用免疫组化染色法标记抗CD31抗体计算瘤组织中的微血管密度(MVD),TUNEL法测算肿瘤细胞凋亡指数(AI)。结果对照组肿瘤体积为(2 060.339±82.028)mm3,MVD为(20±3)条/HP,AI为1.442±0.329;CTX组分别为(1 763.867±124.237)mm3、(18±5)条/HP、1.719±0.464,AAV-AS组分别为(1 229.910±141.646)mm3、(13±2)条/HP、3.653±0.238,联合组分别为(1 098.320±70.880)mm3、(8±3)条/HP、3.886±0.361。联合组肿瘤体积和MVD与其他组比较,P均<0.05;联合组AI与对照组及CTX组比较,P均<0.05,但与AAV-AS组比较,P>0.05。结论 AAV-AS联合CTX治疗大鼠皮下胶质瘤,可减小肿瘤体积,降低血管密度,间接促进肿瘤细胞凋亡。
- 王冠黄楹冯珂珂李耀华王增良
- 关键词：胶质瘤血管抑素腺相关病毒血管密度
- 靶向抗原递呈细胞激活Flk1重组减毒鼠伤寒沙门菌的构建及其抑制树突状细胞凋亡的初步研究
- 2009年
- 目的观察靶向抗原递呈细胞激活血管内皮生长因子受体-2(Flk1)的重组减毒鼠伤寒沙门菌对树突状细胞凋亡的抑制作用。方法构建含Flk1与靶向抗凋亡基因BAK siRNA的重组质粒载体pFlk1-U6BAK,将其转化至减毒鼠伤寒沙门菌株中,携带pFlk1-U6BAK和pFlk1的重组减毒鼠伤寒沙门菌分别感染经体外培养的小鼠树突状细胞;Western blotting法检测树突状细胞Flk和BAK表达水平,MTT法检测树突状细胞增殖活性。结果成功构建了含Flk1和靶向抗凋亡基因BAK siRNA的重组质粒载体pFlk1-U6BAK。经携带pFlk1-U6BAK的重组减毒鼠伤寒沙门菌感染后,树突状细胞在稳定表达Flk的同时,BAK表达水平显著降低;而经携带pFlk1-U6BAK的重组减毒鼠伤寒沙门菌感染后,树突状细胞增殖活性明显升高。结论携带pFlk1-U6BAK的重组减毒鼠伤寒沙门菌可以在稳定表达Flk的同时,通过下调凋亡基因BAK表达水平而抑制树突状细胞凋亡,有望成为较为有效的抗肿瘤血管生成疫苗。
- 冯珂珂戴科芳
- 关键词：细胞凋亡
- 腺相关病毒介导重组血管抑素联合雷公藤红素对大鼠颅内C6胶质瘤的抗血管生成作用被引量：4
- 2011年
- 目的:腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的重组血管抑素(angiostatin,AS)联合应用雷公藤红素(celastrol)治疗大鼠颅内C6胶质瘤,观察其对肿瘤体积、新生血管密度及肿瘤细胞凋亡的影响,探讨抗血管生成重组基因联合雷公藤红素对胶质瘤治疗的前景。方法:建立颅内原位荷C6脑胶质瘤大鼠模型,7d后随机分为4组,分别给予0.9%氯化钠溶液(作为对照)、AAV-AS、雷公藤红素及两者联合用药。每隔7d行头部强化MRI检查,计算肿瘤体积。于22d后处死动物,检测AS蛋白表达、血管密度及肿瘤细胞凋亡情况。结果:联合治疗组及AAV-AS治疗组均检测到AS蛋白表达,证实基因转导成功。联合治疗组第22天时肿瘤体积、血管密度和凋亡指数均与对照组、雷公藤红素组及AAV-AS治疗组相比差异有统计学意义(P<0.05),联合治疗可以抑制肿瘤生长,降低新生血管密度,促进肿瘤细胞凋亡。结论:基因治疗联合雷公藤红素可通过抑制胶质瘤血管生成而抑制肿瘤生长;两者联合应用具有协同作用,可弥补两者单独应用的不足之处。
- 王冠周洁冯珂珂田麒
- 关键词：血管抑制素类雷公藤红素
