河南省医学科技攻关计划项目(200803034)
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 相关作者:胡萍栗夏莲欧阳军周菲陈存仁更多>>
- 相关机构:海南省人民医院郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- pSS-CAD-Proins载体的构建与细胞水平功能鉴定被引量:1
- 2011年
- 目的构建可随ATP浓度变化而在内质网与葡萄糖反应蛋白78(GRP78)可逆性结合与解聚的人胰岛素原基因表达载体,并研究其在HepG2细胞中的表达及葡萄糖对其分泌的影响。方法人工合成含胰岛素信号肽(SS)及条件结合/解聚区域(CAD)的多聚核苷酸链,将其与人胰岛素原基因相连,构建SS-CAD-人胰岛素原表达载体(pSS-CAD-Proins),将其经脂质体转染HepG2细胞,于不同浓度葡萄糖的培养液中培养,检测培养液中的胰岛素浓度并提取细胞总RNA。结果成功构建pSS-CADProins表达质粒。转染HepG2细胞后48 h,在葡萄糖浓度分别为5、15及25 mmol/L的培养基中,胰岛素分泌量分别为(4.73±0.52)、(8.84±0.43)及(14.15±0.32)mU/L,不同葡萄糖浓度诱导的胰岛素mRNA表达量明显不同。结论 pSS-CAD-Proins载体能够在HepG2细胞中成功表达,并且胰岛素的分泌及转录受葡萄糖的调控。
- 陈存仁刘艳霞胡萍欧阳军周菲栗夏莲
- 关键词:内质网