安徽省自然科学基金(11040606M182)
- 作品数：6 被引量：17H指数：2
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- ERK-MAPK信号转导通路在胃泌素促进人结直肠癌细胞增殖中的作用及其机制被引量：11
- 2013年
- 目的探讨细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）一丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）信号转导通路在胃泌素促进人结直肠癌细胞株HT-29增殖与凋亡中的作用及其机制。方法体外培养结直肠癌HT-29细胞株，将细胞分为对照组、胃泌素组、丙谷胺组和胃泌素＋丙谷胺组，胃泌素组设6．25、12．50、25．00、50．00、100．00mg／L5个浓度梯度，丙谷胺组设8．00、16．00、32．00、64．00、128．00mg／L5个浓度梯度，并设胃泌素（25．00mg／L）＋丙谷胺组（8．00、16．00、32．00、64．00、128．00mg／L）浓度梯度。对照组不加药，其余各组加不同浓度的药物处理。运用MTT法观察细胞增殖活力改变情况，确立5-肽胃泌素和丙谷胺处理HT-29细胞的最佳浓度；流式细胞仪检测各组细胞增殖指数及凋亡率的变化；RT-PCR检测结直肠癌HT-29细胞株胃泌素／胆囊收缩素B受体（CCK-BR）mRNA表达情况以及各组细胞ERKl／2、K-rasmRNA表达水平的变化；Westernblot检测ERKI／2和K-ras蛋白表达及其磷酸化水平。采用方差分析和SNK-q检验进行统计学分析。结果胃泌素浓度在6．25～100．00mg／L能促进结直肠癌HT-29细胞的增殖，且当浓度达25．00mg／L时为最佳浓度（F：31．36，P〈0．05）；单独丙谷胺对结直肠癌HT-29细胞增殖无明显影响，但丙谷胺浓度在8．00～128．00mg／L能明显拮抗胃泌素促进HT-29细胞的增殖作用，其最佳浓度为32．00mg／L（F=24．3l，P〈0．05）。胃泌素（25．00mg／L）组细胞增殖指数为37．5％±5．2％，显著高于对照组的27．7％±5．0％和胃泌素（25．00mg／L）＋丙谷胺（32．00m∥L）组的27．3％±5．8％（q=4．56，4．75，P〈0．05）；胃泌素（25．00mg／L）组细胞凋亡率为1．9％±0．4％，低于对照组的2．5％±0．4％和胃泌素（25．00mg／L）＋丙谷胺（32．00mg／L）组的2．4％±0．3％（q=4．23，4．06，P〈0．05）。HT-29�
- 茆家定钱海鑫吴佩黄剑雄武健
- 关键词：胃泌素丙谷胺细胞外信号调节蛋白激酶K-RAS
- 胃泌素高表达型大肠癌差异表达基因研究被引量：1
- 2012年
- 目的运用基因芯片技术分析胃泌素（GAS）高表达与无GAS表达大肠癌组织的差异表达基因，以筛选GAS依赖型大肠癌相关及候选基因。方法运用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测43例大肠癌手术标本癌组织中GAS的含量，选择GAS高表达（实验组）与无GAS表达（对照组）的癌组织进行基因i占片分析，通过实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）技术验证芯片分析出的在信号传导通路中起关键作用的10个差异基因。结果两类癌组织发生显著表达变化的基因有1182个，与对照组比较，在实验组中上调表达的基因有738个，下调表达的基因有444个，其中包括与细胞生长及增殖调控相关的基因、与癌细胞转移相关的基因以及与细胞骨架结构相关的基因，且主要集中于Wnt等多条信号传导通路中。选择10个在通路中起关键作用的基因进行Real-timePCR验证，验证的数据与芯片中的数据一致。结论cDNA微阵列法可以用于筛选与GAS有关的大肠癌的相关基因，获得的差异表达基因具有强烈的代表性。
- 徐洪海吴佩茆家定吕坤卢林明
- 关键词：大肠癌胃泌素基因
- 神经酰胺信号转导通路在胃泌素抑制大肠癌细胞凋亡中的作用及机制被引量：2
- 2013年
- 目的 探讨神经酰胺信号转导通路在胃泌素抑制大肠癌细胞凋亡中的作用及其机制.方法 胃泌素、丙谷胺各设5个浓度梯度,分别为6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 mg/L和8.00、16.00、32.00、64.00、128.00 mg/L.运用噻唑蓝（MTT）法观察细胞增殖活力改变,确立5-肽胃泌素和丙谷胺处理HT-29细胞的最佳浓度；流式细胞仪逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot法分别检测各组细胞凋亡率、神经酰胺、p38磷酸化水平、B淋巴细胞/白血病-2（bcl-2）、bcl-2相关X蛋白（bax） mRNA及其蛋白表达变化.结果 胃泌素能促进大肠癌HT-29细胞的增殖,并抑制凋亡,其最佳浓度为25.00 mg/L（F =31.36,P＜0.05）；丙谷胺能明显拮抗胃泌素促进HT-29细胞的增殖作用,其最佳浓度为32.00 mg/L（F =24.31,P＜0.05）.胃泌素组细胞凋亡率明显低于对照组和胃泌素＋丙谷胺组（q =4.23、4.06,P＜0.05）.胃泌素组bax mRNA、蛋白相对表达率以及神经酰胺、p38磷酸化水平明显低于对照组、丙谷胺组及胃泌素＋丙谷胺组（q=5.50、6.00、7.50;6.50、7.00、8.50;8.00、8.50、10.00;4.60、4.90、6.53,P＜0.05）,而bcl-2 mRNA、蛋白相对表达率与其相反（q =4.95、4.24、7.07;7.07、6.36、7.78,P＜0.05）.结论 胃泌素能够通过神经酰胺信号转导通路抑制大肠癌HT-29细胞凋亡,其可能是通过抑制p38活性、上调bcl-2及下调bax表达来实现的,但此信号传导通路能够被胃泌素受体拮抗剂丙谷胺阻断.
- 茆家定钱海鑫吴佩于昌盛武健
- 关键词：大肠癌胃泌素神经酰胺P38B淋巴细胞白血病-2
- 神经酰胺代谢及其在结肠癌治疗中作用的研究
- 2011年
- 神经鞘脂类属于生物膜脂类中的一个家族,包括鞘磷脂（sphingomyelin,SM）、脑磷脂及神经节苷酯。而SM途径是生物体普遍存在的信号系统。神经酰胺是SM的中间产物,在多种生物学活动中起着重要的作用,包括调节细胞生长、活性、分化、凋亡以及应激反应等[1]。神经酰胺作为细胞凋亡的第二信使，可通过多种信号通路诱导肿瘤细胞凋亡，神经酰胺生成缺陷和鞘脂代谢缺陷均可影响肿瘤的治疗，增强肿瘤的耐药性，
- 刘潇吴佩
- 关键词：神经酰胺细胞凋亡结肠癌代谢酶
- JNK和P38MAPK信号通路与大肠癌关系的研究进展被引量：4
- 2011年
- 大肠癌是我国常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率有逐年上升的趋势。丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是近年来信号转导方面最活跃的研究领域,研究表明,它们与大肠癌细胞的发生、侵袭和转移等有着重要关系。通过对大肠癌细胞凋亡的信号通路进行研究将为大肠癌的治疗提供新的靶点。
- 储诚森吴佩
- 关键词：JNKP38信号转导大肠癌结肠癌
- 胃泌素和微小RNA与大肠癌的发生发展
- 2012年
- 已证实某些大肠癌中胃泌素能高表达并通过其受体介导的信号转导通路促进细胞增殖且抑制凋亡。微小RNA（miRNA）参与大肠癌相关基因表达调控，研究表明miRNA在大肠癌中的调控网络与胃泌素促大肠癌增殖信号通路存在多个交叉点，提示在胃泌素促大肠癌细胞增殖过程中可能存在一类新的胃泌素-miRNA信号通路，有望为大肠癌的诊断和分子靶向治疗寻找到一个新的切人途径。
- 程腾吴佩茆家定
- 关键词：胃泌素类微RNAS结直肠肿瘤
