安徽省自然科学基金(11040606M198)
- 作品数：6 被引量：4H指数：1
- 相关作者：赵武丁周志吴勇徐家丽宋伟更多>>
- 相关机构：蚌埠医学院第二附属医院蚌埠医学院第一附属医院蚌埠医学院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 野生型及c.454C>T突变型人血管内皮生长因子A基因重组真核表达载体的体外表达
- 2015年
- 目的:探讨野生型和c.454C>T突变型人血管内皮生长因子A(VEGFA)基因重组真核表达载体(p EGFP-VEGFA)体外表达有无差异。方法:用脂质体法将野生型和突变型p EGFP-VEGFA转染人胚胎肾细胞(HEK293T),采用荧光显微镜观察重组载体VEGFA和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白的表达,以实时荧光定量PCR法检测VEGFA mRNA的表达。结果:在经转染的HEK293T细胞内观察到绿色荧光,转染后48 h突变型p EGFP-VEGFA转染组荧光强度低于野生型p EGFPVEGFA转染组。突变型p EGFP-VEGFA转染组VEGFA mRNA表达明显低于野生型p EGFP-VEGFA转染组(P<0.01)。结论:在HEK293T细胞中,初步表明VEGFA突变体导致VEGFA mRNA和蛋白的表达水平均下调,为进一步研究VEGFA c.454C>T突变体在先天性左心室流出道病变发生中的作用奠定了基础。
- 吴勇刘学刚赵武徐家丽郭嘉诚李慧敏丁周志王亚明宋伟
- 关键词：血管内皮生长因子A突变实时荧光定量聚合酶链反应
- 以问题为基础的教学法在儿科心血管系统疾病理论课教学中的应用评价被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨以问题为基础的教学法(problem-based learning,PBL)在儿科心血管系统疾病理论课教学中的应用效果。方法:以掷硬币法将2008级药学本科生定为PBL组(n=107),2008级预防医学本科生定为以讲授为基础的教学(lecture-basedlearning,LBL)组(n=104)。对2组学生分别采用PBL和LBL教学法学习儿科心血管系统疾病,采用问卷调查形式比较2组学生对PBL和LBL教学法的态度,并比较2组学生的理论考试成绩。结果:PBL组学生对PBL教学法持赞成态度的百分率为88.8%,高于LBL组学生对LBL教学法持赞成态度的59.6%(P<0.01),且PBL组理论考试成绩显著高于LBL组(P<0.01)。结论:PBL教学法效果优于LBL教学法,可用于儿科心血管系统疾病的理论课教学。
- 赵武丁周志
- 关键词：儿科学
- 野生型及突变型人血管内皮生长因子A真核表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:构建人野生型和c.454C>T突变型血管内皮生长因子A(VEGFA)真核表达载体。方法:采用反转录聚合酶链反应扩增人VEGFA基因,用限制性核酸内切酶BglⅡ和SalⅠ双酶切后连接真核表达载体pEGFP-N1,构建野生型VEGFA真核表达载体(野生型pEGFP-VEGFA),通过双酶切和测序进行鉴定。采用定点诱变PCR技术构建c.454C>T突变型人VEGFA真核表达载体(突变型pEGFP-VEGFA),同样通过双酶切和测序进行鉴定。结果:野生型和突变型pEGFP-VEGFA被双酶切为4 697 bp和1 251 bp两条条带。测序结果证实野生型pEGFP-VEGFA VEGFA序列与GenBank公布的VEGFA mRNA序列完全一致,突变型pEGFP-VEGFA除第454位碱基C被T替代以外,其余序列与野生型完全一致。结论:成功构建了野生型和突变型pEGFP-VEGFA,为下一步研究VEGFA基因功能提供参考。
- 吴勇刘学刚郭嘉诚李慧敏宋伟丁周志王亚明赵武徐家丽
- 关键词：分子遗传学血管内皮生长因子A重叠延伸PCR定点突变
- 妊娠合并心力衰竭对胎儿和新生儿的不良影响
- 2021年
- 心力衰竭为心功能不全失代偿期。妊娠、分娩或产后早期,尽管心脏充盈压由于心功能不全而升高或保持正常,但仍存在心排血量低的情况[1]。随着越来越多的结构性心脏病女性得以早期诊断并手术矫正而生存至生育年龄,妊娠合并心脏病在世界范围内备受关注[2]。美国资料表明,2003年至2012年这期间,心脏病孕妇增加了24.7%,与先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)、心肌病和肺动脉高压妇女选择性妊娠有关[3]。
- 赵武
- 关键词：妊娠合并心脏病手术矫正心排血量产后早期失代偿期
- 先天性左室流出道梗阻遗传学研究进展及其临床意义
- 2012年
- 左室流出道梗阻(LVOTO)是一类常见的先天性心脏病,包括从解剖左心室流出道一直延伸到降主动脉弓的一组狭窄性病变。研究表明,非综合征LVOTO以寡基因遗传的可能性最大。对LVOTO相关致病基因和候选基因的深入研究使得人们有望对LVOTO实施产前基因诊断、疾病筛查乃至早期干预和基因治疗。
- 吴勇赵武徐家丽
- 关键词：左室流出道梗阻遗传学基因突变
- VEGFA基因重组真核表达载体的构建与表达被引量：1
- 2013年
- 目的构建VEGFA基因重组真核表达载体pEGFP-VEGFA,并检测其在人胚胎肾细胞(HEK293T)中的表达。方法以人脐血单核细胞的RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增VEGFA基因,并将其定向插入真核表达载体pEGFP-Nl中,构建重组真核表达载体pEGFP-VEGFA。经限制性核酸内切酶BglII和SalI酶切和DNA测序鉴定后,用脂质体法将pEGFP-VEGFA转染HEK293T细胞,转染后24 h和48 h采用荧光显微镜观察pEGFP-VEGFA的表达。结果 pEGFP-VEGFA被双酶切为4 697 bp和1 251 bp两条条带,测序结果证实VEGFA序列与GenBank公布的VEGFA mRNA序列完全一致。在经转染的HEK293T细胞内观察到较强的绿色荧光,表明pEGFP-VEGFA成功转染HEK293T细胞,并在其中得到了表达。结论成功构建重组真核表达载体pEGFP-VEGFA,为进一步研究VEGFA基因的生物学功能奠定了基础。
- 吴勇刘学刚郭嘉诚李慧敏丁周志王亚明宋伟徐家丽赵武
- 关键词：血管内皮生长因子A基因
