河南省医学科技攻关计划项目(200803048)
- 作品数：5 被引量：23H指数：3
- 相关作者：郑富霞苗丽君高增艳李冰张瑞霞更多>>
- 相关机构：河南省中医院郑州大学第一附属医院郑州大学更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目河南省卫生科技创新型人才工程更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白重组RNAi慢病毒载体的构建
- 2014年
- 目的构建哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)重组RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体。方法按照RNAi设计规则,针对mTOR基因设计4个干扰靶点和阴性对照序列(FAM),先用人工合成寡核甘酸片段,通过PCR拼接的方法,即可获得小干扰RNA(siRNA)有效片段,采用Lipofectamine 2000转染试剂,对肺腺癌A549细胞进行转染,1d后,通过高倍荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白在肺腺癌A549细胞中的表达情况。采用半定量RT-PCR方法,检测mTOR基因在1d后mRNA水平的表达,采用Western blot检测2d后蛋白表达水平,从而筛选出最高效的干扰靶序列,将其合成双链DNA,通过pGCL-GFP载体,与pHelper 1.0和pHelper 2.0质粒共同组成载体系统,进一步转染293T细胞,最终包装后产生慢病毒,通过Western blot方法检测GFP蛋白表达水平来检测293T细胞中的病毒滴度,并进行活性鉴定。结果 mTOR基因的高效siRNA干扰靶点被成功筛选出;mTOR siRNA感染体外培养的人肺腺癌A549细胞后,不管是从mRNA水平,还是蛋白水平,该基因都明显沉默;该基因mTOR siRNA的慢病毒载体被成功构建,同时收获病毒上清,并检测出病毒滴度为1×108 UT/mL。结论 mTOR siRNA感染体外培养的人肺腺癌A549细胞,能够导致mTOR基因明显沉默;该基因mTOR siRNA的慢病毒载体被成功构建。
- 郑富霞苗丽君朱涵张善丰
- 关键词：肺肿瘤雷帕霉素靶蛋白RNA干扰慢病毒
- 机械通气、液体治疗策略对老年急性呼吸窘迫综合征患者预后的影响被引量：10
- 2015年
- 目的探讨机械通气(MV)和不同液体限制两种治疗策略对老年急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者预后的影响。方法 ARDS患者115例,男77例,女38例,依据有无MV分成MV组和非MV两组。依据有无液体限制性策略分为液体控制组和非液体控制组。比较预后(包括28 d生存率、医疗费用、ICU的滞留时间、MV时间以及平均住院时间等)。结果 MV组ICU滞留时间(t=3.089,P<0.01)、住院费用(t=4.146,P<0.01)均显著高于非MV组,而生存率低于非MV组(χ2=4.391,P=0.036);液体控制组MV时间(t=3.761,P<0.01)、住院费用(t=3.160,P<0.01)均显著低于非液体控制组,而生存率则高于非液体控制组(χ2=5.803,P=0.016)。结论 MV与否、不同的液体治疗策略对老年ARDS患者的预后有显著影响。
- 郑富霞
- 外周血T-SPOT.TB预测结核性胸膜炎患者病情稳定快慢的价值被引量：7
- 2013年
- 目的通过分析结核性胸膜炎患者外周血结核感染T细胞斑点实验(T-SPOT.TB)与胸腔积液消失时间的相关性,探讨T-SPOT.TB在预测结核性胸膜炎患者病情稳定快慢中的价值。方法选择住院治疗并确诊为结核性胸膜炎的患者99例,采用酶联免疫斑点技术检测外周血中经6 kD早期分泌靶抗原和10 kD培养滤过蛋白刺激后释放相应γ干扰素的特异性T细胞,分别记为T-SPOT.TB评分的A值、B值。所有患者均在正规抗结核基础上行胸腔穿刺术及胸腔闭式引流术,记录胸腔积液消失所需要的时间。分析T-SPOT.TB评分与胸腔积液消失时间的相关关系。结果 99例患者中T-SPOT.TB阳性者89例,外周血T-SPOT.TB诊断结核性胸膜炎的敏感性为89.9%。T-SPOT.TB评分中A值均值为(61.3±5.2)/106PBMCs,B值均值为(74.8±3.5)/106PBMCs,A+B值均值为(136.1±3.2)/106PBMCs,胸腔积液消失时间均值为(11.7±4.2)d。A值、B值、A+B值与胸腔积液消失时间均呈正相关(r A=0.72,P A<0.001;r B=0.71,P B<0.001;r A+B=0.89,P A+B<0.001)。结论外周血T-SPOT.TB在结核性胸膜炎的诊断中具有重要价值,其评分越高,结核性胸膜炎患者胸腔积液消失时间越长,T-SPOT.TB可以作为预测及评估结核性胸膜炎患者病情稳定快慢的一个重要指标。
- 高增艳苗丽君张瑞霞李冰
- 关键词：结核性胸膜炎病情
- 头孢哌酮/舒巴坦联合左氧氟沙星治疗嗜麦芽寡养单胞菌肺炎的临床观察被引量：1
- 2012年
- 目的探讨头孢哌酮/舒巴坦联合左氧氟沙星治疗嗜麦芽寡养单胞菌肺炎的临床疗效。方法对2009年3月-2011年10月使用头孢哌酮/舒巴坦联合左氧氟沙星治疗嗜麦芽寡养单胞菌肺炎的29例患者进行回顾性总结分析,对其临床疗效、细菌清除率、不良反应发生率进行观察。结果 29例患者经治疗后,临床总有效率68.97%,细菌清除率65.52%,不良反应发生率及死亡率均为10.34%。结论头孢哌酮/舒巴坦联合左氧氟沙星治疗嗜麦芽寡养单胞菌肺炎效果好、细菌清除率高、安全性高,可作为嗜麦芽寡养单胞菌肺炎的经验性治疗。
- 苗丽君高增艳王静刘红张辉刘莹吴秋歌郑富霞
- 关键词：嗜麦芽寡养单胞菌肺炎左氧氟沙星
- 高乌甲素对人非小细胞肺癌A549细胞株的作用及机制被引量：5
- 2015年
- 目的观察高乌甲素(LA)对人非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞株的作用并探讨其可能存在的分子机制。方法采用由中山大学医学院实验动物中心细胞库提供的人NSCLC细胞株A549株。通过给予不同浓度的LA进行干预和MTT比色分析法、实时荧光定量PCR以及流式细胞仪等检测方法,探讨不同浓度的LA对NSCLCA549细胞株的生长抑制、凋亡率、细胞周期和Cyclin E1表达的影响。结果 LA对细胞的抑制作用规律呈剂量依赖性,相较于对照组,浓度在0.48~7.68 mg/ml的LA对于细胞的抑制作用均有着统计学差异(P<0.05);在相应的各时间点,浓度为0.48和0.96 mg/ml的LA组A549细胞凋亡率均有着统计学的差异(P<0.05);浓度为0.96 mg/ml的LA组细胞周期G0/G1期比例显著上升,而S期比例下降(P<0.05);浓度为0.48和0.96 mg/ml的LA组A549细胞的Cyclin E1 m RNA相对表达量均明显低于对照组(P<0.05)。结论 LA具有抗肿瘤的疗效,其分子机制可能与肿瘤细胞的生长、凋亡、细胞周期以及Cyclin E1表达有关。
- 郑富霞
- 关键词：高乌甲素非小细胞肺癌
