国家教育部博士点基金(20050307023)
- 作品数：3 被引量：36H指数：3
- 相关作者：陈溥言周斌曹瑞兵王秀青张素芳更多>>
- 相关机构：南京农业大学中国科学院新乡医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金江苏省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 抗菌肽天蚕素B基因及其串联体在毕赤酵母中的表达被引量：21
- 2007年
- 通过重叠区扩增基因拼接法(SOE)合成抗菌肽天蚕素B基因,并在其N端引入Kex2酶切位点。亚克隆天蚕素B并将3个亚克隆串联在一起,每个单体前都加上Kex2酶切位点,将天蚕素B以及串联体克隆至表达载体pPICZαA上,用SacⅠ酶切使之线性化,采用电击法转化毕赤酵母SMD1168,转化子用小瓶发酵。经Tricine-SDS-PAGE检测,在α信号因子的引导下,表达产物可以分泌到培养基中,且具有明显抑菌活性。
- 王秀青张素芳曹瑞兵周斌陈溥言
- 关键词：天蚕素B抗菌肽毕赤酵母
- 复合抗菌肽PL在毕赤酵母中的分泌表达及其活性研究被引量：12
- 2007年
- 为了获得抗菌活性较强的抗菌肽,将几种抗菌肽串联起来在毕赤酵母中表达,并比较其与单独抗菌肽的抑菌活性。以GenBank中的Protegrin-1(PG-1)、ScorpionDefensin(SD)、Metalnikowin-2A和SheepMyeloidAntibacterialPeptide(SMAP-29)(序列号分别为AAB27599,AAAB27538、P80409和P49928)成熟肽段作为模板序列,根据巴斯德毕赤氏酵母(P.pastoris)偏好密码子,设计并人工合成复合抗菌肽pl基因,同时用SOE法获得ScorpionDefensin的基因,分别克隆到pPICZαA载体中,转化P.pastoris受体菌X-33,在醇氧化酶(AOX)启动子调控下,复合抗菌肽PL及SD均获得表达。体外抑菌试验检测复合抗菌肽PL与单独的蝎子防御素SD的热稳定性、酸稳定性、最低抑菌浓度等,结果显示复合抗菌肽PL及SD具有很强的热酸稳定性,而针对不同的细菌,复合抗菌肽则表现出了强于单独的SD的活性,特别是对大肠杆菌。上述结果说明了该复合抗菌肽具有很好的开发前景。
- 牛明福李翔曹瑞兵周斌陈德胜陈溥言
- 关键词：分泌表达抑菌活性
