国家自然科学基金(30440039)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：华东师范大学更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金国家自然科学基金上海市教育发展基金会“曙光计划”项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 肝癌特异性黏附肽的鉴定和分析被引量：2
- 2006年
- 利用体内噬菌体随机肽库技术筛选出肝癌特异性噬菌体肽A54,随后用化学合成法在体外合成该多肽,并标记荧光素和生物素,在组织和细胞水平对该肽进行了体内外肝癌特异性的鉴定及其抗原定位。将生物素(Biotin)标记的A54肽通过尾缘静脉注射入荷瘤裸鼠体内,通过免疫组化方法,检测A54肽与肝癌组织特异性结合的情况;并用免疫荧光细胞化学技术,对荧光素(FAM)标记A54肽进行了细胞水平的肝肿瘤特异性鉴定及抗原定位。体内外检测结果表明,A54肽仍保留了特异性识别肝癌组织的特性,且结合于肝癌细胞的膜表面。实验证明,化学合成的多肽,在体内仍然具有靶向肝癌细胞膜表面的作用,这进一步证明了筛选出来的目标噬菌体克隆其特异性靶向作用确实是由其表面插入的小分子多肽所介导的,为肝癌特异性导向药物载体的研究提供了科学依据。
- 吴淼杜冰汪磊周忠良钱旻于静
- 关键词：免疫组化抗原定位
- 肝癌细胞特异性内在化肽的筛选和初步鉴定被引量：6
- 2007年
- 应用噬菌体肽库技术筛选与肝癌细胞特异性结合并可以内在化的短肽,为肝癌的导向治疗奠定基础。以肝癌细胞株BEL-7404作为筛选靶细胞,对噬菌体展示随机12-肽库进行亲和淘选。经过3轮淘选后,共随机挑选出20个噬菌斑进行扩增和测序,同时用细胞ELISA检测其与肝癌细胞的结合情况,并通过免疫荧光术、流式细胞术等方法进一步鉴定噬菌体克隆对肝癌细胞的导向性及内在化的效果。结果表明3轮淘选所得的噬菌体回收率逐步提高,显示淘选过程对随机肽库有一定的富集效果。从扩增的噬菌体克隆中选择结合力最强的LJ08通过免疫荧光术、流式细胞术鉴定,结果显示LJ08与肝癌细胞呈特异性结合并内在化进入肝癌细胞。结论认为,通过对噬菌体随机肽库的筛选,得到可以与肝癌细胞BEL-7404结合并可以内在化的噬菌体肽,为该肽作为肝癌导向治疗的药物载体奠定基础。
- 李晶汪磊韩红辉杜冰钱旻
- 关键词：噬菌体肽库肝癌
- 人肝癌细胞移植瘤cDNA表达文库的构建及鉴定被引量：1
- 2007年
- 汪磊杜冰吴淼周忠良钱旻
- 关键词：CDNA表达文库细胞移植血清蛋白甲胎蛋白
