国家自然科学基金(30271588)
- 作品数：12 被引量：216H指数：9
- 相关作者：郭美丽张戈张汉明苏中武张军东更多>>
- 相关机构：第二军医大学上海交通大学新疆农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家中医药管理局课题上海市科学技术委员会基础研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 红花种质的随机扩增多态性DNA分子鉴定被引量：24
- 2003年
- 目的:从分子水平探讨红花(Carthamus tinctorius L.)的种内变异,为红花种质的分子鉴定提供依据。方法:用随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)技术和统计学分析方法,对从我国新疆、甘肃、宁夏、河南、山东、山西、河北、安徽、浙江等9省采集的红花22个品种的遗传多样性进行分析。结果:根据RAPD特征图谱,通过在DNA分子水平上的聚类分析,将红花22个品种分为7个类型。RAPD聚类分析表明了品种间的亲缘关系:北方,特别是新疆地区的品种亲缘关系较近,PCR结果极为相似,而南方品种间遗传差异性较大。结论:红花种内存在一定的遗传变异,本研究结果为红花品种鉴定及亲缘关系的探讨提供一定依据。
- 郭美丽姜伟张志珍张戈毛积芳殷明苏中武
- 关键词：随机扩增多态性DNA分子鉴定
- 中国红花遗传多样性的AFLP分子标记(英文)被引量：50
- 2006年
- 目的考察红花的种内变异，为进一步进行红花种质资源选育和筛选品质相关基因奠定基础。方法采用扩增片段长度多态性（AFLP）技术，研究中国红花28个不同栽培居群在DNA水平的多态性。采用UPGMA构建系统树图进行聚类分析和计算遗传距离。结果筛选得到的12对引物的扩增片段具有丰富的多态性。各居群间的遗传相似系数在0．48-0．96。聚类分析显示它们分为3大主要类群和一个中间类群。结论红花种内存在一定的遗传多样性。基于AFLP条带统计的聚类结果和表型特征并不完全一致，可能是基因型和环境共同作用于表型的结果。
- 张磊黄蓓蓓开国银郭美丽
- 关键词：扩增片段长度多态性
- 红花化学成分研究(Ⅱ)被引量：56
- 2005年
- 目的:研究红花的化学成分。方法:采用溶剂法和柱层析法分离纯化红花中的化学成分,并通过理化性质和光谱数据鉴定所得化合物的分子结构。结果:从红花乙醇提取物中共分得7个单体化合物,经鉴定分别为芹黄素(Ⅰ)、6-羟基山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ)、香豆酸(Ⅲ)、对羟基苯甲酰香豆酸酐(Ⅳ)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)、cartormin(Ⅵ)和羟基黄色素A(Ⅶ)。结论:化合物Ⅳ为红花中首次分离得到。
- 张戈郭美丽李颖张汉明
- 关键词：红花单体化合物山奈酚山柰酚D-葡萄糖酸酐
- 与红花苞叶刺性状紧密连锁的SRAP分子标记研究被引量：25
- 2007年
- 利用相关序列扩增多态性(SRAP)技术研究与红花苞叶刺性状紧密连锁的基因,为研究与红花重要性状相关的遗传基础及红花的分子标记辅助育种提供实验依据。采用分离体分组混合分析法(BSA),以杂交F2代红花个体苞叶刺多而长以及苞叶无刺的极端性状为依据,分别构建有刺与无刺两个近等基因池。利用SRAP标记技术,在两亲本及基因池间筛选45对引物,通过单株验证,获得与红花苞叶刺性状连锁的1个SRAP标记(M3E3)。从聚丙烯酰胺凝胶上回收和克隆SRAP片段(M3E3),并测序。该标记在苞叶有刺的20个单株中,有16株扩增出该特异性条带,4株未扩增出该条带。苞叶无刺的15个单株均无该条带。经计算,该标记和有刺红花基因之间的交换值为11.4%,说明两者之间紧密连锁。该片段的精确长度为349bp,其碱基组成为A+T=41.08%。与红花苞叶刺性状紧密连锁的SRAP标记M3E3可作为无刺红花品种选育的辅助分子标记。
- 郭庆华郭美丽
- 关键词：红花SRAP苞叶
- 红花药材及注射液中羟基黄色素A的含量测定被引量：14
- 2005年
- 李颖张戈郭美丽章伟仲向平
- 关键词：黄色素羟基红花药材注射液ADP诱导冠脉扩张
- 红花药材黄色素A含量的RP-HPLC测定及其资源的质量评价被引量：13
- 2006年
- 目的：为红花药材质量评价体系的建立、红花优良品种的筛选提供依据。方法：选择有代表性的红花品种22个，在不同生态地区和不同年份进行栽培试验，并采用RP-HPLE测定各品种中主要活性成分黄色素A含量，建立药材质量评价标准，比较品种间差异，考察其遗传稳定性。结果：红花不同品种黄色素A的含量在0．70％-1．85％，品种间存在非常显著差异（P〈0．01），其中，鱼台红花、合肥红花、芮城红花含量居前3位。结论：红花药材中的主要活性成分黄色素A为质量评价的重要指标，鱼台红花、合肥红花、芮城红花为红花优良种质资源。
- 郭美丽张戈章伟张汉明苏中武
- 关键词：红花RP-HPLC
- 红花SRAP扩增体系的建立和优化被引量：33
- 2006年
- 目的:探讨影响红花SRAP扩增的各种因素,建立能够稳定扩增红花基因组的体系,为研究红花重要性状的遗传基础及建立分子辅助标记育种的技术平台奠定基础。方法:用CTAB法提取红花DNA,设计Taq酶浓度(0.02、0.040、.06 U/μl)、dNTP浓度(0.15、0.25、0.30 mmol/L)、Primer浓度(0.15、0.30、0.45μmol/L)3因素3水平27次实验和Mg2+浓度(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 mmol/L)8水平单因素实验。在25μl体系中加入模板DNA 20 ng。对体系进行优化,用琼脂糖进行检测。结果:本研究建立了适合红花的SRAP体系,Taq酶浓度为0.02 U/μl,dNTP浓度为0.25 mmol/L,Primer浓度为0.30μmol/L,Mg2+的浓度为3.0 mmol/L,优化后的体系目标条带增多,重现性好,得到了较好的扩增效果。结论:本研究建立的反应体系适合红花SRAP的研究。
- 彭飒郭美丽陈跃华郭庆华
- 关键词：红花相关序列扩增多态性核酸扩增技术
- 红花RAPD和AFLP分子标记技术多态性效率比较被引量：10
- 2007年
- 目的探讨RAPD和AFLP这两种分子标记技术应用于红花不同品系多态性效率的比较。方法以河南无刺大红袍和若羌有刺白两个红花品系为材料，应用100条RAPD引物、64对AFLP引物，对两品系进行多态性筛选，初步确定反映品系间差异的引物。结果筛选到RAPD特异性引物共5条，分别为AA52726、AA52729、AA52739、AA52766、AA52785，在两品系间扩增到稳定的差异片段；筛选到AFLP特异性引物共7对，分别为AF26356、AF26372、AF26385、AF26311、AF26396、AF26327、AF26343，在两品系间扩增到稳定的差异片段。结果表明，平均每条RAPD引物可以扩增出红花基因组片段数目4～10条，多态性选出率为O．20％；平均每对AFLP引物可以扩增出红花基因组片段数目为50～80条，多态性选出率为O．31％。就每条（对）引物平均可以扩增出多态性条带的数目而言，RAPD引物为1～2条，AFLP引物组合则4～5条，AFLP的检测效率明显高于RAPD。结论在红花的分子标记研究中，AFLP较RAPD为更有效的分子标记。
- 张阵阵郭美丽张军东张汉明
- 关键词：红花RAPDAFLP分子标记
- 红花随机扩增多态性DNA反应体系的建立与优化被引量：2
- 2006年
- 目的:考察不同因素对红花随机扩增多态性DNA反应体系的影响,建立并优化反应体系。方法:提取红花基因组DNA,分别设计Taq酶浓度(三水平:0.02、0.04、0.06 U/μL)、dNTP浓度(三水平:0.10、0.20、0.30 mmol/L)和引物(primer)浓度(三水平:0.16、0.32、0.48 pmol/L)的三因素实验,进行PCR扩增。根据PCR产物的琼脂糖凝胶电泳图确定最优的Taq酶浓度、dNTP浓度和引物浓度。进一步设计Mg2+浓度(三水平:1.0、1.5、2.0 mmol/L)和模板浓度(四水平:1.00、1.25、1.50、1.75 mg/L)的两因素实验,进行PCR扩增,确定最佳Mg2+浓度和模板浓度。结果:三因素实验中,第17条组合泳道和两因素实验中第6条组合泳道扩增主带稳定、均匀、清晰,条带数目多。结论:确定红花随机扩增多态性DNA反应25μL反应体系中最佳组合为:Taq酶0.04 U/μL、dNTP 0.30 mmol/L、引物0.32 pmol/L、Mg2+1.5 mmol/L、模板浓度1.00 mg/L。
- 张阵阵郭美丽张军东陆倍倍
- 关键词：红花
- 红花基因组扩增片段长度多态性反应体系的建立和优化被引量：6
- 2006年
- 目的:探讨影响红花扩增片段长度多态性(amp lified fragm ent length polymorph ism,AFLP)的各种因素,建立并优化红花AFLP反应体系,为研究红花品质性状的遗传基础及建立分子辅助标记育种的技术平台奠定基础。方法:CTAB法提取红花基因组DNA,用Beckm an紫外可见分光光度计测定样品DNA浓度与纯度质量(D值);检测后分别进行一步法酶切与连接,或两步法酶切与连接,以检测哪种方法更适合;酶切连接产物设置不同的稀释倍数(5倍、10倍、15倍、20倍、25倍和30倍)进行预扩增,预扩增产物设置不同稀释倍数(10倍、25倍、50倍、75倍、100倍、150倍和200倍)进行选择性扩增;选择性扩增产物95℃变性8 m in后,用6%的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染检测。结果:本研究建立适用于红花的AFLP体系:用乙醇沉淀DNA,建立的模板不含PCR反应抑制剂及其他酶反应抑制剂,可被限制性内切酶M seⅠ和EcoRⅠ完全酶切;确定两步法进行酶切、连接,酶切时间为37℃3 h,连接16℃过夜,缓冲液采用NEB公司Buffer 2;预扩增产物最佳稀释倍数为25倍;选择性扩增最佳稀释倍数为75倍;上述建立的AFLP反应体系,PAGE电泳中主带清晰,没有降解。结论:本研究建立的反应体系适用于红花基因组DNA的AFLP研究。
- 张阵阵郭美丽张军东
- 关键词：红花基因组植物扩增片段长度多态性
