国家教育部博士点基金(20113107110003) 作品数:8 被引量:50 H指数:5 相关作者: 熊旭东 张涛 何淼 沈晓红 杨丽梦 更多>> 相关机构: 上海中医药大学附属曙光医院 上海交通大学附属第六人民医院 上海中医药大学 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 上海市教育委员会重点学科基金 “重大新药创制”科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
炎调方对脓毒症大鼠肺热休克蛋白70和核因子-κB的调控作用 被引量:13 2013年 目的:探讨炎调方对脓毒症大鼠肺热休克蛋白70(HSP70)和核因子-κB(NF-κB)的调控作用。方法:将清洁级健康雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和炎调方组,采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型。用RT-qPCR法、SABC免疫组化方法、凝胶迁移电泳EMSA法测定大鼠肺组织HSP70 mRNA及蛋白表达、NF-κB活性,并用HE染色观察肺组织病理学改变。结果:炎调方组肺组织HSP70基因相对表达水平高于假手术组和模型组(P<0.05),HSP70蛋白表达量高于正常组、假手术组和模型组(P<0.05);正常组、假手术组、炎调方组大鼠肺组织NF-κB/P65相对灰度值均低于模型组(P<0.01);病理切片显示炎调方组肺组织损伤轻于模型组。结论:炎调方能上调肺HSP70表达,降低肺NF-κB活性,改善肺组织病理形态学改变,减轻脓毒症导致的肺组织损伤。 沈晓红 何淼 熊旭东 彭文波 张燕婷关键词:脓毒症 热休克蛋白 核因子-ΚB 炎调方对巨噬细胞中HSP70表达及其效应的影响 被引量:5 2017年 目的:观察炎调方药物血清对离体巨噬细胞中热休克蛋白70(HSP70)及其他相关细胞因子的调控效应,以验证炎调方治疗脓毒症的作用途径和位点。方法:培养大鼠巨噬细胞RAW 264.7,将培养后的巨噬细胞RAW 264.7分为空白对照组(RAW 264.7+培养液)、正常血清组(RAW 264.7+正常大鼠血清)、炎调方药物血清组(RAW 264.7+炎调方药物血清),每组设4个平行孔。采用MTT比色法测定细胞增殖,确定炎调方药物血清的无毒性剂量范围;采用qRT-PCR方法检测细胞HSP70、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β、IL-8的mRNA表达;采用Western blot方法检测细胞HSP70、NF-κB蛋白表达,以ELISA方法检测细胞TNF-α、IL-1β、IL-8蛋白表达。结果:炎调方药物血清的无毒性浓度范围包括10%~30%,故后续实验选取20%浓度的炎调方药物血清进行。正常血清组的各项指标与空白对照组比较,其差异均无统计学意义(P>0.05);与空白对照组和正常血清组比较,炎调方药物血清组RAW 264.7细胞的HSP70 mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.01),NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-8的mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.01)。结论:炎调方治疗脓毒症的作用机制可能是上调HSP70的表达,进而抑制NF-κB的活化和相关细胞因子的表达。 何淼 计高荣 熊旭东 沈晓红 周钱梅关键词:巨噬细胞 热休克蛋白70 核因子-ΚB 通腑泻肺方治疗肺系脓毒症(痰热壅肺证)的临床研究 被引量:14 2014年 目的观察通腑泻肺方治疗肺系脓毒症(痰热壅肺证)的临床疗效。方法将60例患者随机分为对照组和治疗组,对照组在西医常规治疗基础上加用安慰剂,治疗组在西医常规治疗的基础上加用通腑泻肺方免煎颗粒。观察各组患者治疗前后中医证候评分变化,RT-PCR法检测治疗前后外周血单个核细胞中NLRP3、ASC的mRNA表达量,ELISA法检测治疗前后血清中Caspase-1、IL-1β、IL-18水平。结果 (1)治疗后第3日起治疗组的中医证候评分明显低于对照组(P=0.000);治疗组的结局疗效明显优于对照组(P=0.002)。(2)两组治疗后NLRP3 mRNA、ASC mRNA的表达水平均明显低于治疗前(P<0.001);治疗组治疗后的NLRP3mRNA和ASC mRNA表达水平均明显低于对照组(P<0.001)。(3)治疗组治疗后血清Caspase-1水平明显低于对照组(P<0.001);治疗组治疗前Caspase-1、IL-1β、IL-18水平明显高于治疗后(P<0.001,P<0.001,P=0.002);对照组治疗前IL-18水平明显高于治疗后(P=0.01)。结论通腑泻肺方联合西医治疗肺系脓毒症(痰热壅肺证)的疗效优于单纯西医治疗。同时具有下调NLRP3、ASC、Caspase-1的表达水平作用,可能与其作用机制相关。 张涛 熊旭东 李淑芳关键词:脓毒症 肺与大肠相表里 通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤大鼠Keap1-Nrf2/ARE信号通路的影响 被引量:9 2019年 目的观察通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤大鼠核因子E2相关因子(Nrf2)表达的影响,探讨通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤抗氧化应激的作用机制。方法采用CLP制作脓毒症模型,将40只成年雄性SD大鼠随机分为正常组、中药组、模型组及假手术组4组,每组10只。正常组于6 h、12 h后予以0.9%氯化钠注射液灌胃。假手术组开腹后将盲肠取出后再回纳到腹腔,术后6 h、12 h予以0.9%氯化钠注射液灌胃。模型组CLP术后立即予以0.9%氯化钠注射液灌胃,术后6 h、12 h予以0.9%氯化钠注射液灌胃。中药组CLP术后立即予以通腑平喘方灌胃,术后6 h、12 h再次予以通腑平喘方灌胃。以上各组均在24 h后麻醉并行腹主动脉采血致死,取出肺组织。术后观察大鼠一般情况,检测各组血清Nrf2、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量,RT-PCR法检测肺组织中Nrf2 m RNA表达量。结果中药组的血清Nrf2含量及Nrf2 mRNA表达水平高于模型组(P <0.01)。模型组大鼠血清MDA含量与正常组、假手术组及中药组相比明显升高(P <0.05),血清SOD含量及血清GSH含量与正常组、假手术组及中药组相比明显降低(P <0.05)。结论通腑平喘方对脓毒症急性肺损伤大鼠有保护作用,其机制可能与其激活Nrf2,上调SOD、GSH有关,起到抑制氧化应激反应、减轻肺组织损伤的作用。 杨丽梦 熊旭东关键词:NRF2 脓毒症 急性肺损伤 熊旭东教授中西医结合治疗特发性肺纤维化的临床经验 被引量:3 2016年 特发性肺纤维化(IPF)是指原因不明确的两肺弥漫性间质纤维化,西医常采用糖皮质激素和免疫抑制剂治疗。熊旭东教授认为IPF属祖国医学喘证、肺胀、咳嗽、肺痿、肺痹等病症,病机以痰、瘀、热之标实以及肺、脾、肾之本虚为特点;中医以宣肺平喘、清热化痰、补益肺脾肾为主要治法。临床上以中西医结合治疗本病,以急则治其标、缓则治其本为总纲,方可取得良好的疗效。这一经验对临床治疗及科研均有一定的参考价值。 杨丽梦 熊旭东关键词:特发性肺纤维化 中西医结合 通腑泻肺方对脓毒症大鼠肺p38活性的调控作用(英文) 被引量:2 2015年 目的:探讨通腑泻肺方对脓毒症大鼠肺p38活性的调控作用。方法:将32只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、治疗组,每组8只。采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症模型,治疗组予以通腑泻肺方灌胃。应用透射电子显微镜观察肺组织的病理改变;采用Western blotting法检测p38和p-p38的表达,用RT-PCR法分析p38m RNA的表达。结果:电镜下,模型组肺组织炎性反应明显,而治疗组肺组织炎性反应不明显。与正常组及假手术组相比,模型组p38表达水平明显升高(P<0.01),p-p38表达水平明显升高(P<0.01),p38 m RNA表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组相比,治疗组p38表达水平降低(P<0.05),p-p38表达水平明显降低(P<0.01),p38 m RNA表达水平降低(P<0.05)。结论:通腑泻肺方对脓毒症大鼠肺组织有明显改善作用,其机制可能与其具有调控p38活性,减轻肺组织损伤有关。 夏乐敏 熊旭东 沈晓红 张涛 张燕婷 叶伟成关键词:脓毒症 P38 通腑泻肺方对脓毒症急性肺损伤大鼠NLRP3调控作用的实验研究 被引量:13 2014年 目的观察通腑泻肺方对脓毒症急性肺损伤大鼠NLRP3炎性体表达的影响,探索通腑泻肺方治疗脓毒症急性肺损伤的作用机制。方法采用盲肠结扎穿孔法(CLP)复制脓毒症急性肺损伤动物模型。将32只清洁级健康成年雄性SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组和治疗组,每组8只。空白对照组麻醉后腹主动脉采血致死;假手术组麻醉后开腹,翻动胃肠后关腹,24 h后麻醉并腹主动脉采血致死;模型组于CLP后立即予生理盐水2 mL灌胃1次,CLP后6 h、12 h,再分别给予生理盐水2 mL灌胃1次,CLP后24 h予麻醉并腹主动脉采血致死;治疗组于CLP后立即予通腑泻肺方中药灌胃1次,CLP后6 h、12 h,再分别给予通腑泻肺方中药灌胃1次,CLP后24 h予麻醉并腹主动脉采血致死。观察各组大鼠的一般表现,ELISA法检测各组血清中Caspase-1含量,Western blot法检测各组大鼠肺组织中NLRP3、ASC含量,RT-PCR法检测肺组织中NLRP3、ASC的mRNA表达量。结果模型组和治疗组肺组织NLRP3、ASC的蛋白水平、mRNA表达水平以及血清中caspase-1水平均显著高于空白对照组和假手术组(P<0.01);模型组肺组织NLRP3、ASC的蛋白水平、mRNA表达水平以及血清中Caspase-1水平显著高于治疗组(P<0.01)。结论通腑泻肺方能够下调脓毒症急性肺损伤大鼠NLRP3、ASC、Caspase-1的表达水平,具有调控NLRP3炎性体合成的作用。 张涛 熊旭东 赵敏关键词:脓毒症 急性肺损伤 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性体的调控机制 被引量:1 2015年 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性体是介导人体固有免疫反应的重要蛋白,其可被广泛的外源性和内源性刺激物所激活,并通过胱天蛋白酶1(caspase-1)信号通路调节白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的活化,从而在许多炎症性疾病的发病过程中发挥着重要作用。近年来针对NLRP3炎性体的调控机制做了大量的研究,发现了许多对NLRP3炎性体具有调控作用的物质,这些研究有助于加深对炎症性疾病的认识和治疗。该文对NLRP3炎性体的组成结构、激活和调控机制予以综述。 张涛 熊旭东