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柔嫩艾美耳球虫抗药性相关基因M20的克隆与表达: 利用前期构建的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株与各自母株之间的抑制性消减文库而获得的ESTs序列,选择其中一个差异表达的EST序列(克隆号:M20),采用RACE技术,以柔...; 程军董辉郭涛韩红玉姜连连赵其平朱顺海马卫娇曾艳波孔春林李婷黄兵; 文献传递

连锁群选育法:一种新型的遗传学鉴定基因方法: 连锁群选育法(Linkage Group Selection,LGS)是一种新型的鉴定与表型相关基因的遗传学方法,具有快速、有效、省力等优点,最早由Culleton等人于2005年提出,并首先用于疟原虫(Plasmodi...; 郭涛黄兵董辉韩红玉赵其平姜连连李洋平宪卿; 文献传递

柔嫩艾美耳球虫地克珠利与马杜拉霉素抗药株的基因重组选育被引量：2: 2010年; 将柔嫩艾美耳球虫地克珠利抗药株与马杜拉霉素抗药株等剂量同时感染无球虫鸡,再将得到的杂交后代经饲喂了地克珠利与马杜拉霉素的鸡筛选获得重组体,对该重组体的部分生物学特性进行了研究,旨在采用基因重组方法筛选出具有双重抗性的重组抗药株。结果显示,该重组体的重组率为0.4%;对地克珠利与马杜拉霉素具有完全抗性,而对氯苯胍与尼卡巴嗪完全敏感;卵囊繁殖能力介于两母株之间,致病性与母株无显著性差异。表明,用基因重组法首次成功筛选出了对地克珠利与马杜拉霉素同时具有抗性的柔嫩艾美耳球虫抗药株。; 郭涛董辉黄兵韩红玉赵其平姜连连朱顺海李洋平宪卿马卫娇曾艳波程军; 关键词：柔嫩艾美耳球虫地克珠利马杜拉霉素基因重组

柔嫩艾美耳球虫抗药性相关基因M_(20)的克隆与表达被引量：1: 2011年; 利用前期构建的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株与各自母株之间的抑制性消减文库而获得的ESTs序列,选择其中一个差异表达的EST序列(克隆号为M20),采用RACE技术,以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA为模板,扩增获得了该基因的全长cDNA序列,命名为M20,该基因全长847 bp,包括一个525 bp的开放阅读框,编码174个氨基酸,预测理论分子量约为19 ku。实时荧光定量PCR结果显示,该基因在敏感株中表达量高于地克珠利抗药株和马杜拉霉素抗药株;在不同发育阶段中,未孢子化卵囊表达量高于孢子化卵囊、子孢子以及裂殖子阶段虫体。将该基因克隆于原核表达质粒pET28b中,构建重组质粒pET28b-M20,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导表达获得了重组蛋白,分子量约约为23 ku,该蛋白以包涵体形式存在,在IPTG诱导8 h后表达稳定,Western blot检测表明,其具有较好的免疫原性。; 程军董辉郭涛韩红玉姜连连赵其平朱顺海马卫娇曾艳波孔春林李婷黄兵; 关键词：柔嫩艾美耳球虫抗药性地克珠利马杜拉霉素实时荧光定量PCR

连锁群选育法及其在疟原虫研究中的应用: 2010年; 鉴定控制耐药性、生长速率以及株特异性免疫力等重要表型的基因,对于控制疟疾具有重要意义,而传统的遗传学方法很难达到该目的。论文介绍一种鉴定表型相关基因的新型遗传学方法——连锁群选育法(linkage group selection,LGS),该方法具有快速、有效、省力等优点。采用LGS已成功鉴定了与疟原虫耐药性、株特异性免疫力等表型相关的靶基因。由于泰勒属(Theileria)、巴贝斯属(Babesia)、弓形虫属(Toxoplasma)、艾美耳属(Eimeria)等顶复器原虫在生活史中与疟原虫具有相同的遗传学特征,故LGS也有望应用于这些原虫相关表型基因的研究。; 郭涛董辉黄兵; 关键词：扩增片段长度多态性表型疟原虫

柔嫩艾美耳球虫地克珠利与马杜霉素耐药株的3种同工酶分析被引量：4: 2011年; 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对柔嫩艾美耳球虫(E imeria tenella)药物敏感株、地克珠利耐药株、马杜霉素耐药株以及2个耐药株重组体的乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸葡萄糖异构酶(GPI)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)同工酶进行了分析.结果显示:在LDH同工酶谱中,敏感株有一条浓带,3株耐药株均没有酶带;在GPI同工酶谱中,敏感株有4条带,地克珠利耐药株有GPI-2和GPI-4,而马杜霉素耐药株和重组体均含有GPI-2、GPI-3和GPI-4;在G6PD同工酶谱中,敏感株有4条带,而3株耐药株均只有G6PD-3和G6PD-4.同工酶分析表明,药物敏感株与3株耐药株之间的3种同工酶均有差异.3株耐药株之间的GPI存在差异,而在LDH和G6PD无差异.; 郭涛董辉黄兵赵其平韩红玉姜连连李洋平宪卿朱顺海; 关键词：柔嫩艾美耳球虫地克珠利马杜霉素同工酶

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国家自然科学基金(30700601)