河北省科技支撑计划项目(09276426D)
- 作品数：11 被引量：19H指数：3
- 相关作者：刘福英刘军须蔡月花郑龙王俊霞更多>>
- 相关机构：河北医科大学河北联合大学中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：河北省科技支撑计划项目河北省科技攻关计划河北省卫生厅医学科学研究重点课题更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 含AFP基因调控序列的pAFP-P53-EGFP质粒诱导AFP阳性肝癌细胞凋亡被引量：5
- 2010年
- 目的:观察含AFP基因调控序列的载体对AFP阳性肝癌细胞的靶向致凋亡作用。方法:将AFP启动子、沉默子和远端增强子Ⅲ组合为1.2 kb的AFP基因调控序列,构建pAFP-EGFP载体,分别转染人肝癌HepG2(AFP阳性)、人肝癌SMMC7721(AFP阴性)和人宫颈癌HeLa(AFP阴性)细胞,荧光显微镜下观察EGFP荧光蛋白表达强度。引入P53基因片段,构建pAFP-P53-EGFP重组质粒,转染HepG2、SMMC7721和HeLa细胞,Western blotting检测各组细胞P53蛋白的表达,流式细胞术分析各组细胞凋亡率及细胞周期。结果:成功构建了pAFP-EGFP和pAFP-P53-EGFP重组质粒。pAFP-EGFP转染后,AFP阳性的HepG2细胞中EGFP荧光蛋白表达显著高于AFP阴性的SMMC7721和HeLa细胞。pAFP-P53-EGFP转染后,HepG2细胞中P53蛋白的表达量明显高于SMMC7721和HeLa细胞;HepG2细胞的G1期细胞及细胞凋亡率明显高于SMMC7721和HeLa细胞[(66.7±0.25)%vs(50.5±0.18)%,(51.0±0.20)%,P<0.05;(2.65±0.08)%vs(0.42±0.03)%,(0.39±0.02)%,P<0.05],但S期细胞明显低于转染后SMMC7721和HeLa细胞[(20.1±0.22)%vs(29.8±0.18)%,(37.8±0.21)%,P<0.05]。结论:含AFP基因调控序列的pAFP-P53-EGFP载体可专一性地作用于AFP阳性肝癌细胞,引起肝癌细胞周期阻滞和凋亡。
- 张焕铃王俊霞尤红煜刘健敏郑龙连伟光刘福英
- 关键词：肝癌细胞P53细胞周期阻滞细胞凋亡
- MIJ和HFJ近交系大鼠血液生理生化的表型观察
- 2011年
- 目的:测定近交系MIJ和HFJ大鼠的血液生理、生化指标,并以它们的原始亲体动物Wistar远交群大鼠为参考,进行比较分析,了解近交系MIJ和HFJ大鼠血液生理、生化指标的表型特征。方法:利用XT-1800i全自动血球记数仪和HITACHI 7060-020全自动生化仪对MIJ、HFJ和Wistar大鼠24项血液常规值和27项血液生化值进行测定。结果:HFJ大鼠与同性别Wistar大鼠、MIJ大鼠与同性别Wistar大鼠、HFJ大鼠与同性别MIJ大鼠之间均有许多血常规指标和生化指标存在差异。HFJ大鼠不同性别间、MIJ大鼠不同性别间部分指标存在差异。结论:MIJ和HFJ近交系大鼠血液的生理、生化有不同表型,各有其独特的生物学特征。
- 陈贵良刘军须刘惠茹蔡月花曹福源郑龙姚林刘福英
- 关键词：血液生理生化指标
- 近交系HFJ大鼠的抗肿瘤细胞Walker-256特性
- 2012年
- 目的检测近交系HFJ大鼠的肿瘤学特性。方法采用大鼠肿瘤细胞Walker-256分别接种HFJ大鼠和Wistar大鼠制作腹水瘤、实体瘤模型,观察两种动物对同一种肿瘤细胞的敏感性及免疫反应差异。结果对于腹水瘤Walker-256接种7d,Wistar大鼠有6只腹水产生为阴性,HFJ大鼠腹水产生均为阳性。继续观察至20d,可见到Wistar大鼠有3只腹水阴性(阳性率9/12,死亡2只,染色体用1只),而HFJ大鼠腹水全部为阴性(阳性率0/12,死亡2只,染色体用1只)。腹水中Walker-256细胞染色体分析,Wistar大鼠和HFJ大鼠众数变化范围均为50～62条,无显著差异。实体瘤接种7d,Wistar大鼠和HFJ大鼠均可触摸到右侧腋下有肿块产生。20d后Wistar大鼠除2只肿块消失外其他均有肿块存在并随时间延长而增大(阳性率13/15);所有HFJ大鼠腋下肿块均变软并逐渐消失(阳性率0/15)。检测各组大鼠的细胞免疫、体液免疫功能,发现正常HFJ大鼠IgM、IgA显著低于Wistar大鼠(P<0.01),IgG差异不显著。荷瘤组HFJ大鼠和Wistar大鼠IgG均高于各自正常对照组,差异极显著(P<0.01)。Wist-ar大鼠腹水瘤阳性组IgG显著低于阴性组和HFJ腹水阳性组(P<0.05),Wistar大鼠实体瘤阳性组也显著低于HFJ实体阳性组(P<0.01)。Wistar大鼠腹水瘤阳性组IgM显著低于阴性组(P<0.05),Wistar大鼠腹水瘤阴性组和HFJ大鼠腹水瘤、实体瘤阳性组IgM均高于各自对照组,且差异显著(P<0.05)。细胞免疫结果显示各组CD4+数量差异不显著;正常HFJ大鼠CD8+显著少于Wistar大鼠(P<0.05),Wistar大鼠腹水瘤和实体瘤阳性组CD8+数量较阴性组和正常对照组均显著减少(P<0.05)。各荷瘤阴性组大鼠CD8+数量均较正常值增加,除Wistar大鼠腹水瘤和HFJ实体瘤阴性组大鼠差异显著(P<0.05)外,其他均不显著;CD4+/CD8+结果与CD8+相反。结论 HFJ大鼠具有抗大鼠肿瘤细胞Walker-256的特性,腹水瘤及实体瘤均不易生长。
- 张焕铃张建刚刘军须郑龙连伟光尤红煜刘健敏刘福英
- 关键词：近交系抗肿瘤免疫
- 单核苷酸多态性分析在近交系大鼠遗传检测中的应用被引量：3
- 2011年
- 目的研究SNP在近交系大鼠遗传检测中的应用。方法 选取大鼠20号染色体MHC所在P12区上的9个SNP位点,应用新建立的高保真酶特异性检测SNP基因分型技术对五种常用近交系大鼠(BN、F344、WKY、LEW、SHR)和两种新培育近交系大鼠(MIJ和HFJ)进行SNP多态性分析。结果五种常用近交系的SNP检测结果与Rat Genome Database网站提供的基因型数据一致,并检测确立了新品系的SNP基因型。同时绘制出七种近交系大鼠在该9个SNP位点的遗传扩增图谱。结论运用所筛选的9个SNP位点进行大鼠多态性分析,能够快速、可靠地对BN、F344、WKY、LEW、SHR及MIJ、HFJ进行遗传监测。
- 王淑菁岳秉飞马丽颖王洪魏杰刘军须刘福英刘双环
- 关键词：近交系大鼠
- 近交系MIJ和HFJ大鼠生化标记基因的测定被引量：3
- 2011年
- 目的观察MIJ和HFJ大鼠的基因纯合度和遗传稳定性。方法 MIJ大鼠7只,取自F22代基础群中3对种鼠和F22代雄性生殖缺陷鼠1只。HFJ大鼠6只,取自HFJ大鼠F25代基础群中的3对种鼠。按照中华人民共和国国家标准GB/T14927.1-2001实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测方法测定。结果 MIJ和HFJ近交系大鼠的11个生化标记基因位点均为完全纯合,且两个品系大鼠的生化遗传概貌完全一致,生化位点基因型分别为,Akp1为a,Cs1为a,Es1为b,Es3为d,Es4为b,Es6为a,Es8为b,Es9为a,Es10为a,Hbb为a,Alp1为b。两个品系大鼠生化标记基因遗传概貌与目前常用的近交系大鼠比较,未发现与其生化遗传概貌完全相同的品系。结论 MIJ和HFJ近交系大鼠符合近交系动物标准,且具有独特的生化遗传概貌。
- 刘军须蔡月花王瑜冯旭王莉史荣珍林德森刘福英
- 关键词：近交系
- MIJ和HFJ近交系大鼠生化标记基因的检测与研究
- 目的刘军须、蔡月花等自2001年开始培育近交系大鼠,最终形成两个近交品系,即MIJ大鼠和HFJ大鼠。MIJ近交系大鼠的特征为睾丸发育迟缓和雄性不育,HFJ大鼠则具有较高的繁殖力,两个品系大鼠有可能在生殖研究等方面成为一种...
- 蔡月花刘福英王莉冯旭王瑜刘军须
- 关键词：近交系
- 文献传递
- HFJ和Wistar大鼠脂肪肝及胰岛素抵抗动物模型的比较被引量：1
- 2012年
- 目的建立近交系HFJ大鼠和封闭群Wistar大鼠脂肪肝胰岛素抵抗动物模型及比较其生物学特性。方法雄性HFJ大鼠和Wistar大鼠,分别随机分为模型组和正常组,模型组喂养高脂饮食,正常组喂养普通饮食,两组脂肪分别占摄入能量的44.2%和19.2%,共饲养12周。每周称体质量,测定血糖、甘油三酯、胆固醇、ALT、AST、HDLC、LDLC和血胰岛素水平。实验期末处死动物摘取肝脏并称质量,计算肝指数;鼠肝脏用10%甲醛固定,石蜡包埋切片,HE染色,光镜下评估肝脂肪变性和炎症活动情况。结果镜下可见,HFJ和Wistar大鼠模型组肝细胞均呈现弥漫性脂肪变性,小叶内可见炎症细胞浸润,HFJ比Wistar脂肪变性较重,对照组肝脏均未见异常。两种动物的模型组ALT、AST、肝指数、HOMA-IR指数均显著高于其正常组,HFJ和Wistar种系间各指标的差异无显著性;HFJ大鼠模型组体重和正常组体重具有显著性差异(P<0.01),而Wistar大鼠模型组体重与正常组体重间无显著差异(P>0.05);HFJ大鼠TG和TC含量均显著高于Wistar大鼠。结论通过高脂饮食喂养成功建立了HFJ大鼠和Wistar大鼠脂肪肝与胰岛素抵抗疾病动物模型,与Wistar大鼠比较,HFJ大鼠具有自发性高血脂特征,造模更易成功,可为胰岛素抵抗和脂肪肝的发病机制研究、防治高血脂药物筛选提供一种新的实验动物。
- 郑龙连伟光李建辉张焕铃王俊霞刘军须蔡月花刘福英
- 关键词：胰岛素抵抗脂肪肝动物模型
- 微卫星DNA标记在近交系大鼠HFJ和MIJ遗传监测中的应用被引量：4
- 2012年
- 目的用24对引物对近交系HFJ和MIJ大鼠的微卫星位点进行多态性分析,并选用近交系Lewis和F344大鼠作为对照,进行比较分析。方法用传统的酚-氯仿法分别提取4个近交系大鼠MIJ、HFJ、Lewis和F344的基因组DNA,选取大鼠24个微卫星位点,通过PCR扩增,扩增产物经过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染,根据电泳结果,比较分析4种品系近交系大鼠之间微卫星多态性。结果 4种品系及品系内不同个体的近交系大鼠在24个微卫星位点上的扩增产物均出现一个条带,MIJ和HFJ大鼠在品系间和品系内均表现为单态性,同Lewis和F344的扩增结果比较,14个位点显示多态性,有10个位点显示单态性。结论两个近交系大鼠品系MIJ和HFJ符合近交系要求,筛选出的14个多态性微卫星位点可用于有关近交系大鼠的遗传背景监测。
- 郑龙李建辉王俊霞刘军须蔡月花连伟光刘福英
- 关键词：微卫星DNA
- 近交系MIJ和HFJ大鼠部分生理数据测定和分析被引量：1
- 2011年
- 目的测定近交系大鼠MIJ、HFJ和封闭群Wistar大鼠的脏器系数、体温、呼吸频率、肠管长度,观察两个近交系大鼠的生理表型。方法 采用常规方法对大鼠脏器系数、体温、呼吸频率及肠管长度进行测定,并对HFJ、MIJ、Wistar大鼠三者间进行比较。结果①体重:HFJ、MIJ、Wistar大鼠同性别间比较差异无显著性。②脏器系数:HFJ与Wistar大鼠雄性间心脏、肺,雌性间子宫、肝;MIJ与Wistar大鼠雄性间肺、脾,雌性间脑、脾,差异均有显著性。HFJ与MIJ大鼠雄性间脑,雌性间脑和脾差异有显著性。HFJ大鼠不同性别间肝、脑、眼球差异有显著性。MIJ大鼠不同性别间,脑、心脏、肾、肺、脾和眼球差异均有显著性。③体温:HFJ雌性大鼠明显高于Wistar雌性,雄性间差异无显著性。HFJ大鼠雌性高于雄性,差异有显著性。④呼吸频率:HFJ雌性大鼠低于同性Wistar大鼠,MIJ大鼠雌性和雄性均高于同性别Wistar大鼠,差异有显著性。⑤肠管长度:HFJ与Wistar同性别间比较,肠管总长和小肠差异有显著性。MIJ与Wistar大鼠雄性间肠管总长、大肠、小肠、盲肠差异均有显著性,雌性间肠管总长、小肠、盲肠差异有显著性。HFJ与MIJ大鼠同性别间差异均无显著性,不同性别的HFJ和MIJ的肠管总长、大肠和小肠差异有显著性。结论 MIJ和HFJ近交系大鼠的脏器系数、体温、呼吸频率、肠管长度都各有其独特的生理概貌。
- 陈贵良刘军须刘惠茹蔡月花曹福源郑龙姚林刘福英
- 近交系HFJ大鼠血清中IL-1β、IL-2和IL-10观察研究
- 2011年
- 目的比较观察本实验室培育的近交系HFJ大鼠和Wistar大鼠血清中IL-1β、IL-2和IL-10的含量。方法 HFJ大鼠和远交群Wistar大鼠各10只,应用ELISA法分别检测其血清IL-1β、IL-2和IL-10水平。结果 HFJ大鼠血清中IL-1β、IL-2的含量与Wistar大鼠相比差异无统计学意义(P>0.05),HFJ大鼠血清中IL-10的含量高于Wistar大鼠组,差异有统计学意义(P<0.05)。且HFJ大鼠的IL-1β、IL-2和IL-10总体离散度明显小于Wistar大鼠组。结论 HFJ大鼠血清IL-10高于Wistar大鼠且近交系HFJ大鼠的IL-1β、IL-2和IL-10,测定值较为均一,离散度均低于Wistar大鼠。
- 段肖翠吕占军蔡月花王秀芳侯洁刘军须刘福英谢英
- 关键词：IL-1ΒIL-2IL-10
