国家自然科学基金(30772532)
- 作品数：14 被引量：26H指数：4
- 相关作者：陈余清李伟赵成岭舒红梅孙艳更多>>
- 相关机构：蚌埠医学院第二附属医院蚌埠医学院第一附属医院上海市肺科医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Survivin与Sp1关系研究进展
- 2009年
- Survivin是近年来发现的一种凋亡抑制基因，属凋亡蛋白抑制因子家族的新成员。Survivin在正常组织中不表达，高度表达于人类肿瘤组织。其功能复杂，可直接或间接抑制细胞调亡。Sp1是Sp1—like／KLF家族的一员，在多种组织中广泛表达，参与多种基因的转录调控，在保证管家基因、组织特异性表达基因和病毒基因正确表达过程中有重要作用。本文就近年来Spl与Survivin关系进展作一综述。
- 李艳陈余清
- 关键词：SURVIVINSP1细胞凋亡
- HIF-1α基因沉默对人肺腺癌细胞A549裸鼠移植瘤生长及survivin表达的影响被引量：4
- 2011年
- 目的观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因沉默对肺癌的抑瘤效应和survivin表达的影响。方法将实验用肺腺癌A549细胞分为空白对照组、无意义序列转染组和实验组,接种裸鼠,建立裸鼠荷瘤模型,观测HIF-1α-MiRNA对裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用和对survivin表达的影响。采用免疫组化SP法,检测HIF-1α和survivin蛋白在裸鼠移植瘤中的表达。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HIF-1α和survivin mRNA的表达。采用原位末端标记(TUNEL)法检测肿瘤组织中细胞凋亡。结果实验组裸鼠肿瘤的生长速度较空白对照组、无意义序列转染组明显减慢(P<0.05)。接种60 d后处死裸鼠,实验组裸鼠的肿瘤重量为(0.59±0.28)g,明显轻于空白对照组[(1.90±0.18)g]和无意义序列转染组[(1.66±0.24)g,P<0.01]。实验组肿瘤组织中HIF-1αmRNA和蛋白的相对表达量分别为(0.45±0.04)%和(24.56±5.83)%,survivin mRNA和蛋白的相对表达量分别为(0.32±0.02)%和(29.08±3.99)%,均明显低于空白对照组、无意义序列转染组(P均<0.05)。但实验组肿瘤组织中凋亡细胞的数量显著高于对照组。结论以HIF-1α为靶点的基因治疗,可能通过下调靶基因survivin的表达促进肺癌细胞凋亡,发挥抑制肿瘤生长的作用。
- 沈圆兵陈余清王效静李伟舒红梅
- 关键词：HIF-1Α基因SURVIVIN蛋白裸鼠
- 肺腺癌细胞A549中人survivin基因核心启动子位置与功能初探被引量：4
- 2008年
- [目的]探讨人survivin核心启动子的位置及在A549细胞中的转录激活功能。[方法]在生物信息学分析基础上,构建了4个分别由survivin 5′上游-1436^+64、-612^+64、-414^+64和-203^+64片段驱动的报告载体,分别瞬时转染A549及HK-2细胞,观察其在两种细胞的表达活性并比较在A549细胞中表达的活性差异。[结果]生物信息学提示survivin TSS位于ATG上游-64bp处,启动子近端富含若干潜在Sp1、p53和HIF-1α等结合位点。4种报告载体在A549细胞均有活性,且不同长度的启动子活性存在统计学差异。而在HK-2细胞中,4种载体未见显著性差异。[结论]人survivin启动子的活性具有肿瘤特异性,核心启动子可能位于TSS上游-203bp至+64bp处。suvivin核心启动子内可能存在2处HIF-1α的结合位点。
- 陈斌陈余清李伟
- 关键词：腺癌A549细胞SURVIVIN启动子
- Sp1在人肺癌细胞中对survivin表达的调控被引量：3
- 2009年
- [目的]探讨Sp1转录因子在人肺腺癌细胞株A549中对survivin基因表达影响。[方法]电泳迁移率分析(EMSA)检测A549细胞核蛋白与标记的survivin启动子序列在有、无mithramycin时的结合情况。用不同浓度mithramycin处理A549细胞,RT-PCR检测survivin mRNA的表达。[结果]标记的survivin启动子序列-126bp～-106bp与核蛋白作用,出现DNA-核蛋白结合条带,经mithramycin预处理的相同序列出现减弱的DNA-核蛋白结合条带;序列-186bp～-166bp与核蛋白作用后无相应条带。mithramycin使A549细胞survivin mRNA表达显著下降。[结论]survivin启动子-121bp～-116bp处存在Sp1结合位点,mithramycin抑制Sp1与此位点的结合;-178bp～-175bp处可能不存在Sp1结合位点。mithramycin抑制survivin mRNA表达,抑制作用具有浓度依赖性。
- 张晓洁陈余清李伟
- 关键词：SURVIVINMITHRAMYCINA549细胞
- 人肺腺癌细胞株A549中HIF-1α对survivin的表达调控被引量：4
- 2011年
- 背景与目的:survivin是一种重要的抗凋亡基因,在肿瘤组织中特异性高表达,并参与调控细胞周期和细胞凋亡,其高表达与肿瘤进展、药物抵抗以及预后关系密切。但survivin在肺癌中高表达的转录调控机制研究甚少。课题组前期研究成功构建含有survivin核心启动子的荧光报告载体pGL3-SVP230-luc,并发现核心启动子区存在缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的潜在位点。本研究拟通过免疫荧光双标记法、电泳迁移率实验(EMSA)、共转染等方法探讨缺氧条件下人肺腺癌细胞株A549中HIF-1α调控survivin转录的确切机制。方法:⑴运用免疫荧光双标记检测缺氧A549细胞中HIF-1α与survivin的表达;⑵HIF-1α表达质粒和HIF-1αsiRNA分别转染A549细胞,30 h后RT-PCR、Western blot和免疫荧光双标法检测survivin mRNA和蛋白表达;⑶pGL3-SVP230-luc(含有survivin核心启动子的荧光报告载体)与HIF-1α表达质粒和HIF-1αsiRNA分别共转染A549细胞,测定萤光素酶的表达活性;⑷EMSA分析HIF-1α与survivin核心启动子结合情况;(5)流式细胞术和MTT法检测细胞凋亡和增殖。结果:⑴HIF-1α与survivin共表达于A549细胞中;⑵转染HIF-1α表达质粒组survivin mRNA和蛋白表达水平显著上调,转染HIF-1αsiRNA组survivin mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01);⑶HIF-1α表达质粒组pGL3-SVP230-luc相对活性分别为78.84,显著高于空质粒组及对照组(P<0.01),HIF-1αsiRNA组pGL3-SVP230-luc相对活性分别为28.84,显著低于空质粒组及对照组(P均<0.01);⑷HIF-1α与survivin核心启动子区转录起始点上游-19～-16 bp序列结合转录激活survivin;⑸流式细胞术和MTT检测结果显示,HIF-1αsiRNA组细胞凋亡显著增加,细胞抑制率明显升高,与对照组相比差异具有统计学意义(P均<0.01)。结论:缺氧状态下A549细胞中survivin与HIF-1α存在共表达;HIF-1α可以通过survivin核心启动子区的结合位点激活survivin转录和表达;靶
- 李伟陈余清孙艳赵成岭王效静
- 关键词：缺氧诱导因子-1ΑSURVIVIN转录调节非小细胞肺癌
- 生存素基因联合细胞角蛋白19片段抗原及癌胚抗原检测对肺癌引起胸腔积液的诊断意义被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨生存素(survivin)基因联合细胞角蛋白19片段抗原(CYFRA21-1)及癌胚抗原(CEA)检测对肺癌的诊断意义。方法:用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测65例肺癌和58例结核性胸膜炎患者胸腔积液中survivin mRNA表达,并行胸腔积液细胞学检测;同时用放射免疫分析法检测胸腔积液CEA、CYFRA21-1。结果:肺癌组胸腔积液survivin mRNA阳性率为80.0%,高于首次细胞学检查的阳性率(47.6%),结核性胸腔积液组survivin mRNA无表达(P<0.01)。胸腔积液survivin mRNA检测诊断肺癌胸膜转移的特异性(94.8%)高于CEA及CYFRA21-1(77.6%和75.8%);survivin mRNA检测的敏感性(80.0%)高于CEA(50.8%)(P<0.05),但与CYFRA21-1(78.5%)相似(P>0.05)。结论:survivin mRNA是诊断肺癌胸膜转移特异性较高的分子标志物,联合CEA及CYFRA21-1检测对鉴别肺癌性和结核性胸腔积液的鉴别诊断有重要意义。
- 孙丽芳陈余清赵成岭李伟李殿明
- 关键词：肺肿瘤胸腔积液生存素癌胚抗原抗原
- 早期生长反应基因-1与肿瘤的关系
- 2010年
- 早期生长反应基因-1属即刻早期基因家族，是一种重要的转录因子，至少调控着30种基因的转录，直接或间接地参与细胞的生长、分化、凋亡、免疫应答、损伤和修复。大量研究表明，早期生长反应基因-1在肿瘤细胞中表达消失，外源性早期生长反应基因-1的导入有抑制肿瘤细胞生长的作用。另有研究表明早期生长反应基因-1具有辐射诱导性，其在肿瘤放射治疗中具有潜在的临床应用前景。
- 时国平陈余清吕合作
- 关键词：早期生长反应基因-1肿瘤
- 生存素与肿瘤信号转导通路之间的关系
- 2010年
- 生存素是凋亡抑制蛋白家族新成员，是细胞增殖和凋亡调控界面间的“结点”分子。生存素基因表达的肿瘤特异性使其成为目前恶性肿瘤诊断和治疗的新靶点。肿瘤细胞发生与正常细胞的信号通路异常有关，信号转导通路的活化参与细胞癌变、增殖、凋亡等多种生物学效应。本文就肿瘤中信号转导对生存素基因的表达调控机制的研究进展作一综述。
- 孙艳陈余清
- 关键词：生存素信号转导肿瘤
- 非小细胞肺癌中Survivin和Sp1的表达及意义被引量：8
- 2009年
- 目的探讨Survivin和Sp1在非小细胞肺癌(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)组织中的表达与组织分化程度、淋巴结转移和临床分期的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测NSCLC患者120例手术标本和良性肺疾病患者40例手术标本中Survivin和Sp1的表达。结果NSCLC组织中Survivin和Sp1的阳性表达率分别为81.6%(98/120)和62.5%(75/120);良性肺疾病组织中阳性表达率分别为无表达和7.5%(3/40),Survivin和Sp1在组织分化程度差、有淋巴结转移和临床分期为三期的NSCLC中表达显著升高;且二者表达呈正相关(rs=0.355,P=0.005)。结论Survivin和Sp1在NSCLC组织中均有高表达,且与组织分化程度、淋巴结转移和临床分期密切相关。
- 李艳陈余清李伟刘学刚
- 关键词：SURVIVINSP1非小细胞肺肿瘤
- 乏氧诱导因子-1信号转导在肿瘤发生、发展中的作用
- 2012年
- 乏氧诱导因子-1（hypoxia-induciblefactor1，HIF-1）通常在人类肿瘤中过表达，其转录活性受细胞氧浓度的精确调节，是乏氧时进入细胞核激活转录的信使，继而可导致血管内皮生长因子（VEGF）和其他已知的HIF-1靶基因的转录激活。信号转导是指针对外源性信号所发的各种分子活性的变化，以及将这种变化依次传递至效应分子，以改变细胞功能的过程。近年来研究表明，多条信号通路参与HIF-1α及其靶基因的表达调控，探明其信号转导通路调控机制不仅有助于理解肿瘤的发生机制，而且能为肿瘤的特异性靶向治疗提供更多的理论基础和实验依据。本文就此方面研究进展作一综述。
- 沈圆兵陈余清
- 关键词：乏氧诱导因子-1信号转导肿瘤
