国家高技术研究发展计划(2004AA222120)
- 作品数：7 被引量：77H指数：6
- 相关作者：张增艳辛志勇姚乌兰刘晓东任正隆更多>>
- 相关机构：中国农业科学院作物科学研究所四川农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 植物基因功能鉴定新工具——病毒诱导基因沉默技术的研究进展被引量：22
- 2006年
- 病毒诱导基因沉默(Virus-induced gene silencing,VIGS)技术是指带一段靶基因序列的VIGS重组病毒侵染植物、引起植物同源基因沉默与表型变异,进而通过表型变异进行基因功能分析的方法,是近年发展起来的从反向遗传学方向快速鉴定植物基因功能的技术,是转录后基因沉默机制的一种表现。①VIGS的分子机制,涉及基因沉默的起始、维持和信号放大、传播共3个阶段;②VIGS技术、载体与方法学的发展;③VIGS作为基因功能研究的优越性,如不必进行转基因、操作方法简便、获得结果快速等;④应用VIGS对植物抗病途径、代谢与发育调控中参与基因功能进行研究的概况。同时,展望了VIGS技术作为植物功能基因组学功能分析的高通量技术平台的美好前景。
- 张增艳姚乌兰辛志勇
- 关键词：基因功能分析病毒载体
- 抗病基因Bdv2抑制大麦黄矮病毒复制和运动的分子证据(英文)被引量：9
- 2005年
- 小麦-中间偃麦草易位系YW642含有一个源于中间偃麦草7X染色体的抗性基因Bdv2,对大麦黄矮病毒GAV株系具有高度抗性.为有效控制该病毒和阐明抗黄矮病机制,采用半定量RT-PCR的方法,研究了大麦黄矮病毒GAV株系在YW642及其感病姊妹系YW641中积累浓度的差异.分别在接种病毒不同时间、不同部位上取样,用半定量RT-PCR的方法来检测GAV的积累浓度.在接种部位,抗病植株中病毒的浓度远远低于感病植株.在侵染的前5 d,抗病植株YW642中病毒会有一定程度的复制和积累,但随后病毒浓度开始下降,接种14～16 d时没有检测到病毒;而在感病株系中,病毒积累的浓度远远高于抗病植株,并一直维持一个较高的浓度.在未接种部位,感病植株中可检测到较高浓度的病毒,说明病毒能从接种点很快运动到未接种部位,并大量复制.而在抗病系YW642中,未接种部位始终未检测到病毒.实验结果从分子水平上证明,在抗病植株中BYDV的复制和运动均受到了极大的抑制.这是抗病基因Bdv2与BYDV互作后,激活了一系列防御基因的结果.另外还确定了防御基因诱导表达的时间,为从抗病植株中分离抗病相关基因、研究抗黄矮病机制提供了取样的依据.
- 刘晓东张增艳刘艳辛志勇
- 关键词：大麦黄矮病毒半定量RT-PCR抗性
- 基因枪法介导转人工合成Rs-AFP2基因小麦的获得和检测被引量：15
- 2006年
- 萝卜（Raphanus sativus）抗菌肽Rs—AFP2在体外强烈抑制小麦赤霉病菌（Fusarium graminenrum）、黄色镰孢菌（Fusarium culmorum）、烟草赤星病（Alternaria longipes）的菌丝生长。为了研究Rs-AFP2在小麦抗病育种上的应用潜力，人工合成了Rs-AFP2基因。通过基因重组技术（包括限制性内切酶酶切和连接），将人工合成的R以FP2基因替代单子叶高效组成型表达栽体pAHC25中的GUS基因，构建了R￡AFP2基因的单子叶高效表达栽体pUAFP2。该栽体除携带受Ubiquitin启动子控制的Rs-AFP2基因表达盒外，还具有1个受Ubiqutin启动子控制的Bar基因表达盒，后者可为后续利用除草剂Bialaphos筛选转化再生植株提供抗性；采用基因枪法轰击小麦品种扬麦12、济麦19、晋麦47和豫麦34幼胚共4042个，经过2～3次Bialaphos筛选，最终获得扬麦12再生植株316株；利用高效表达栽体pUAFP2的Bar和Rs-AFP2基因的特异引物对上述成活的转化植株进行PCR检测，获得Bar和Rs-AFP2基因均为阳性的植株58株，转化率为1．43％。
- 廖勇张增艳徐惠君杜丽璞姚乌兰辛志勇任正隆
- 关键词：小麦转基因
- 利用酵母双杂交系统研究植物与病毒蛋白相互作用的进展被引量：11
- 2006年
- 在长期进化中,植物形成了抵御病毒等病原微生物侵染的精细防御系统。在病毒侵染、复制和传播过程中,其编码的一些蛋白,如外壳蛋白、运动蛋白、复制酶类等能够与植物基因编码的蛋白发生相互作用。酵母双杂交系统是体外研究蛋白质间相互作用的有利工具,不但可以用于研究已知蛋白质的互作,还可以发现新蛋白,揭示特定蛋白互作网络与作用机制,在植物蛋白与病毒蛋白互作研究中已得到广泛的利用。本文主要综述利用酵母双杂交系统研究植物与病毒蛋白相互作用的国内外进展。
- 黄大辉张增艳辛志勇
- 关键词：酵母双杂交植物病毒
- 大麦和小麦抗病性的分子基础研究进展被引量：11
- 2005年
- 抗病性是大麦和小麦不可或缺的重要性状。本文介绍了大麦和小麦的抗病分子基础研究进展:从大麦和小麦分离出的抗病基因编码蛋白的结构具有相似性及独特性;从大麦中鉴定、分离出抗病基因介导、激活防御反应所必需的一些附加基因,并发现在双子叶植物与禾谷作物的抗病防御反应中一些信号传导基因具有保守性,有利于对大麦和小麦抗病信号传导途径的理解和同源基因的分离;从大麦和小麦中分离出病原诱导表达的一些防卫基因。本文讨论了利用已克隆的抗病基因结构保守性和比较基因组学进一步分离克隆大麦和小麦抗病基因的潜力与限制以及利用克隆的抗病基因进行生物工程育种的可能性与局限性;还提出了今后发展方向,即不仅将继续深入研究显性单基因的分子机制,还将揭示持久的多基因抗性和广谱的非寄主抗性的分子基础。
- 张增艳姚乌兰李宏涛辛志勇
- 关键词：大麦小麦抗病基因保守性
- 在小麦上实施大麦条斑病毒诱导的基因沉默被引量：6
- 2005年
- 刘晓东张增艳姚乌兰辛志勇
- 关键词：转录后基因沉默大麦小麦表型变异功能基因组基因组研究
- SGT1在植物抗病反应中的功能研究进展被引量：7
- 2008年
- SGT1是多种植物抗病基因介导的抗病信号途径的必要组件。SGT1基因的突变或沉默会导致多种植物R基因介导抗病性的丧失。另外,SGT1还参与调控植物的非宿主抗性(non-host resistance)。SGT1主要作为分子伴侣或调控泛素化对植物抗病反应进行调控。本文综述了SGT1蛋白结构、SGT1在不同植物抗病反应中的重要性与作用机制,并对SGT1在植物抗病基因工程中的应用潜力进行讨论。
- 王凯张增艳
- 关键词：植物抗病信号途径HSP90
