江苏省科技厅社会发展基金(BS2005043)
- 作品数：14 被引量：28H指数：3
- 相关作者：尤海燕李晶裘影影殷玉俊焦志军更多>>
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- 来氟米特对系统性红斑狼疮T淋巴细胞的免疫调节作用被引量：4
- 2011年
- 目的探讨来氟米特(LEF)在体外对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T淋巴细胞的免疫调节作用。方法在植物血凝素(PHA)刺激下,SLE患者外周血T淋巴细胞与不同浓度的LEF5、15、45μg/ml共培养。检测各组T淋巴细胞的增殖、凋亡情况,分析各组T淋巴细胞免疫表型CD152、CD28的表达以及各组T淋巴细胞的干扰素(IFN)γ、白细胞介素(IL)10、转化生长因子(TGF)β1 mRNA水平。结果在体外,LEF对由PHA诱导的SLE患者T淋巴细胞的增殖、凋亡均有抑制作用,且抑制作用与LEF呈剂量依赖性。LEF对T淋巴细胞CD152、CD28的表达无明显影响。LEF促进IL-10、TGF-β1 mRNA的表达,抑制IFN-γ mRNA的表达。结论 LEF可能通过减少T淋巴细胞凋亡、促进T淋巴细胞分泌IL-10、TGF-β1以及减少T淋巴细胞分泌IFN-γ来下调SLE的免疫反应。
- 何建强李晶裘影影尤海燕
- 关键词：来氟米特系统性红斑狼疮T淋巴细胞免疫调节
- 间充质干细胞对异基因鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用被引量：2
- 2008年
- 目的：探讨体外间充质干细胞（MSCs）对BALB/c鼠T，B细胞的免疫调节作用及可能机制。方法：从5～6周龄BALB/c鼠骨髓中分离培养MSCs并鉴定其纯度。用EZ-Sep^TM Mouse 1X分离异体BALB/c鼠脾脏淋巴细胞，分别在刀豆球蛋白A（ConA）、脂多糖（LPS）刺激下，用不同比例MSCs处理，MTT法检测淋巴细胞的增殖，流式细胞术检测T，B细胞CD69，CD28和CD86的表达和凋亡，实时定量PCR测定细胞因子IL-10和IFN-γ的mRNA水平。结果：MSCs明显抑制T，B细胞增殖和T细胞的凋亡，促进IFN-γ、抑制IL-10的mRNA表达（P〈0.01），并且随着MSCs数量的增加而更加明显。MSCs对T，B细胞CD69，CD28和CD86的表达无显著影响。结论：MSCs对BALB/c鼠T，B细胞有免疫负调节作用，但机制复杂，可能与协同抑制细胞增殖和凋亡、干预相关细胞因子mRNA的表达有关。
- 殷玉俊李晶裘影影尤海燕朱伟焦志军
- 关键词：间充质干细胞淋巴细胞免疫调节
- MSCs联合雷帕霉素对异基因鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用被引量：3
- 2009年
- 目的探讨体外骨髓间充质干细胞(MSCs)联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞的免疫调节作用及可能机制。方法从5～6周龄BALB/c鼠骨髓中分离培养MSCs并鉴定其纯度。用EZ-SepTM Mouse1X分离异体BALB/c鼠脾脏淋巴细胞,分别在刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)刺激下,用MSCs和/或雷帕霉素处理,MTT法检测淋巴细胞的增殖,流式细胞术检测T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达和T淋巴细胞凋亡情况,Real-time PCR测定T淋巴细胞IL-10 mRNA、IFN-γ mRNA的表达水平。结果MSCs明显抑制T、B淋巴细胞增殖,联合雷帕霉素组抑制作用更加显著(P<0.01)。MSCs可抑制T淋巴细胞的凋亡,联合雷帕霉素组较单独MSCs组抑制作用更加明显(P<0.01)。MSCs联合雷帕霉素具有协同促进IFN-γ mRNA表达和协同抑制IL-10 mRNA表达的作用。单独MSCs或MSCs联合雷帕霉素对T、B淋巴细胞CD69、CD28和CD86的表达无显著影响。结论MSCs联合雷帕霉素对BALB/c鼠T、B淋巴细胞有免疫负调节作用,可能与协同抑制淋巴细胞增殖、T淋巴细胞凋亡和干预IFN-γ mRNA、IL-10 mRNA表达有关。
- 殷玉俊李晶汤郁尤海燕朱伟许文荣焦志军
- 关键词：雷帕霉素免疫调节
- MSCs联合来氟米特对异基因鼠B细胞的免疫调节被引量：2
- 2008年
- 目的探讨体外骨髓间充质干细胞(MSCs)联合来氟米特(LEF)对BALB/c鼠B细胞的免疫调节作用。方法从5～6周龄BALB/c鼠骨髓中分离培养MSCs,并通过其形态的均一性及流式细胞术(FCM)检测其表面标志以鉴定其纯度。用EZ-SepTM Mouse1X分离脾脏淋巴细胞,经脂多糖(LPS)刺激,并与LEF和/或MSCs作用。分为A组(脾细胞)、B组(脾细胞+LEF)、C组(脾细胞+MSCs)和D组(脾细胞+LEF+MSCs)。用MTT法检测B细胞的增殖。FCM检测B细胞CD69+、CD86+表达情况,以及B细胞凋亡情况。结果MSCs对B细胞增殖有明显抑制作用,MSCs联合LEF后抑制作用更强。C组吸光值(OD值)为0.303±0.016,明显高于D组的0.250±0.013(P<0.01)。C组CD86+B细胞百分率较A组明显降低[(76.17±1.13)%vs(87.57±1.66)%](P<0.01)。D组CD86+B细胞百分率显著低于C组[(60.94±1.22)%vs(76.17±1.13)%](P<0.01)。MSCs和/或LEF对B细胞CD69+的表达和B细胞凋亡均无显著影响。结论MSCs联合LEF对BALB/c鼠B细胞有免疫负调节作用,但机制复杂,可能与抑制B细胞增殖、干预B细胞不同时期活化有关。
- 殷玉俊李晶裘影影汤郁尤海燕朱伟焦志军
- 关键词：间充质干细胞来氟米特B细胞免疫调节
- 沙利度胺对类风湿关节炎T淋巴细胞的免疫调节作用被引量：3
- 2008年
- 目的探讨沙利度胺（Thd）对类风湿关节炎（RA）患者外周血T淋巴细胞的免疫调节作用。方法在植物血凝素（PHA）刺激下，RA患者外周血T淋巴细胞与不同浓度的Thd（2．5、25、100、300、500μg/ml）共同培养。用四甲基噻唑蓝（MTT）比色法检测T淋巴细胞的增殖，用流式细胞术检测T淋巴细胞的凋亡和T淋巴细胞CDl52、CD28的表达情况，用Real—time聚合酶链反应（PCR）检测T淋巴细胞的白细胞介素（IL）-6、IL-10、肿瘤坏死因子（TNF）一QmRNA表达水平。结果在体外，与阴性对照组相比，500μg/ml Thd组显著抑制T淋巴细胞的增殖，促进T淋巴细胞早期凋亡，抑制T淋巴细胞CD3＋CD28＋表达，促进CD8＋CD152＊3K达，而≤300μg/ml，对T淋巴细胞未见明显影响。与对照组相比，（100～500）μg/ml剂量组可抑制T淋巴细胞IL-6、TNF—dmRNA表达，（2．5～500）μg/ml可促进IL-10mRNA的表达。结论Thd可能通过影响RA患者外周血T淋巴细胞增殖、早期凋亡、CD3＋CD28＋和CD8＋CD152＋表达，以及IL-6、IL-10、TNF—dmRNA表达，反转RA患者的免疫平衡失控。
- 严利文李晶裘影影尤海燕焦志军吴忠宋晓丽
- 关键词：沙利度胺关节炎类风湿T淋巴细胞免疫调节
- 间质干细胞对SLE患者外周血T细胞的免疫抑制作用被引量：1
- 2009年
- 目的探讨体外骨髓间质干细胞（MSC）对SLE患者外周血T淋巴细胞（T细胞）的免疫调节作用及可能机制。方法分离培养健康人骨髓MSC并鉴定其纯度，分离SLE患者外周血T细胞，在植物血凝素（PHA）刺激下，用不同比例的MSC与T细胞作用。分为T细胞、T细胞＋MSC1（T：MSC，=1：0．02）、T细胞＋MSC2（T：MSC2：1：0．2）3组。采用MTT法检测T细胞增殖，流式细胞仪检测T细胞CD152^＋和CD28^＋的表达，实时PCR测定IFN-γ和IL-6 mRNA的表达水平。结果MSC可明显抑制SLE患者T细胞增殖。T细胞增殖在T细胞组A值为0．765±0．056，T细胞＋MSCl组为0．484±0．032，T细胞＋MSC2组为0．308±0．025，与对照组相比，A值均明显降低（P〈0．05），T细胞＋MSC1组和T细胞＋MSC2组之间差异也有统计学意义（P〈0．05）。T细胞组CD28^＋细胞百分比为（74．73±3．74）％，T细胞＋MSC，组为（60．39±3．92）％，T细胞＋MSC2组为（45．05±3．46）％，与对照组相比均明显降低（P〈0．05），T细胞＋MSC1组和T细胞＋MSC2组之间差异也有统计学意义（P〈0．05）。MSC对T细胞CD152^＋表达无显著影响。MSC明显抑制T细胞IFN-γ、IL-6 mRNA表达（P〈0．05），并且随着MSC数量的增加，抑制作用增强。结论MSC对SLE患者T细胞有免疫抑制作用，可能与抑制T细胞增殖、抑制T细胞CD28^＋表达和抑制T细胞IFN-γ、IL-6 mRNA表达有关。
- 殷玉俊李晶裘影影汤郁尤海燕费晓明许文荣
- 关键词：间质干细胞T细胞免疫耐受
- 沙利度胺对系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞的免疫调节作用被引量：4
- 2010年
- 目的探讨沙利度胺（Thd）对系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血T淋巴细胞的免疫调节作用。方法用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测Thd对SLE患者外周血T淋巴细胞增殖的影响，用流式细胞术检测T淋巴细胞早期凋亡及CD3＋CD28＋和CD8＋CD152＋的表达，用实时定量聚合酶链反应（PCR）检测T淋巴细胞白细胞介素（IL）-6、IL-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α mRNA的表达，采用单因素方差分析进行统计学处理。结果在体外，500ug／ml Thd组CD3＋CD28＋表达为（48＋9）％显著低于对照组（57±9）％（P〈0．05）、500p．g／mlThd组T淋巴细胞凋亡率为（36＋8）％显著高于对照组（23±5）％（P〈0．05）；100、300、500拉g／mlThd组A570nm值分别为：0．39±0．05、0．34＋0．04、0．30±0．03较对照组（0．51±0．07）均有明显下降（P〈0．05）；100、500ug／mlThd组CD8＋CD152＋表达分别为（5．0±0．6）％、（7．8±0．7）％，明显高于对照组（4．2±0．6）％（P〈0．05）；500ug／ml Thd能抑制IL-6mRNA的表达，各剂量组均抑制IL-10、TNF-α mRNA表达。结论Thd可能通过抑制T淋巴细胞增殖、CD28的表达、IL-6、IL-10、TNF-α mRNA的表达和促进T淋巴细胞凋亡、CD152表达来下调SLE患者的免疫反应。
- 裘影影李晶尹筱莹严利文殷玉俊宋晓丽尤海燕吴玲
- 关键词：红斑狼疮神经免疫调节沙利度胺
- 间充质干细胞对狼疮肾炎T淋巴细胞的免疫调节作用
- 2009年
- 目的探讨间充质干细胞（MSCs）在体外对狼疮肾炎（LN）外周血T淋巴细胞的免疫调节作用。方法从人骨髓中分离培养MSCs，采用流式细胞仪（FCM）分析鉴定MSCs的纯度。在植物血凝素（PHA）刺激下，LN外周血T淋巴细胞与不同数量的MSCs共培养。分组：A组：T淋巴细胞；B组：MSCs1＋T淋巴细胞（MSCs1：T=1：5）；C组：MSCs2＋T淋巴细胞（MSCs2：T=1：20）；D组：MSCs3＋T淋巴细胞（MSCs3：T=1：100）。用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测各组T淋巴细胞的增殖情况，FCM分析各组T淋巴细胞CD28和CD152的表达及T淋巴细胞凋亡情况，实时定量反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测各组T淋巴细胞的干扰素（IFN）-γ、白细胞介素（IL）-10、转化生长因子（TGF）-β1基因的水平。结果在体外，MSCs对由PHA诱导的LNT淋巴细胞的增殖、凋亡均有抑制作用，且抑制作用与MSCs呈剂量依赖性。MSCs抑制T淋巴细胞CD28表达，对CD152的表达无明显影响。MSCs能促进LN患者T淋巴细胞TGF—β1基因的表达，抑制IL-10、IFN-γ基因的表达。结论MSCs可能通过抑制T淋巴细胞增殖、减少T淋巴细胞凋亡、抑制T淋巴细胞CD28表达和促进T淋巴细胞TGF—β，基因表达及抑制IL-10、IFN-1基因表达来下调LN的免疫反应。
- 裘影影李晶何建强殷玉俊汤郁尤海燕
- 关键词：狼疮肾炎间质干细胞T淋巴细胞
- 体外条件下人骨髓间充质干细胞与NZBWF1鼠T淋巴细胞的免疫调节
- 2009年
- 背景:近年研究发现系统性红斑狼疮患者的间充质干细胞存在异常,自体造血干细胞移植治疗系统性红斑狼疮复发率高,有学者提出系统性红斑狼疮不仅是造血干细胞病,也是间质干细胞病。目的:探讨人骨髓间充质干细胞在体外对NZBWF1鼠脾脏T淋巴细胞的免疫调节作用。设计、时间及地点:细胞共培养体外实验,于2008-03/09在江苏大学附属医院中心实验室完成。材料:健康人骨髓由江苏大学附属医院研究生自愿捐献。SPF级20周龄NZBWF1雌鼠9只,购自南京大学动物模式研究所。方法:Percoll密度梯度离心法分离培养人骨髓间充质干细胞,取P3代细胞用于实验。20周龄NZBWF1小鼠适应性饲养至24周龄时,无菌分离脾淋巴细胞,在刀豆球蛋白A刺激下,将T淋巴细胞与骨髓间充质干细胞分别以不同比例(1:0.01,1:0.02,1:0.1)共培养72h,并设立对照组。主要观察指标:MTT法检测T淋巴细胞增殖,流式细胞仪检测T淋巴细胞凋亡和CD69,CD28表达,实时荧光定量PCR检测T淋巴细胞白细胞介素10、干扰素γmRNA水平。结果:与对照组比较,在体外人骨髓间充质干细胞能抑制NZBWF1鼠T淋巴细胞的增殖,且呈剂量依赖性(P<0.05)。与对照组比较,T淋巴细胞与骨髓间充质干细胞比例为1:0.02和1:0.1时,骨髓间充质干细胞可抑制T淋巴细胞的凋亡,并促进T淋巴细胞干扰素γmRNA表达,抑制白细胞介素10mRNA表达;T淋巴细胞与骨髓间充质干细胞比例为1:0.01时,T淋巴细胞凋亡情况和干扰素γ、白细胞介素10mRNA表达无明显差异(P>0.05)。结论:人骨髓间充质干细胞体外在一定比例下可能通过抑制NZBWF1鼠T淋巴细胞的增殖和凋亡、干预Th1/Th2细胞因子mRNA表达,继而下调T淋巴细胞的免疫功能。
- 宋晓丽李晶裘影影殷玉俊尤海燕芮金兵汤郁
- 关键词：间充质干细胞红斑狼疮T淋巴细胞免疫调节
- 来氟米特活性代谢产物A771726对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨来氟米特(leflunomide,LEF)在体外对人外周血T淋巴细胞的免疫调节作用。方法:在植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)刺激下,人外周血淋巴细胞与不同剂量的LEF(5,15,45μg/ml)共培养。检测各组T淋巴细胞的增殖、凋亡情况,分析各组T淋巴细胞免疫表型CD152,CD28的表达以及各组T淋巴细胞的IFN-γ,IL-10,TGF-β1 mRNA水平。结果:在体外,LEF对由PHA诱导的T淋巴细胞的增殖、凋亡均有抑制作用,且抑制作用与LEF呈剂量依赖性。LEF对T淋巴细胞CD152,CD28的表达无明显影响。LEF能促进IL-10,TGF-β1 mRNA的表达,抑制IFN-γmRNA的表达。结论:LEF可能通过抑制T淋巴细胞增殖、减少T淋巴细胞凋亡、促进T淋巴细胞IL-10、TGF-β1 mRNA表达及抑制IFN-γmRNA表达来下调免疫反应。
- 裘影影李晶汤郁尤海燕朱伟焦志军
- 关键词：来氟米特T淋巴细胞免疫调节
