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猪、鸡致病性大肠菌不同菌株质粒DNA及某些微生物学特性比较被引量：1: 2005年; 对河南部分地区鸡和猪的5株致病性大肠杆菌进行了血清学试验、药物敏感试验、生化试验,并提取质粒DNA进行琼脂糖凝胶电泳,以比较不同菌株之间的差异。结果表明,耐药性与质粒电泳图谱有一定关系;耐药性强的菌株的提取DNA进行电泳后未见质粒条带,耐药性差的菌株电泳后质粒条带清晰。生化反应相近的菌株其质粒电泳图谱也相似。本研究为细菌的分类及本病的防制方法提供了新思路。; 臧为民常洪涛许兰菊刘红英王瑞王川庆迪丽拜尔.阿木提王相根; 关键词：大肠杆菌耐药性生化特性质粒DNA

鸡法氏囊提取物的组分分析及其活性测定被引量：2: 2002年; 应用薄层层析技术分析鸡法氏囊提取物的组分 ,并用体内和体外免疫试验测定其活性。实验结果表明 ,相对分子质量为 10 0 0以下的鸡法氏囊提取物中共有 9种成分的氨基酸或小肽 ,其中第 3组分与囊素标准品具有相同的迁移率(0 6 9)。适当浓度的囊素和法氏囊提取物均能促进杂交瘤细胞分泌抗体 ,与对照组相比差异显著 (P <0 0 5 ) ;2 5mg·mL-1提取物具有相当于 1μg·mL-1囊素的促杂交瘤细胞抗体分泌活性。法氏囊提取物与猪瘟疫苗同时注射 ,可显著提高接种猪产生特异性抗体的能力。; 缪德年樊生超姚惠娟苏小运陈溥言; 关键词：活性测定

信号转导抑制剂对囊素刺激杂交瘤细胞抗体分泌及其mRNA表达的影响被引量：7: 2003年; 以杂交瘤细胞为模型 ,在培养液中加入不同的信号转导抑制剂和囊素 ,用间接ELISA法测定抗体分泌水平 ,用定量RT PCR法检测抗体mRNA的表达水平。结果表明 ,加入Gα 蛋白选择性抑制剂NF 0 2 3、蛋白激酶C抑制剂GF10 92 0 3X、磷脂酰肌醇 3激酶抑制剂heparin、Ca2 + /calmodulin依赖蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN 6 2、磷脂酶C抑制剂U 7312 2和蛋白激酶G抑制剂后 ,囊素对杂交瘤细胞抗体分泌速度的影响明显 (P <0 0 1)。而加入蛋白激酶A抑制剂 4 Cyano 3 M thylisoquinoline、酪氨酸蛋白激酶抑制剂 genistein和丝裂原活化的蛋白激酶抑制剂PD 980 5 9后 ,囊素对杂交瘤细胞抗体分泌速度的影响不明显 (P >0 0 5 ) ,这 3种抑制剂对杂交瘤细胞抗体分泌速度的抑制率分别为 74 5 5 % ,91 13%和80 6 9%。加入 4 Cyano 3 M thylisoquinoline、genistein和PD 980 5 9后 ,囊素处理组与对照组γ1mRNA的表达水平差异不显著 (P >0 0 5 ) ,说明这 3种抑制剂阻断了囊素刺激的杂交瘤细胞抗体mRNA的表达。以上结果表明 ,蛋白激酶A、酪氨酸蛋白激酶和丝裂原活化的蛋白激酶参与了囊素在杂交瘤细胞中的信号转导。; 缪德年苏小运姚惠娟樊生超陈溥言; 关键词：杂交瘤细胞囊素间接ELISA法抗体分泌 MRNA表达生物活性因子

囊素对杂交瘤细胞内第二信使物质的影响被引量：3: 2004年; 以分泌抗人IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞为对象 ,通过免疫试验测定了囊素对其第二信使物质的影响。结果表明 ,囊素处理对杂交瘤细胞内cAMP浓度的影响不明显 (P >0 .0 5 ) ,而对cGMP浓度的影响与囊素作用的时间和剂量有关。分别用 5 0 μg mL和 5 0 0 μg mL囊素处理 5min后 ,两组细胞cGMP浓度均显著下降(P <0 .0 5 ) ,导致cAMP cGMP值明显上升 (P <0 .0 5 ) ,10min后 ,前者的cGMP浓度不再变化 ,而后者的cGMP浓度继续下降。提示囊素可能以cGMP浓度或cAMP cGMP值的变化为介导而起作用。; 缪德年苏小运樊生超姚惠娟陈溥言; 关键词：囊素杂交瘤细胞 CGMP CAMP

囊素对哺乳动物免疫促进作用的研究 Ⅱ.不同剂量囊素对猪瘟疫苗接种猪抗体水平的影响被引量：7: 2004年; 囊素是一种新型的免疫活性物质 ,为了研究其对哺乳动物的免疫促进作用 ,探索正确的使用方法。作者采用不同剂量 (0 .0 3 ,0 .0 6,0 .0 9m L/ kg)囊素与猪瘟疫苗同时接种 3 0日龄仔猪进行试验。在接种后 2周内 ,试验猪没有出现异常临床反应 ,表明囊素与猪瘟疫苗同时使用无不良影响。在接种后 6周内 ,每隔一周检测各组猪瘟抗体水平。结果表明 :囊素按 0 .0 6m L /kg和 0 .0 9m L/ kg剂量与猪瘟疫苗同时使用组其抗体水平明显高于对照组。通过抗体水平比较及统计学分析 ,表明囊素最佳使用剂量为0 .0 6m L/ kg。; 杨俊兴臧为民王川庆1张改平乔宏兴刘红英巩霞罗俊牛明福皇甫和平常洪涛陈溥言; 关键词：囊素哺乳动物免疫促进作用疫苗接种抗体免疫增强剂

囊素与杂交瘤细胞的结合及结合肽的鉴定被引量：2: 2010年; 【目的】囊素(BS)是禽类和哺乳动物中具有重要免疫调节功能的多肽,能有效促进杂交瘤细胞抗体的分泌,为探讨杂交瘤细胞是否有BS受体分子的表达。【方法和结果】本研究采用荧光显微镜、激光扫描共聚焦显微镜和流式细胞仪分析的方法,检测BS与杂交瘤细胞的结合特性。实验结果证实BS与杂交瘤细胞的结合具有特异性、趋饱和性和可逆性。为进一步分析BS与杂交瘤细胞的结合位点,实验中以BS分子作为靶标,对噬菌体随机12肽库进行了4轮亲和筛选,ELISA和竞争抑制试验显示2个噬菌体克隆能特异性与BS结合。对阳性噬菌体克隆进行序列测定分析表明,其插入的12肽分别为:ACTKHLCLLQPL、MSCNDTLCLLPN,保守序列为LCLL。体外实验表明,2个人工合成的12均都能在一定程度上抑制BS与杂交瘤细胞的特异性结合。【结论】本研究表明杂交瘤细胞具有BS结合的受体,这为进一步研究BS促杂交瘤细胞抗体分泌的信号传导通路奠定了基础。; 王臣赵战勤牛明福张春杰程相朝陈溥言; 关键词：囊素杂交瘤细胞受体结合肽肽库

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国家自然科学基金(30170702)