国家科技基础条件平台建设计划(2005DKA21102)
- 作品数：15 被引量：24H指数：3
- 相关作者：杨福合邢秀梅吴琼荣敏王士勇更多>>
- 相关机构：中国农业科学院特产研究所吉林农业科技学院延边大学更多>>
- 发文基金：国家科技基础条件平台建设计划国家科技支撑计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 中国环颈雉脂蛋白酯酶基因cDNA序列测定及组织表达分析
- 运用RT-PCR方法从中国环颈雉的总RNA中克隆了脂蛋白酯酶(LPL)基因的cDNA部分序列,然后运用Real-time PCR法检测了LPL基因在中国环颈雉不同发育阶段、不同组织及不同品种间的表达情况。结果表明,中国环...
- 吴琼杨福合邢秀梅荣敏章秀婷
- 关键词：脂蛋白酯酶基因克隆
- 文献传递
- 甘肃马鹿myogenin基因克隆、序列结构特征预测及其分子系统进化分析被引量：4
- 2013年
- 根据GenBank中公布的绵羊、水牛、猪、小鼠及人的肌细胞生成素基因(myogenin)DNA序列,设计了3对引物,采用PCR扩增和克隆技术,首次从甘肃马鹿血液基因组中获得了myogenin基因序列,并利用生物信息学方法对甘肃马鹿该基因核苷酸及其编码氨基酸序列的结构特征进行初步预测和分析,进一步基于该基因氨基酸序列构建了15个物种的分子系统进化树。结果表明,获得的甘肃马鹿myogenin基因序列大小为3168bp(GenBank登录号:FJ746497),包括3个外显子、2个内含子、部分5'UTR和3'UTR,其序列包括1个684bp的开放阅读框,编码227个氨基酸,myogenin蛋白理论分子质量为25.2493kDa,PI为5.68,不稳定系数是66.22,属于酸性不稳定蛋白质。进一步分析发现,该序列不含有信号肽和跨膜区域,含有11个广泛磷酸化位点,第1～136个氨基酸为甘肃马鹿myogenin基因bHLH保守结构功能域,二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主。序列相似性及分子系统进化分析显示,甘肃马鹿myogenin基因与反刍动物山羊、绵羊和水牛的亲缘关系最近。甘肃马鹿myogenin基因的克隆及序列结构特征的生物信息学预测为进一步探讨鹿科动物肌肉生长发育的分子调控机理奠定了理论基础。
- 宋兴超刘汇涛岳志刚杨颖邢秀梅杨福合
- 关键词：甘肃马鹿肌细胞生成素基因克隆系统进化树
- 中国环颈雉心脏型脂肪酸结合蛋白基因的cDNA克隆及序列分析
- 2012年
- 运用RT-PCR技术,克隆了中国环颈雉心脏型脂肪酸结合蛋白基因的序列,并对其进行了测序及生物信息学分析。结果表明:中国环颈雉H-FABP基因cDNA序列长为402bp,开放阅读框为399bp,编码132个氨基酸,推测的蛋白相对分子质量为14.64KD,等电点为6.30。中国环颈雉H-FABP基因与已报道的鸡、鸭、珍珠鸡等禽类动物的核苷酸和编码氨基酸序列具有很高的相似性。
- 吴琼杨福合邢秀梅荣敏
- 关键词：心脏型脂肪酸结合蛋白克隆
- 梅花鹿-牛异种体细胞核移植操作方法的研究
- 本研究旨在对梅花鹿-牛异种体细胞核移植(Interspecies Somatic Cell Nuclear Transfer,ISCNT)的显微操作方法进行系统研究,从而优化其操作过程。以梅花鹿耳皮肤成纤维细胞为供核细胞...
- 王士勇郑军军杨月春刘宗岳于淼杨福合
- 关键词：异种体细胞核移植挤压法
- 文献传递
- 梅花鹿-牛异种体细胞核移植操作方法的研究
- 2014年
- 本研究旨在对梅花鹿-牛异种体细胞核移植(Interspecies somatic cell nuclear transfer,ISCNT)的显微操作方法进行系统研究,从而优化其操作过程。以梅花鹿耳皮肤成纤维细胞为供核细胞,牛MⅡ期卵母细胞为受体,分别采用盲吸法、挤压法和脱羰秋水仙碱(Demecoline,DEME)化学辅助的方法去核,带下注射(Perivitelline microin—jection,PM)、Pizeo破膜细胞胞质内注射(Break—membrane-cell intracytoplasmic microinjection,BMCIM)和全细胞胞质内注射(Whole-cell intracytoplasmic microinjection,WCIM)的方法注核,带下注核的卵母细胞电融合后化学激活,其余方法注核后直接化学激活,重组胚用CR1aa培养液体外培养。结果表明:(1)DEME辅助法去核率最高,挤压法最低,3种去核方法的去核率差异显著(P<0.05),去核时间差异不显著(P>0.05);(2)PM组和WCIM组注核成功率分别为100.0%和94.8%,注核时间分别为31.0和35.1 s,显著低于BMCIM法(P<0.05),但是注核成功率显著高于BMCIM法(P<0.05),而且两者差异不显著(P>0.05);(3)BMCIM组和WCIM组的激活率均显著高于PM组(P<0.05),其中一步法的BMCIM组最高,一步法和两步法在激活率、卵裂率和囊胚率方面均无显著差异(P>0.05)。结果提示:DEME辅助去核、Pizeo辅助破膜胞质内注射的一步法显微操作可有效用于梅花鹿-牛的异种体细胞核移植的研究。
- 王士勇郑军军杨月春刘宗岳于淼杨福合
- 关键词：异种体细胞核移植挤压法
- 中国环颈雉A-FABP基因SNPs检测及其与屠宰性状和肌内脂肪含量相关性分析被引量：6
- 2014年
- 本研究旨在探讨中国环颈雉A-FABP基因的多态性位点。选用成年中国环颈雉为材料,利用PCR-SSCP结合测序技术进行序列多态性位点分析,同时分析了SNP位点与屠宰性状和肌内脂肪含量的相关性。结果表明:在中国环颈雉群体中,A-FABP基因检测到C-1106 T、C 621 G、C 51 T和G 1223 A 4个SNPs位点的多态性,构建21种单倍型组合,3个多态位点对屠宰性状存在显著性差异,H9H11和H1H4单倍型组合能提高屠宰性状和肌内脂肪含量。中国环颈雉A-FABP基因4个多态位点与屠体性状显著相关,具有选育意义。
- 吴琼邢秀梅徐佳萍荣敏杨福合
- 关键词：屠宰性状肌内脂肪
- 鹿卵母细胞体外成熟研究进展被引量：1
- 2013年
- 卵母细胞体外成熟培养作为现代胚胎生物工程的重要组成部分,是性别控制、体外受精、核移植和转基因等技术成功的前提和关键。本文就卵母细胞来源、培养液成分、培养时间、温度和气相环境等因素对鹿卵母细胞体外成熟的影响进行综述。
- 郑军军王士勇杨月春于淼杨福合邢秀梅
- 关键词：体外培养影响因素
- 水貂成骨细胞的原代培养及其鉴定
- 2009年
- 为探讨原代成年水貂成骨细胞的培养方法,建立细胞库。无菌条件下取7月龄成年水貂肋骨,剪碎,用胰酶、胶原酶消化后接种于培养皿内培养,获得原代细胞。通过细胞形态学观察及碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组化、钙结节染色进行鉴定。结果,所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,碱性磷酸酶染色、骨钙素染色、钙结节染色均呈阳性。证明培养出的细胞是成骨细胞。
- 荣敏许尚忠褚文辉王桂武吴琼邢秀梅杨福合
- 关键词：成骨细胞原代培养水貂
- 甘肃马鹿MyoG基因5′UTR单核苷酸多态性检测及其序列变异分析被引量：6
- 2010年
- 为了初步探索肌细胞生成素(MyoG)基因在鹿科动物上的遗传多态性,试验采集56头甘肃马鹿的血液样品,采用PCR-SSCP和克隆测序的方法对MyoG基因(GenBank登录号:FJ746497)5′UTR部分序列进行了单核苷酸多态性(SNPs)检测及序列变异分析。结果表明:①引物P1的PCR扩增片段存在多态性,经克隆测序分析,在5′UTR-237 bp处存在G→A的转换变异,该位点表现为AA、AB和BB 3种基因型,由A和B 2个等位基因控制;对基因型、等位基因频率及群体遗传多态性分析结果发现,AA基因型频率最高,A基因为优势等位基因,该位点多态信息含量(PIC=0.194)为低度多态(PIC<0.25);经TFSEARCH 1.3分析软件预测发现,该变异可能减少了1个Sp1转录因子。②引物2的PCR扩增片段检测到1个SNP多态位点(—46 bp,G→A),表现为CC、CD和DD 3种基因型,基因型频率分布为CC>CD>DD,该位点多态信息含量(PIC=0.266)为中度多态(0.25
- 宋兴超杨福合邢秀梅刘汇涛岳志刚
- 关键词：甘肃马鹿
- 利用冷冻切片法与石蜡切片法对水貂组织切片进行优化研究被引量：3
- 2011年
- 应用冷冻切片法和石蜡包埋切片法,对水貂体组织进行切片后HE染色观察;并在冷冻切片方法中应用3种不同的固定剂,对固定剂的固定效果进行对比分析。结果表明,石蜡切片法更适合于脑组织,而冰冻切片法更适合于皮肤组织。冰冻切片方法中3种固定剂的固定效果比较,固定剂A(无水乙醇80 mL、甲醛10%10 mL、冰醋酸10 mL)优于固定剂C(10%的福尔马林溶液)与固定剂B(甲醛40%15mL、无水乙醇85mL)。
- 梁东杨福合邢秀梅吴琼刘汇涛任二军
- 关键词：水貂固定剂大脑皮肤组织切片
