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副猪嗜血杆菌荧光定量PCR检测技术的建立与应用被引量：18: 2010年; 根据GenBank中的副猪嗜血杆菌(HPS)的infB基因的序列(DQ781808.1),利用分子生物学软件Premier 5.0设计一对特异性引物,建立基于SYBR Green I荧光定量PCR检测HPS的技术。试验采用煮沸法从HPS培养物中提取DNA,进行PCR扩增。将鉴定正确的目的基因片段克隆入pMD18-T载体中,转化大肠杆菌DH5α,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为阳性标准品。结果表明,该方法对HPS具有良好的特异性,不与其它猪源细菌发生交叉反应,其敏感性比常规PCR高100倍,而且非常稳定,批间与批内重复试验变异系数均小于2.5%。临床应用表明本方法的建立实现了对HPS的快速诊断和定量的检测。; 于江吴家强张玉玉王兆李俊丁鹏李坤刘洋张金强徐绍建刘少宁周顺王文志王金宝; 关键词：副猪嗜血杆菌 SYBR I 荧光定量PCR

仔猪渗出性皮炎病原的分离鉴定及耐药性分析被引量：8: 2011年; 为消除渗出性皮炎对仔猪的危害,对发生该病的病死仔猪进行细菌分离培养。通过革兰氏染色、生化试验与16SrDNA基因序列同源性分析鉴定:分离出的两株细菌为猪葡萄球菌和松鼠葡萄球菌。猪葡萄球菌和松鼠葡萄球菌能分别产生表皮脱落毒素ExhB和ExhC,表明这两株葡萄球菌都有致病力。猪葡萄球菌和松鼠葡萄球菌均对头孢菌素Ⅰ类(先锋霉素Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ)、头孢噻肟和丁胺卡那敏感,在临床上可选择这些药物预防和治疗该病。; 张玉玉吴家强郭立辉王兴东安利国王金宝; 关键词：仔猪渗出性皮炎猪葡萄球菌

PRRSV分离株Nsp2基因和ORF5基因的遗传变异分析被引量：6: 2011年; 为了解山东省PRRSV流行毒株的遗传变异情况和分子流行病学背景,对2007~2009年分离到的14株山东省内的PRRSV流行毒株进行了Nsp2和ORF5基因序列的测定和分析。结果显示,与参考毒株JXA1相比,14株PRRSV Nsp2与ORF5基因的核苷酸同源性分别达到96.1%~99.8%和98.0%~99.8%,氨基酸序列同源性分别达到92.9%~100%和97.5%~99.5%。序列分析结果表明,14株毒株在Nsp2蛋白内部均存在编码30个氨基酸的碱基对的不连续缺失;ORF5基因编码的GP5蛋白不存在缺失,但存在点突变。遗传进化分析表明,07年分离毒株JQ与参考毒株JXA1亲缘关系很近;09年分离的12株PRRSV,2株仍与国内2006~2007年间的分离株在同一分支,9株已经处在不同分支,1株单独处在一个分支。2007~2009年山东地区流行的PRRSV分离株具有年度特征,无明显的地域特征。; 王剑非孙建全张金强迟小伟刘杰丛晓燕时建立李俊吴家强; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2基因 ORF5基因

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山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2009BSC02016)