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国家科技重大专项(2008ZX10002-019)

作品数：5 被引量：20H指数：4
相关作者：魏来张恒辉谢兴旺陈红松王雪艳更多>>
相关机构：北京大学北京市理化分析测试中心首都医科大学附属北京地坛医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生

主题

  • 4篇细胞
  • 4篇肝癌
  • 3篇肿瘤
  • 2篇肝细胞
  • 2篇肝肿瘤
  • 1篇调节性
  • 1篇调节性T细胞
  • 1篇多态
  • 1篇多态性
  • 1篇多药
  • 1篇多药耐药
  • 1篇乙型
  • 1篇原发性
  • 1篇原发性肝细胞
  • 1篇原发性肝细胞...
  • 1篇体外
  • 1篇体外实验
  • 1篇体外实验研究
  • 1篇肿瘤复发
  • 1篇肿瘤免疫

机构

  • 3篇北京大学
  • 1篇桂林医学院附...
  • 1篇江苏大学
  • 1篇中国科学院
  • 1篇中山大学附属...
  • 1篇中国科学院研...
  • 1篇北京市理化分...
  • 1篇首都医科大学...

作者

  • 3篇陈红松
  • 3篇谢兴旺
  • 3篇张恒辉
  • 3篇魏来
  • 2篇费然
  • 2篇王雪艳
  • 1篇李国力
  • 1篇李楠
  • 1篇彭建新
  • 1篇徐小溪
  • 1篇罗昊
  • 1篇陈衍辉
  • 1篇孙广炜
  • 1篇廖维甲
  • 1篇赵杨静
  • 1篇梁力建
  • 1篇王莉
  • 1篇侯洵
  • 1篇孙秀云
  • 1篇梅铭惠

传媒

  • 1篇北京大学学报...
  • 1篇中华预防医学...
  • 1篇中华消化外科...
  • 1篇中华实验和临...
  • 1篇中国组织工程...

年份

  • 1篇2015
  • 2篇2012
  • 1篇2011
  • 1篇2009
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
Foxp3 siRNA特异性抑制肝癌患者调节性T细胞进而增强抗肿瘤免疫应答的体外实验研究被引量：7
2009年
目的:设计、合成Foxp3 siRNA序列,并体外干扰肝癌患者调节性T细胞(regulatory T cells,Treg),评价Foxp3 siRNA干扰后对Treg表型及抑制功能的影响以及是否能上调肝癌患者抗肿瘤免疫应答的能力。方法:设计并化学合成Foxp3 siRNA,将Foxp3 siRNA通过脂质体转染的方式体外转染Treg。通过实时定量PCR以及流式细胞术分析Foxp3 siRNA对Treg中Foxp3表达的抑制效能,并通过流式细胞术评价Foxp3 siRNA干扰后对Treg表面分子CD127、CTLA-4、GITR的表达以及对CD4+CD25-T细胞的抑制作用。通过酶联免疫斑点法(enzyme-linked im-munospot assay,Elispot)以及五聚体(pentamer)分析法评价Foxp3 siRNA干扰肝癌患者Treg后对经肿瘤特异性抗原NY-ESO-1b诱导的肿瘤特异性免疫应答的影响。结果:通过Foxp3 siRNA的转染可实现对Treg Foxp3表达的部分沉默,并且上调Treg表面CD127分子的表达,下调CTLA-4和GITR的表达。肝癌患者Treg Foxp3表达的沉默可下调Foxp3+Treg对CD4+CD25-T效应性细胞增殖抑制的能力。通过五聚体法及Elispot法检测发现,Foxp3 siRNA以及siRNA-control转染组NY-ESO-1157-165特异性的细胞毒T细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的数量分别为0.21%±0.17%和0.57%±0.39%(P<0.05),与siRNA-control进行干扰的肝癌患者组相比,Foxp3 siRNA干扰后的Treg与特异性CTL共培养后,肿瘤特异性CTL数量及分泌的干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的数量显著上调(132±55vs27±11,P<0.05)。结论:通过Foxp3 siRNA对于肝癌患者Treg中Foxp3表达的沉默,可在体外干扰肝癌患者Treg免疫抑制功能,继而增强肝癌患者经肿瘤抗原诱导的CTL抗肿瘤免疫应答。
张恒辉费然谢兴旺王莉罗昊王雪艳魏来陈红松
微囊化培养对肿瘤细胞耐药性的影响被引量：1
2012年
背景:在微胶囊微环境中肿瘤细胞表现出更接近在体肿瘤的特性。目的:考察微囊化培养对肿瘤细胞耐药性的影响。方法:将平面培养至对数生长期的HepG2细胞微囊化培养15d,再次包封于微胶囊内进行微囊化培养,如此反复3次。回收每次微囊化培养的细胞,并通过显微镜、流式细胞仪、CCK-8和Real Time PCR检测细胞形态、黏附能力、增殖能力、细胞周期、药物敏感性和耐药相关基因的变化。结果与结论:微囊化培养不同次数的细胞再次进行平面培养,其形态、黏附能力、增殖能力和细胞周期均无显著变化。经过微囊化培养后再次进行平面培养,肿瘤细胞的耐药性随着微囊化培养次数的增加而逐渐下降,且耐药性降低的主要原因是耐药相关基因表达下调。提示只有在微胶囊这一独特微环境中肿瘤细胞才能保持高的耐药性,一旦回归平面培养,这一特性便会消失,肿瘤细胞只有在微囊化环境中培养才能表现出类似在体的耐药性。
李楠徐小溪孙广炜张英王为马小军
关键词：微胶囊HEPG2细胞微环境多药耐药
应用HBV-Alu-PCR研究肝癌细胞株中乙型肝炎病毒整合被引量：4
2015年
目的 探讨常见肝癌细胞株中整合的乙型肝炎病毒（HBV）序列和整合位点.方法 分别将来源于HBV感染者的肝癌细胞株（MHCC97H、MHCC97L、MHCCLM3和PLC/PRF/5）,稳定转染HBV的肝癌细胞株（HepG2.2.15、HepAD38和DE19）,和无HBV感染者来源的肝癌细胞株（HepG2、HuH-7）培养72 h,检测培养上清中乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒E抗原（HBeAg）及HBV DNA滴度.采用HBV-Alu-PCR方法,扩增肝癌细胞株中整合的HBV基因X/C/S片段及其侧翼的人基因组DNA片段,对扩增片段进行测序确定HBV整合在人类染色体的精确位置,并用生物信息学分析确定其上下游基因.结果 MHCC97H、MHCC97L和MHCCLM3未检出HBsAg和HBeAg,但HBV DNA滴度为2.00x105-4.00 x 105IU/ml;HepG2.2.15、HepAD38、DE19和PLC/PRF/5 HBsAg阳性,且HBV DNA滴度〉 5.00 x105IU/ml,其中HepG2.2.15、HepAD38HBeAg阳性;HepG2、HuH-7 HBsAg、HBeAg和HBV DNA均低于检测下限.除HepG2和HuH-7未检测到整合外,其余细胞株中可检测到1个或多个整合的不同HBV亚基因组片段：HepG2.2.15检测到5个HBx和HBc整合片段,HepAD38和PLC/PRF/5各检测到2个HBx整合片段,DE19检测到一个HBc整合片段.3个MHCC97的衍生细胞株：MHCC97L（低转移潜能肝癌细胞）、MHCC97H（高转移潜能肝癌细胞）和MHCCLM3（MHCC97H肺转移肝癌细胞）检测到完全相同的HBc片段整合在16q13上IRX3和IRX5基因之间的非编码区.此外,各细胞株HBV整合位点上下游的基因主要包括肿瘤相关基因,核糖体蛋白编码基因和钙信号相关基因.结论 HBV感染者来源和稳定转染HBV的肝癌细胞株存在HBV整合;HBV基因X/C片段比S片段有更高的整合频率;同一个克隆来源的肝癌细胞株的HBV整合位点稳定,提示HBV整合分析可能对肝细胞癌原发灶和转移灶癌细胞克隆来源的鉴定提供参考.
赵杨静李国力张恒辉谢兴旺贺改霞闫琳琳李明珍魏来曾辉邵启祥陈红松
关键词：肝炎病毒乙型肝癌细胞株病毒整合
DNA甲基转移酶在肝癌中的表达及其临床意义被引量：4
2011年
目的 探讨DNA甲基转移酶（DNMTs）在肝癌中的表达及其临床意义.方法 收集2007年7月至2008年4月中山大学附属第一医院行根治性切除的50例肝癌患者的肝癌组织、癌旁组织、肝硬化组织和慢性肝炎组织.采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测肝癌组织及癌旁组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA与蛋白表达水平,采用配对t检验和Mann-Whitney U检验比较肝癌组织与癌旁组织,肝硬化组织与慢性肝炎组织DNMTs mRNA表达的差异,x2检验和Fisher确切概率法分析肝癌组织DNMTs蛋白表达与临床病理因素的相关性,Kaplan-Meier法分析患者无瘤生存时间,不同患者无瘤生存时间的比较采用Log-rank检验.结果 肝癌组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA的表达水平分别为癌旁组织的2.57、2.29和4.86倍（t=3.94,2.72,4.06,P＜0.05）.肝癌组织中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA的表达分别是肝硬化组织和慢性肝炎组织的2.38、2.14、4.66倍和6.12、4.58、12.99倍.DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA在肝癌组织的表达显著高于其在肝硬化组织和慢性肝炎组织中的表达（U=587.5、730.0、562.5,65.5、64.5、71.0,P＜0.05）.DNMT1蛋白表达与肿瘤大小、数目、有无血管侵犯、TNM分期有关（x2=5.24,4.08,4.08,14.13,P＜0.05）;DNMT3a蛋白表达与肿瘤大小、数目、TNM分期有关（x2=4.08,5.95,4.08,P＜0.05）.DNMT1和DNMT3a低表达者平均肿瘤复发时间分别为9.4个月和8.7个月,显著长于高表达者的5.0个月和3.2个月,两者比较,差异有统计学意义（x2=3.89,9.91,P＜0.05）.结论 DNMTs在肝癌发生、发展中起重要作用;DNMT1与DNMT3a高表达与肿瘤切除术后复发密切相关,可望成为肝癌预后的重要预测因子.
彭建新殷晓煜侯洵王建恩梁力建
关键词：肝肿瘤DNA甲基转移酶肿瘤复发
白细胞介素-28B基因多态性与原发性肝细胞肝癌的关系被引量：4
2012年
目的探讨白细胞介素-28B（IL-28B）基因不同位点SNP与原发性肝细胞肝癌的关系。方法以2001年i1月至2010年4月就诊于桂林某医院和北京某医院的肝癌患者作为病例组，共300例，其中有139例患者具有完整的临床追踪资料；选取2009--2010年于上述两所医院中进行健康体检，且无肿瘤及慢性乙型肝炎疾病史者作为对照组，共310名；研究对象均为汉族，无年龄、性别限制。经知情同意，每名研究对象采集外周血2ml，采用质谱分析法对研究对象IL-28B基因rs12972991、rs8099917、rs12979860和rs4803223等位点SNP进行分析。结果病例组rs12972991位点c等位基因、rs8099917位点G等位基因和rs4803223位点G等位基因频率分别是6．7％（40／598）、7．9％（47／598）、10．0％（59／588）；对照组分别为2．9％（18／618）、4．1％（25／616）、3．6％（21／608），病例组均高于对照组，差异有统计学意义（X2值分别为9．542、7．858、20．736，P值均〈0．05）；携带上述等位基因可增加原发性肝细胞肝癌的患病风险[OR（95％CI）值分别为1．67（1．13～2．46）、1．49（1．08～2．06）、2．91（1．79～4．72）]。病例组rs12972991位点AC＋CC基因型、rs8099917位点GT＋GG基因型和rs4803223位点GA＋GG基因型频率分别为13．0％（39／299）、14．7％（44／299）、19．0％（56／296）；对照组分别为5．8％（18／309）、8．1％（25／308）、6，6％（20／304），病例组均高于对照组，差异有统计学意义（X2值分别为9．319、6．557、20．948，P值均〈0．05）；携带上述基因型可增加原发性肝细胞肝癌的患病风险[OR（95％C／）值分别为2．24（1．31—3．83）、1．81（1．14～2．88）、2．90（1．78～4．70）]。对患者临床资料分析发现，出现门静脉癌栓的患者rs4803223位点GA＋GG基因型频率为50．0％（13／26），高于AA基因型频率[21．1％（23／109）]�
王艳张恒辉陈衍辉谢兴旺廖维甲覃理灵孙秀云费然王雪艳魏来陈红松梅铭惠
关键词：肝肿瘤白细胞介素类
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