国家高技术研究发展计划(2007AA10Z188)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：邵敏李林刘凤权王光林拥军更多>>
- 相关机构：南京农业大学华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 水稻启动子OsN1p的克隆与功能分析被引量：2
- 2012年
- 将OsN1基因上游881 bp启动子(OsN1p)序列取代pBI121中gus基因上游的35S启动子,构建植物表达载体pBIN1p,经农杆菌介导转化水稻品种‘日本晴’,获得转基因植株。GUS组织化学染色结果表明,由该启动子驱动的gus基因能在愈伤组织中较低水平地表达;稻瘟病菌接种转基因植株24 h后,GUS活性为未接种前的4.2倍;5 mmol.L-1水杨酸(SA)和0.5 mmol.L-1茉莉酸甲酯(MeJA)分别喷施转基因植株叶面6 h后,GUS活性分别为处理前的5.9和2.4倍。表明,OsN1p启动子具有启动活性,同时明显具有受稻瘟病菌、SA和MeJA诱导表达的特性。
- 吴智丹王光郭玲李林刘凤权邵敏
- 关键词：转基因水稻GUS基因稻瘟病菌
- 水稻糖基水解酶基因GH27启动子克隆及初步分析
- 2010年
- 通过生物信息学方法找到水稻中与拟南芥β-葡糖苷酶类基因同源的糖基水解酶基因GH27。Northern检测结果显示该基因在衰老晚期的叶片中高量表达。利用PCR技术克隆GH27基因的启动子(PGH27)序列,构建启动子PGH27与报告基因GUS融合基因的表达载体PGH27:GUS,并通过农杆菌介导法转化水稻品种中花11,GUS染色结果表明该启动子PGH27可以有效地驱动GUS基因在转基因愈伤组织和水稻植株老叶中表达。
- 刘莉赵丽娜林拥军
- 关键词：水稻启动子衰老
- 水稻OsN1基因5'端启动子不同区域序列分析
- 2012年
- 为了研究水稻OsN1基因启动子(OsN1p)的表达调控机理,用OsN1基因ATG(ATG中的A为0)上游-1 089 bp、-881 bp、-489 bp和-245 bp的启动子序列分别取代pBI121中的35S启动子,构建植物表达载体pBIN1.1p、pBIN0.9p、pBIN0.5p和pBIN0.2p。将这些表达载体经农杆菌介导转化水稻日本晴,获得转基因植株。对启动子的表达特点和启动活性进行了分析,结果表明,由-1 089 bp启动子、-881 bp启动子和-489 bp启动子驱动的gus基因能在愈伤组织中表达,-245 bp启动子不能驱动gus基因在愈伤组织中表达,说明启动子OsN1p具有启动活性的最小启动序列为ATG上游的-489 bp;-489 bp启动子驱动的gus基因在转基因植株根中表达,在根冠不表达;用5 mmol/L水杨酸(SA)喷施转基因植株叶片后,GUS定量分析结果表明转基因植株的GUS活性增高,转-881bp启动子植株的GUS活性比转-1 089 bp启动子植株的活性高。可见,启动子OsN1p具有组织特异性表达和受SA诱导表达的特性。
- 吴智丹王光李林刘凤权邵敏
- 关键词：启动子水稻
- 根癌农杆菌介导hrf1基因转化小麦增强赤霉病抗性被引量：5
- 2011年
- 将hrf1基因由根癌农杆菌EHA105介导,采用剪去颖壳和直接注射小穗2种侵染方法,转入江苏省重要小麦品种扬麦158。经硫酸卡那霉素抗性筛选和PCR检测,获得转基因阳性株系599个,2种侵染方法的转化率分别为0.8%和1.5%。经抗性分析表明,T1代对小麦赤霉病防效为28.3%,其中高抗株系78个;这78个株系的T2代对赤霉病防效为59.7%,高抗株系34个。结果表明,转hrf1基因小麦株系对小麦赤霉病有较好的抗病性。
- 李林肖姗姗穆东升杨秀玲王宏乐邵敏
- 关键词：农杆菌介导花粉管通道赤霉病抗性
- DNA shuffling技术改造Bt基因的水稻转化研究被引量：2
- 2008年
- 本试验挑选了以cry1Ab、cry1Ac、cry9C、cry1C和cry2A等5个基因经DNA family-shuffling改造后的不同组的14个杀虫活性有显著提高的重组Bt基因,通过农杆菌介导法转入水稻品种中花11中。各基因均获得80棵以上独立转化植株,通过对转化植株的PCR阳性检测,获得了约75%的阳性单株。Southern结果显示转化植株的拷贝数分别是1～12不等,单拷贝率为12%;Northern分析其表达量,结果显示除了很少发生基因沉默外其余单株均表达了Bt基因,但是植株间表达量差异较大;随机挑选阳性植株喂食一龄的二化螟进行生测实验,与原始基因相比,14个重组Bt基因均表现出了较高的毒性。
- 王娟张小琼林拥军
- 关键词：BT基因水稻转基因植株分子检测
