国家高技术研究发展计划(2010AA022905)
- 作品数：4 被引量：21H指数：2
- 相关作者：刘鹏李佳林马超赵祖波齐娟更多>>
- 相关机构：兰州生物制品研究所有限责任公司上海生物制品研究所有限责任公司武汉生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划甘肃省科技重大专项计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于MDCK细胞培养的流感疫苗研究进展被引量：2
- 2012年
- 流感一直是威胁全世界人类健康的疾病，每年引起数以亿计的人感染。疫苗是防控流感的重要手段。除了传统的鸡胚制备的流感疫苗，基于哺乳动物细胞培养的流感疫苗已研制成功。此文重点介绍Madin—Darby犬肾（Madin-Darbycaninekidney，MDCK）细胞的不同培养方式，以及基于MDCK细胞培养的流感疫苗的研究进展。
- 王石磊陈则
- 关键词：流感疫苗细胞培养技术MDCK细胞
- 流感病毒在Vero细胞系与MDCK细胞系增殖条件的比较被引量：7
- 2012年
- 目的研究流感病毒H1N1及其他亚型在Vero细胞系和MDCK细胞系高效增殖的最适条件,比较两种细胞系对流感病毒的敏感性差异及影响敏感性差异的条件。方法在培养好的Vero细胞系与MDCK细胞系用不同的病毒感染复数(M.O.I)、胰酶浓度、病毒吸附时间、病毒维持液血清质量浓度等条件进行流感病毒在细胞上的增殖。结果在M.O.I为0.01接种流感病毒,吸附时间为1 h,胰酶质量浓度2μg/mL,血清质量浓度为8%时,流感病毒血凝素在MDCK细胞系可获得较高的滴度。结论 MDCK细胞系是适于流感病毒培养的细胞,它作为生产新型流感病毒疫苗的主要细胞基质需要进一步的研究。
- 刘鹏李佳林马超齐娟刘晓凡
- 关键词：流感病毒
- H1N1流感病毒在微载体培养MDCK细胞上增殖的研究被引量：12
- 2013年
- 目的探索MDCK细胞在微载体上的培养条件,并研究H1N1型流感病毒在MDCK细胞上的增殖条件。方法在微载体上培养好MDCK细胞上用H1N1型流感病毒在不同的病毒感染复数(MOI)、胰酶浓度两个关键的病毒增殖条件进行流感病毒在细胞上的增殖研究。结果微载体质量浓度为6 g/L时,MDCK细胞培养密度可以达到4.5×106cells/mL。在MOI为0.05接种流感病毒,胰酶质量浓度4μg/mL,流感病毒在MDCK细胞上可获得较高的滴度。结论 MDCK细胞用微载体培养可以达到较高的细胞密度,可以作为规模化生产新型流感病毒疫苗的主要细胞基质进行进一步的研究。
- 刘鹏李佳林马超赵祖波
- 关键词：H1N1流感病毒微载体
- 胰蛋白酶对Madin-Darby犬肾细胞消化方法的研究被引量：1
- 2021年
- 目的考察不同胰蛋白酶及消化后是否弃去胰蛋白酶对Madin-Darby犬肾(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞消化效果的影响,并评价培养基中添加胎牛血清对减轻胰蛋白酶细胞毒性的作用。方法选用5种胰蛋白酶分别消化MDCK细胞,消化5 min后弃去胰蛋白酶为弃去组,不弃去为保留组。观察消化过程,记录细胞达到不同状态所需的时间。完全消化后,检测细胞的活率、结团率、直径。以不同浓度的胰蛋白酶消化MDCK细胞,按培养基是否添加胎牛血清分为含血清和无血清组,检测细胞活性。结果重组胰蛋白酶消化时间长于动物源胰蛋白酶。保留和弃去组细胞活率均值都大于94.77%,结团率均值均大于34.56%,直径均值分别为17.33和16.97μm且差异有统计学意义(t=4.632,P<0.001)。细胞活性随胰蛋白酶添加量呈现梯度变化。含血清和无血清组的细胞活性差异有统计学意义(t=12.545,P<0.001)。结论5种胰蛋白酶均可完全解离贴壁MDCK细胞,其中重组胰蛋白酶消化时间较长,作用温和,比较适合生产。弃去胰蛋白酶再继续消化的做法可行且有益,胰蛋白酶浓度对细胞活性有影响,胎牛血清可以减轻胰蛋白酶的潜在毒性。
- 刘琛李兴航孟子延夏志武年悬悬龚铮韩天闫璐瑶张家友刘雄杨晓明
- 关键词：传代培养胰蛋白酶
