国家自然科学基金(81272470)
- 作品数：17 被引量：95H指数：6
- 相关作者：赵建华唐金海钟山亮张晓慧胡清更多>>
- 相关机构：南京医科大学江苏省肿瘤医院徐州医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目江苏省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-130a靶向调节PTEN基因对人乳腺癌细胞多柔比星敏感性影响的观察被引量：10
- 2013年
- 目的:探讨miR-130a对PTEN基因表达的调控,及其与乳腺癌MCF-7细胞株多柔比星耐药的关系。方法:利用miRNA芯片结合RT-qPCR的方法筛选到miR-130a在亲代敏感MCF-7/S细胞与多柔比星耐药细胞(MCF-7/Adr)中表达差异;通过靶基因预测软件预测PTEN与miR-130a基因的关系;通过miR-130a模拟物和抑制物转染实验结合四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、RT-qPCR和蛋白质印迹法观察miR-130a的表达变化对乳腺癌细胞多柔比星耐药性的影响及其与PTEN基因表达间的关系。结果:与MCF-7/S相比,miR-130a在MCF-7/Adr中的表达水平明显增高(116 834.70±4 728.32)倍,t=19.035,P=0.000;但在多西紫杉醇耐药株MCF-7/Doc中的表达差异无统计学意义,t=0.703,P=0.521。MCF-7/S细胞转染miR-130amimics后,与阴性对照组相比,其miR-130a表达水平明显增高(17.686±1.057)倍,t=8.360,P=0.001;MCF-7/S空白对照组、阴性对照组和实验组对Adr的IC50分别为(0.240±0.099)、(0.181±0.060)和(0.606±0.164)mg/L;与阴性对照相比,转染miR-130amimics后细胞的IC50显著增高,t=5.200,P=0.007。同时PTEN mRNA和蛋白表达水平明显下调,PTEN mRNA水平是阴性对照组的(0.362±0.076)倍,t=2.927,P=0.043;蛋白表达水平是阴性对照组的(0.386±0.020)倍,t=20.713,P=0.000 3;而MCF-7/Adr转染miR-130ainhibi-tors后,其miR-130a表达水平是阴性对照组的(0.169±0.035)倍,t=12.036,P=0.000 2;MCF-7/Adr空白对照组、阴性对照组和实验组对Adr的IC50分别为(50.793±3.970)、(46.206±1.963)和(23.366±1.304)mg/L;与阴性对照相比,转染miR-130ainhibitors后细胞的IC50显著降低,t=16.784,P=0.000 7;同时PTEN mRNA和蛋白表达水平均明显上调,PTEN mRNA水平是阴性对照组的(3.564±0.336)倍,t=4.122,P=0.015;蛋白表达水平是阴性对照组的(2.019±0.268)倍,t=8.999,P=0.000 8。结论:miR130a可能通过靶定PTEN基因来增强乳腺癌细胞对多柔比星的耐药性。
- 陈志远钟山亮季明华许金金胡清陈伟贤徐涛赵建华唐金海
- 关键词：药物疗法耐药多柔比星药物疗法PTEN
- 剪切波弹性成像联合超微血流成像对乳腺癌的诊断价值被引量：11
- 2019年
- 目的探讨剪切波弹性成像(SWE)和超微血流成像(SMI)对乳腺癌的诊断价值。方法收集2016年7月至2018年3月江苏省肿瘤医院及南京市江宁医院收治并于术前完成SWE及SMI的乳腺肿瘤患者78例(88个病灶)的临床资料,SWE获得杨氏模量(E)定量分析,SMI获得病灶血流Alder分级,并与病理对照,研究SWE及SWE联合SMI对乳腺癌的诊断价值。结果良性病灶E平均值为30.6 kPa(19.6～45.3 kPa),恶性病灶E平均值为55.4 kPa(44.6～121.8 kPa),两者差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌Alder 0～Ⅲ级分别占40.91%(9/22)、22.73%(5/22)、62.50%(10/16)、78.57%(22/28)。SWE与SWE联合SMI的敏感性、特异性、准确性分别为86.95%、88.10%、87.50%和91.30%、92.86%、92.05%,两者相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SWE和SMI是有效诊断乳腺癌的手段,两者联合应用可提高乳腺癌诊断的敏感性、特异性、准确性。
- 董维露谭旭艳王文平夏彩凤李玲
- 关键词：乳腺癌
- Wnt/β-catenin信号通路在乳腺癌发生、转移及耐药形成中的作用被引量：4
- 2015年
- 乳腺癌是全球女性中最常见的恶性肿瘤之一，随着其发病率及病死率的升高，已成为女性健康的最大威胁。近年来，信号通路在肿瘤的发生、发展、转移及药物耐药中的作用已受到关注，其中 Wnt 信号通路与肿瘤尤其是乳腺癌的关系一直是肿瘤学领域研究的焦点。Wnt/β-catenin 是目前研究最多的Wnt 信号通路之一，是一类在生物体进化过程中高度保守的信号转导途径，众多生命活动过程均受其调节控制。它主要参与了细胞的增殖、分化、极化、凋亡与抗凋亡等过程，该信号通路的异常与细胞无限制恶性生长和癌变密切相关。近年来已有不少国内外学者对 Wnt/β-catenin 信号通路在乳腺癌中的作用进行了研究，现综述如下。
- 张晓慧赵建华唐金海
- 关键词：信号通路乳腺癌耐药
- 人三阴性乳腺癌细胞耐药株的建立及特性研究
- 2016年
- 目的建立人三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231的多西紫杉醇(Doc)耐药模型(MDA-MB-231/Doc)和表阿霉素(Epi)耐药模型(MDA-MB-231/Epi),探讨其生物学特性。方法采用Doc和EPi低浓度逐步加量诱导法历时12个月分别建立MDA-MB-231/Doc和MDA-MB-231/Epi耐药细胞株。通过细胞形态学观察、MTT法和流式细胞术分析、比较其生物学特性,实时荧光定量PCR检测多药耐药基因(MDR1)mRNA表达,Western Blot法检测P糖蛋白(P-gp)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(Her-2)的表达状况。结果所构建的MDA-MB-231/Doc和MDA-MB-231/Epi耐药株可分别在12nmol/L Doc和800nmol/L Epi中稳定生长,在相同的药物浓度下,耐药细胞株的生长增殖率明显高于亲代细胞,其耐药指数分别为亲代敏感细胞的8.32倍和64.93倍,且相互呈交叉耐药状态。与亲代细胞相比,两株耐药细胞处于G1期和G2期的细胞增加、处于S期的细胞减少,随撤药时间的延长,细胞的增殖速度加快。两株耐药株的MDR1基因表达水平增高,分别为亲代细胞的4.05倍和5.96倍,P-gp表达为阳性。与MCF-7细胞株相比,MDA-MB-231细胞株ER、PR、HER2表达阴性,是典型的三阴性乳腺癌细胞株。结论成功建立MDA-MB-231/Doc和MDA-MB-231/Epi的耐药细胞株,其生长及耐药性稳定。
- 吴月琴钟山亮张晓慧唐金海赵建华
- 关键词：乳腺癌细胞多西紫杉醇表阿霉素多药耐药
- MiR-452逆转人乳腺癌MCF-7/DOC细胞对多西他赛耐药性及其机制研究被引量：5
- 2015年
- 目的探讨miR-452在逆转人乳腺癌MCF-7/多西他赛(docetaxel,DOC)细胞对多西他赛耐药的作用机制。方法应用实时荧光定量PCR法验证对DOC耐药的乳腺癌细胞MCF-7/DOC及其亲本细胞MCF-7中miR-452的表达差异,同时分别检测MCF-7和MCF-7/DOC转染miR-452模拟物和抑制物后的表达变化。用MTT法检测细胞转染后对DOC耐药性的变化,并用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法验证生物信息学预测的miR-452靶基因胰岛素生长因子1受体(insulin-like growth factor-1receptor,IGF-1R),以探讨其可能的作用机制。结果MCF-7/DOC细胞中miR-452的相对表达量显著高于其亲本细胞MCF-7的表达量(78.86±21.89)倍,t=3.88,P=0.02;MCF-7转染miR-452模拟物后,miR-452相对表达量高于其阴性对照组(212.15±50.08)倍,t=11.13,P<0.01;耐药性实验组为(1.98±0.11)μmol/L,高于阴性对照组的(0.85±0.08)μmol/L,P<0.01;IGF-1R的mRNA和蛋白质水平低于其阴性对照组,mRNA水平为(0.54±0.22)倍,t=2.90,P=0.04。相反,MCF-7/DOC转染miR-452抑制物后,miR-452相对表达量低于其阴性对照组(0.58±0.07)倍,t=8.00,P=0.02;耐药性实验组为(44.45±3.20)μmol/L,低于阴性对照组的(107.31±6.63)μmol/L,P<0.01;IGF-1R的mRNA和蛋白质水平高于其阴性对照组,mRNA水平为(50.90±4.16)倍,t=53.76,P<0.01。结论 miR-452可能通过靶基因IGF-1R改变DOC的耐药性。
- 胡清钟山亮季明华陈伟贤吕萌萌马腾飞唐金海赵建华
- 关键词：多西他赛胰岛素样生长因子1受体
- MRI引导定位活检对隐匿性乳腺癌的诊治价值被引量：10
- 2015年
- 目的 探讨MRI引导下定位及活检对隐匿性乳腺癌的诊治价值。方法 回顾性分析以腋窝淋巴结肿大为首发症状,仅MRI发现为可疑乳腺癌患者21例;并采用1.5T超导MRI仪扫描,通过乳腺MRI专用定位活检仪,对这些仅MRI发现的乳腺癌病灶行MRI引导活检或行MRI导丝定位引导病灶切除活检,病理学证实这些可疑病灶就是隐匿性乳腺癌原发灶。结果 MRI检测到的21例可疑病灶。病变大小4-15mm。13个病灶呈肿块样强化,病灶强化形态：呈不规则形8个,分叶形5个;病灶强化边缘：呈毛刺状4个,不规则形9个;病灶内部强化特征：8个表现为环形强化,5个表现为不均匀强化。8个病灶呈非肿块样强化。强化病灶分布：2个呈局灶强化,2个呈线样强化,4个呈导管样强化;病灶内部强化特征：全部呈不均匀混杂样强化。18例行MRI引导导丝定位病灶切除并活检,3例行MRI引导病灶穿刺活检。病理浸润型导管癌。确诊后3例行术前新辅助化疗。13例行乳腺改良根治术,8例行MRI引导导丝定位病灶切除保乳手术。结论 通过MRI引导对隐匿性病灶行精准定位或活检,能够使部分保乳手术替代乳房切除术。
- 赵玉年唐金海沈文荣郭震秦建伟李健顾慷王慧华庄珊刘念龙
- 关键词：隐匿性乳腺癌腋窝淋巴结转移活组织检查
- 5-Aza-CdR对乳腺癌MCF-7细胞增殖及抑癌基因RASSF2A表达的影响被引量：6
- 2015年
- 目的研究5-氮-2′-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对乳腺癌MCF-7细胞增殖及抑癌基因RASSF2A表达的影响。方法用不同浓度的5-Aza-CdR处理MCF-7细胞12-96h,四甲基偶氮唑盐比色（MTT）法和流式细胞仪分别检测药物处理前后细胞的增殖活性和凋亡率;实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各阶段RASSF2A mRNA的表达水平,甲基化特异性PCR（MSP）观察该基因甲基化的改变。结果用1、5、10μmol/L 5-Aza-CdR处理MCF-7细胞24、48、72和96h后,细胞生长均受到抑制,呈时间和剂量依赖性。流式细胞仪分析表明,3种药物浓度处理细胞72h后凋亡率增加,5和10μmol/L组凋亡率分别为（25.5±3.5）%和（58.2±3.2）%,与对照组（13.4±2.0）%相比差异有统计学意义（P〈0.05）。RT-PCR检测显示,不同浓度药物处理MCF-7细胞后,RASSF2A mRNA表达水平随着药物浓度的增加而逐步上调;进一步MSP检测发现这些癌细胞中RASSF2A甲基化状态得到了不同程度的逆转。结论 5-Aza-CdR可通过逆转RASSF2A基因异常甲基化导致该基因表达上调来抑制MCF-7细胞增殖,RASSF2A是一个乳腺癌相关抑癌基因。
- 马腾飞韦达钟山亮张晓慧赵建华
- 关键词：甲基化5-AZA-CDR乳腺癌
- 肿瘤相关exosomes的研究进展被引量：2
- 2013年
- 外体(exosomes)是由细胞内的晚期内涵体出芽形成多泡体(multivesicular bodys,MVBs),与质膜融合后释放到胞外的囊泡。Exosomes含有丰富的RNA和蛋白质,能介导细胞间物质与信息传递。肿瘤细胞分泌的exosomes能改变肿瘤的微环境,传递遗传物质促进肿瘤的侵袭与转移,诱导耐药。负载肿瘤抗原的exosomes能介导和扩大抗肿瘤免疫,可作为新型的肿瘤疫苗。exosomes是治疗基因的天然载体,为肿瘤的基因治疗开辟新的途径。此外,循环或体液中的exosomes还可作为判断肿瘤疗效和预后的标志,具有独特的临床应用价值。
- 许金金赵建华
- 关键词：EXOSOMES肿瘤MICRORNA
- miR-21靶向调节MARCKS基因影响人乳腺癌细胞多西紫杉醇敏感性的研究被引量：3
- 2018年
- 目的:探讨miR-21对MARCKS基因表达的调控及其与乳腺癌MDA-MB-231细胞株多西紫杉醇耐药的关系。方法:通过基因芯片筛选到miR-21在亲代敏感细胞株(MDA-MB-231/S)与多西紫杉醇耐药细胞株(MDA-MB-231/Doc)中存在差异表达,应用实时荧光定量(RT-qPCR)方法验证此差异,同时分别检测MDA-MB-231/S细胞和MDA-MB-231/Doc细胞转染miR-21模拟物和抑制物后的表达变化;通过靶基因预测软件预测miR-21与MARCKS基因的关系;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术、RT-qPCR和蛋白质印迹法检测miR-21表达变化对三阴性乳腺癌细胞多西紫杉醇耐药性的影响,并探讨其与MARCKS基因表达的关系。结果:与MDA-MB-231/S相比,miR-21在MDA-MB-231/Doc中的表达水平明显升高(2.03±0.06)倍(P<0.05)。与阴性对照组比,MDA-MB-231/S细胞转染miR-21 mimics后miR-21表达水平明显增高(2.26±0.07)倍(P<0.05),而MARCKS基因在mRNA和蛋白水平上均明显下调。MDA-MB-231/Doc细胞转染miR-21 inhibitors后,miR-21表达水平是阴性对照组的(0.36±0.03)倍(P<0.05),MARCKS基因的mRNA和蛋白水平高于其阴性对照组。转染miR-21 mimics后的MDA-MB-231/S细胞IC50显著高于其阴性对照组(P<0.05),相反,与阴性对照组相比,MDA-MB-231/Doc细胞转染miR-21 inhibitors后,其IC50显著降低(P<0.05)。MDA-MB-231/S转染miR-21 mimics后,miR-21表达量明显上调,MARCKS基因分别是阴性对照组的(3.564±0.336)倍和(2.019±0.268)倍(P<0.05)。结论:miR-21可能通过靶向调节MARCKS基因增强乳腺癌细胞对多西紫杉醇的耐药性。
- 赵杨钟山亮钟山亮张晓慧赵建华
- 关键词：乳腺癌MIR-21耐药多西紫杉醇
- 中医药治疗乳腺癌进展被引量：18
- 2017年
- 近年来中医药在乳腺癌综合治疗中发挥了独特作用并有重要地位。此综述回顾总结了中医对乳腺癌病因病机的认识,将中医辨证论治与疾病分期及诊疗技术相结合,拓展中医理论内涵,丰富乳腺癌中西医结合理论基础。介绍了中医药的实际临床应用及疗效,如改善术后并发症、对抗化疗耐药性、降低放化疗副反应、减轻内分泌治疗的副作用、提高生活质量及延长生存期等方面,通过对中医药干预乳腺癌的实验室研究,进一步证实了中医药多途径、多靶点的药用特点。
- 周思颖张思杰徐寒子孙大伟唐金海
- 关键词：乳腺癌中医药中西医结合
