您的位置： 专家智库 > >

浙江省自然科学基金(Y206760)

作品数：3 被引量：14H指数：2
相关作者：林陈水杨丹燕武胜伟杨文花卢美珍更多>>
相关机构：浙江工业大学更多>>
发文基金：浙江省自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学

主题

  • 2篇可溶性
  • 1篇酸酶
  • 1篇磷酸酶
  • 1篇可溶性表达
  • 1篇克隆
  • 1篇活性
  • 1篇碱性磷酸酶
  • 1篇杆菌
  • 1篇T载体
  • 1篇BL21(D...
  • 1篇DE3
  • 1篇DSBA
  • 1篇E.COLI
  • 1篇大肠杆菌

机构

  • 3篇浙江工业大学

作者

  • 3篇林陈水
  • 2篇杨丹燕
  • 1篇孟跃
  • 1篇徐伟
  • 1篇卢美珍
  • 1篇武胜伟
  • 1篇杨文花

传媒

  • 3篇浙江工业大学...

年份

  • 2篇2009
  • 1篇2008
共 3 条 记 录，以下是 1-3
全选 清除 导出
排序方式：
提高碱性磷酸酶在E.coli胞内表达的可溶性及活性被引量：2
2009年
以E.coliDH5α基因组为模板PCR扩增得到无信号肽的碱性磷酸酶基因片段,与胞内融合表达型T载体连接得到重组质粒,转化表达宿主E.coliBL21(DE3)和E.coliorigami(DE3),经0.1 mM IPTG诱导表达,超声破碎细胞后,SDS-PAGE分析可溶性,融合蛋白在E.coliorigami(DE3)中的可溶蛋白含量比E.coliBL21(DE3)中高.融合蛋白的可溶部分经Ni2+螯合亲和纯化,纯化后E.coliorigami(DE3)中蛋白活性比E.coliBL21(DE3)中明显提高,达到1 614.3U/mg蛋白.
杨丹燕林陈水
关键词：碱性磷酸酶E.COLIBL21(DE3)可溶性活性
T载体研究进展被引量：10
2009年
T载体是直接克隆或表达PCR产物的新型载体,重组过程无需酶切和纯化,简便高效.在总结国内外研究的基础上,概述了构建T载体的方法,其中内切酶法是T载体制备方法中最先进的方式.阐述了T载体在抗体库构建、目的基因克隆、某些蛋白的融合表达方面的应用以及目前T载体的商业化.对表达型T载体与克隆型T载体进行了比较,其中表达型T载体可以同时满足基因克隆和表达的需要,还具有其他独特的优势.介绍了表达型T载体的构建难点,探讨了今后T载体的研究发展方向.
林陈水武胜伟杨丹燕
关键词：T载体克隆
人防御素HNP-1在大肠杆菌中的融合表达及可溶性研究被引量：2
2008年
根据大肠杆菌密码子偏爱性用PCR方法分别获得人防御素HNP-1基因序列,利用SOE技术和不含信号肽的DsbA基因片段拼接后将产物克隆到质粒pET-11b中构建人防御素HNP-1与分子伴侣DsbA的融合表达载体,转化E.coliJM109,提取阳性克隆进行测序后抽取质粒转化表达宿主E.coliBL21(DE3).工程菌经IPTG诱导后可在胞内以可溶形式大量表达DsbA-HNP-1蛋白.重组蛋白经亲和层析法纯化后达到电泳纯,经体外复性,在抗菌试验中表现出对短小杆菌的抗菌活性.
徐伟林陈水杨文花孟跃卢美珍
关键词：DSBA可溶性表达
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0