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国家自然科学基金(30571546)

作品数:8 被引量:65H指数:3
相关作者:蒋义国沈月兰周兰兰傅娟陈学敏更多>>
相关机构:广州医学院华中科技大学江西省人民医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 8篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 9篇医药卫生

主题

  • 6篇细胞
  • 5篇上皮
  • 5篇上皮细胞
  • 3篇支气管
  • 3篇支气管上皮
  • 3篇支气管上皮细...
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  • 2篇线粒体基因
  • 2篇小发夹RNA
  • 2篇恶变
  • 2篇二羟环氧苯并...
  • 2篇发夹
  • 1篇致癌物

机构

  • 8篇广州医学院
  • 2篇华中科技大学
  • 2篇江西省人民医...
  • 1篇珠海市疾病预...

作者

  • 8篇蒋义国
  • 5篇沈月兰
  • 4篇傅娟
  • 3篇周兰兰
  • 2篇吴中亮
  • 2篇陈学敏
  • 2篇曹虹
  • 2篇杨巧媛
  • 1篇居颖
  • 1篇陈家堃
  • 1篇付娟
  • 1篇谭爱军
  • 1篇邹云锋
  • 1篇刘林华
  • 1篇纪卫东

传媒

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  • 1篇中华劳动卫生...
  • 1篇中国公共卫生
  • 1篇Biomed...
  • 1篇中华肿瘤防治...
  • 1篇第五届广东省...

年份

  • 1篇2010
  • 3篇2009
  • 2篇2008
  • 1篇2007
  • 2篇2006
8 条 记 录,以下是 1-9
排序方式:
N-Ras基因靶向的shRNA抑制二羟环氧苯并芘诱导的恶变细胞增殖
2009年
目的用小发卡RNA(small hairpin RNA,shRNA)干扰技术沉默N-Ras基因表达,探讨N-Ras基因表达对二羟环氧苯并芘(BPDE)转化人支气管上皮细胞(16HBE-T)恶性性状的影响。方法将已建立的针对N-Ras基因的shRNA干扰表达质粒载体pGPU6/GFP/Neo-NRas-566转染16HBE-T细胞,经G418筛选,建立稳定沉默N-Ras基因转化细胞系。采用Western blot筛选最佳N-Ras基因沉默细胞系,用流式检测N-Ras沉默细胞周期变化,用软琼脂实验和裸鼠成瘤实验进行细胞表型分析。结果成功培养出稳定沉默N-Ras基因的16HBE-T细胞系,Western blot显示N-Ras蛋白抑制率最高达86%。流式分析发现稳定沉默N-Ras基因表达诱导转化细胞G0/G1期捕获,软琼脂实验和裸鼠成瘤实验发现稳定沉默N-Ras基因降低了体外恶性转化细胞的集落形成率、抑制了体内肿瘤细胞生长。结论N-Ras基因沉默可以降低转化细胞的细胞周期进程和细胞恶性性状表型,提示N-Ras基因在二羟环氧苯并芘诱导细胞恶变过程中具有重要作用。
周兰兰蒋义国谭爱军沈月兰刘林华杨巧媛
关键词:二羟环氧苯并芘小发夹RNAN-RAS基因
反式二羟环氧苯并芘对人支气管上皮细胞中HER2/neu基因表达的影响被引量:4
2007年
目的探讨环境致癌物苯并(a)芘代谢物反式二羟环氧苯并芘(BPDE)对人支气管上皮细胞HER2/neu基因表达的影响。方法利用半定量RT-PCR、SYBR GreenI实时定量RT-PCR(QRT-PCR)、Western blot及免疫细胞化学方法分别检测经2.0μmol/L反式BPDE诱发人支气管上皮细胞恶性转化细胞(16HBE-T)与对照DMSO溶剂组未恶性转化细胞(16HBE-N)之间HER2/neu基因mRNA和蛋白表达水平的差异,及两组细胞内HER2/neu蛋白表达定位分析。结果经几种不同方法检测反式BPDE恶性转化人支气管上皮细胞中HER2/neu基因mRNA和蛋白水平都比对照溶剂组细胞(16HBE-N)表达显著升高(P<0.05)。HER2/neu蛋白定位在胞膜。结论反式BPDE诱发人支气管上皮细胞恶性转化存在HER2/neu表达增高,其可能与原癌基因HER2/neu被激活作用有关。
傅娟蒋义国邹云锋沈月兰周兰兰陈学敏
反式-BPDE及硫化镍诱发恶变支气管上皮细胞中线粒体DNA高变区序列分析
目的:检测苯并(a)芘代谢产物反式二羟环氧苯并芘(反式BPDE)及硫化镍诱发永生化人支气管上皮细胞系16HBE恶性转化过程中线粒体DNA控制区序列变化。探讨线粒体DNA控制区在环境致癌物苯并(a)芘及硫化镍致癌作用中是否...
傅娟蒋义国陈家堃纪卫东吴中亮
关键词:苯并(A)芘人支气管上皮细胞线粒体基因
文献传递
二羟环氧苯并芘恶性转化细胞的microRNA表达谱被引量:2
2008年
目的检测二羟环氧苯并芘(BPDE)恶性转化细胞的microRNA(miRNA)表达谱,寻找恶性转化细胞与对照细胞差异表达的miRNA。方法以溶剂二甲亚砜助溶的终浓度为2.0μmol/L的BPDE培养液培养人支气管上皮细胞株16HBE,获得BPDE恶性转化的细胞模型为实验组,同时,以含二甲亚砜的培养液培养正常16HBE作为对照组。通过微阵列技术检测实验组与对照组327个人类miRNA,并选择差异表达明显的miR-10a和miR-320用反转录荧光定量PCR方法对微阵列结果加以验证。结果获得2组细胞327个miRNA表达谱,发现差异表达miRNA55个,其中46个表达上调,9个表达下调,并得到反转录荧光定量PCR的验证。结论获得BPDE恶性转化细胞与正常16HBE细胞差异表达的miRNA,为进一步寻找BPDE恶性转化细胞特征性miRNA提供了研究基础。
蒋义国沈月兰付娟周兰兰曹虹
关键词:二羟环氧苯并芘上皮细胞细胞恶性转化微阵列分析
环境化学致癌研究若干热点与问题
2010年
环境化学物的致癌机制研究是环境与健康研究的一项重要内容,广州医学院化学致癌研究所蒋义国教授从事环境化学致癌和分子毒理学研究并取得重要进展。本刊特邀蒋义国教授就近期研究成果组织和整理,进行集中报道,以促进该研究的深入和发展。
蒋义国杨巧媛
关键词:环境污染物基因
MicroRNA Expression Profiles and MiR-10a Target in Anti-benzo[a] pyrene-7,8-diol-9,10-epoxide-transformed Human 16HBE Cells被引量:26
2009年
<正>Objective To screen miRNA profiles of malignantly transformed human bronchial epithelial cells,16HBE-T,induced by anti-benzo[a]pyrene-trans-7,8-diol-9,10-epoxide(anti-BPDE),and to analyze putative miR-10a targets in 16HBE-T.Methods A hovel microarray platform was employed to screen miRNA profiles of 16HBE-T cells transformed by anti-BPDE.Microarray data for miR-10a and miR-320 were validated using quantitative real time polymerase chain reaction(QRT-PCR).The expression of a putative target for miR-10a,HOXA1,was analyzed by reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) and QRT-PCR.Results In comparison with the vehicle-treated cells(16HBE-N),16HBE-T exhibited difierential expression of 54 miRNAs,in which,45 were over-expressed and 9 were down-regulated.The five most highly expressed miRNAs were miR-494,miR-320,miR-498,miR-129,and miR-106a.The lowest expressed miRNAs were miR-10a,miR-493-5p,and miR-363~*.Three members of miR-17-92 cluster,miR-17-5p,miR-20a,and miR-92,showed significantly higher abundance in 16BHE-T as miR-21,miR-141,miR-27a,miR-27b,miR-16 and miRNAs of the let-7 family.The putative target for miR-10a, HOXA1 mRNAwas up-regulated 3-9-foldin 16HBE-T,as compared with 16HBE-N.Conclusion Thefindings of the study provide information on differentially expressed miRNA in malignant 16HBE-T,and also suggest a potential role of these miRNAs in cell transformation induced by anti-BPDE.HOXA1 is similarly up-regulated,suggesting that miR-10a is associated with the process of HOXA1-mediated
YUE-LAN SHENYI-Guo JIANGANNE R. GREENLEELAN-LAN ZHOULIN-HUA LIU
关键词:上皮细胞
小发夹RNA抑制人上皮生长因子受体-2基因表达细胞株的构建
2009年
目的在经反式二羟环氧苯并芘(BPDE)恶性转化人支气管上皮细胞基础上建立一种载体介导的小发夹RNA(shRNA)抑制人上皮生长因子受体-2(HER2/neu)表达的稳定细胞株。方法构建靶向干扰HER2/neu shRNA逆转录病毒载体pSIREN—RetroQ—neu,经酶切及测序鉴定后,将重组表达载体经脂质体介导入反式BPDE恶性转化细胞中,同时以阴性片段重组载体转染细胞(阴性对照)和空白细胞(16HBE—T)做对照,经嘌呤霉素筛选阳性转染细胞株。半定量RT—PCR和Western blotting技术分别检测分析各组细胞中HER2/neu基因mRNA和蛋白表达差异。结果获得载体介导靶向抑制反式BPDE恶性转化细胞中HER2/neu基因表达的细胞株。pSIREN—RetroQ—neu阳性转染细胞组分别比较阴性对照和空白细胞组HER2/neu mRNA表达量均下降(平均灰度值分别为0.114±0.003、0.186±0.001、0.182±0.015),其差异有统计学意义(t值分别为39.154、7.564,P值均〈0.05),而阴性与空白对照组间相比差异无统计学意义(t=-0.409,P〉0.05)。pSIREN—RetroQ—neu转染细胞组相比阴性对照和空白细胞组HER2/neu蛋白表达明显下降,其抑制率分别达40%和39%。结论成功构建pSIREN—RetroQ-neu重组质粒,并能有效抑制反式BPDE恶性转化细胞中HER2/neu表达。
傅娟蒋义国居颖沈月兰陈学敏
关键词:细胞系ERBB-2RNA干扰
microRNA与癌症发生相关性研究的现状被引量:33
2008年
microRNAs简称miRNAs,是一类长约22核苷酸(nt)的非编码的单链RNA分子,由约70nt的前体miRNA(pre-miRNA)经Dicer酶剪切而来。miRNA参与生命过程中一系列的重要进程,包括发育、造血、器官形成、凋亡和细胞增殖,甚至是癌症发生。目前人类基因组中已确认的miRNA约500个,其中至少有200多种miR-NA序列与癌症发生有关。如miRNAs主要通过3种机制参与癌症发生:1)靶分子识别。以碱基互补的形式识别并结合靶分子,使其表达上升或下降,促进癌症的形成。miR-15a和miR-16-1特异性识别Bcl-2,直接与Bcl-2的3′UTR结合,使Bcl-2表达增加,抑制细胞凋亡或程序性细胞死亡通路,导致慢性淋巴性白血病等肿瘤发生。乳突状甲状腺癌患者组织中,与miR-221、miR-222结合的Kit的3′UTR端结合区域关键部位出现单核苷酸多态性(3169G→A),与miR-146a和miR-146b结合的外显子结合区域的关键部位出现单核苷酸多态性(2607G→C),从而导致Kit转录下降和Kit蛋白水平低下,促进乳突状甲状腺癌的形成。2)miRNAs突变或含有miRNAs染色体片断缺失。含有miR-15、miR-16基因片断缺失或者miR-15a和miR-16-1发生突变,与人慢性淋巴性白血病进展和预后有关,miR-17-92基因簇刺激肺癌细胞生长。3)癌基因或抑癌基因。肺癌组织中let-7miRNA调控RAS癌基因的表达,成胶质细胞瘤中miR-21以微癌基因形式发挥作用,乳腺癌中miR-10b、miR-125b、miR-145和miR-21及miR-155分别以抑癌基因和癌基因的形式发挥作用。
沈月兰蒋义国
关键词:微RNAS基因表达
致癌物诱导恶变细胞中线粒体高变区序列分析被引量:1
2006年
目的检测苯并(a)芘代谢产物反式二羟环氧苯并芘(反式-BPDE)及结晶型硫化镍(NiS)诱发永生化人支气管上皮细胞系(16HBE)恶性转化过程中线粒体DNA控制区序列变化。探讨线粒体DNA控制区在环境致癌物苯并(a)芘及硫化镍致癌作用中是否存在靶分子序列。方法应用银染PCR-单链构向多态性(SSCP)方法及测序方法分析恶变细胞中线粒体DNA高变区的序列变化。结果经反式-BPDE和NiS诱导恶变的人支气管上皮细胞系线粒体高变区均未发现异常改变。结论线粒体基因控制区可能并非是化学致癌物诱发肺癌的靶序列。
傅娟蒋义国陈家堃吴中亮曹虹
关键词:苯并(A)芘人支气管上皮细胞线粒体基因
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