浙江省自然科学基金(Y3080181)
- 作品数:3 被引量:27H指数:2
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- 血卵涡鞭虫单克隆抗体的制备与初步应用被引量:2
- 2011年
- 用血卵涡鞭虫可溶性抗原免疫BALB/c小鼠,经常规融合、间接ELISA方法筛选,将所得阳性克隆再经3次亚克隆后,共获得3株针对血卵涡鞭虫的单克隆抗体(2B2、3G4、4G7),单克隆抗体亚类鉴定表明,三者为IgG类抗体。用筛选的杂交瘤细胞株制备小鼠腹水抗体,其细胞上清及腹水效价分别为5.12×10-4和8.00×10-4。进一步利用单克隆抗体建立间接荧光抗体方法对单抗特异性进行鉴定,阳性虫体被染上黄绿色荧光,而正常梭子蟹血淋巴则未被染色。用单克隆抗体和多克隆兔抗血清以羊抗鼠HRP-IgG为酶标抗体,建立了检测血卵涡鞭虫的双抗体夹心ELISA方法,该方法对血卵涡鞭虫阳性标本检测符合率为100%。结果表明,制备的单克隆抗体效价高、特异性好,可用于血卵涡鞭虫的早期临床诊断。
- 查智辉施慧许文军谢建军孙忠
- 关键词:三疣梭子蟹血卵涡鞭虫单克隆抗体双抗体夹心ELISA法
- 几种常见水产药品对日本黄姑鱼幼鱼的急性毒性试验被引量:19
- 2010年
- 采用静水法,用高锰酸钾、二溴海因、CuSO4+FeSO4合剂(5:2)、敌百虫、阿维菌素、二氧化氯共6种常见水产药品对体长(5.73±1.50)cm、体重(2.00±0.32)g的日本黄姑鱼(Nibea japonica)幼鱼进行了急性毒性试验,得出6种药品对其24、48、96h的半致死浓度,高锰酸钾为1.37、1.26、1.24mg/L,二溴海因为10.59、8.61、7.86mg/L,CuSO4+FeSO4合剂为2.57、1.76、1.43mg/L,敌百虫为1.72、1.43、1.18mg/L,阿维菌素为0.30、0.23、0.19mg/L,二氧化氯为3.34、2.81、1.67mg/L;6种药物的安全浓度依次为0.12、0.79、0.14、0.12、0.02、0.17mg/L。
- 査智辉许文军谢建军张静柴学军
- 关键词:日本黄姑鱼急性毒性
- 海产蟹类血卵涡鞭虫间接荧光抗体快速检测技术被引量:7
- 2009年
- 以寄生于三疣梭子蟹血淋巴中的血卵涡鞭虫虫体为抗原,制备了多克隆血清抗体。抗体经健康梭子蟹血淋巴吸附处理后,间接ELISA检测效价达7 680。应用该抗体建立了血卵涡鞭虫的间接荧光抗体检测技术(IFAT)。采用常规显微镜检、PCR及IFAT 3种方法对采集的养殖青蟹、梭子蟹及海捕梭子蟹等18个样本进行了检测。检测结果显示:常规显微镜检阳性检出率为33.3%,而IFAT及PCR检测阳性率77.8%,符合率达100%;阳性虫体被染上黄绿色荧光,而正常梭子蟹血细胞则未被染色;可检测到血卵涡鞭虫不同生活阶段的营养体、腰鞭孢子及合孢体阶段。为血卵涡鞭虫的流行病学调查及生活史研究提供了简便实用的方法。
- 谢建军许文军施慧徐汉祥史海东张静
- 关键词:血卵涡鞭虫三疣梭子蟹锯缘青蟹间接荧光抗体