国家自然科学基金(30600535)
- 作品数：13 被引量：16H指数：2
- 相关作者：钱悦冯爱平陈思远褚淑娟涂亚庭更多>>
- 相关机构：华中科技大学华中师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 黑素瘤抑制性活性蛋白在恶性黑素瘤中的表达被引量：1
- 2007年
- 黑素瘤抑制性活性蛋白（MIA）是近年来在研究黑素瘤细胞株HTZ19时分离的抑制黑素瘤细胞增殖的因子，其基因与在软骨细胞内发现的CD—RAP基因相同。在对转基因小鼠的研究中观察到，MIA主要在胚胎的软骨细胞内表达．在乳腺胚胎发育过程中也有该基因的短暂表达，乳腺发育成熟后即消失，并且发现MIA在部分乳腺癌及胰腺癌、胃癌中有一定表达。
- 钱悦梁少姗陈思远冯爱平涂亚庭
- 关键词：恶性黑素瘤活性蛋白胚胎发育过程细胞内表达乳腺发育P基因
- 神经生长因子及其高亲和受体酪氨酸激酶、低亲和公共受体p75NTR在扁平苔藓皮损中的表达及意义被引量：2
- 2014年
- 目的检测神经生长因子（NGF）及其受体TrkA、p75NTR在扁平苔藓皮损中的表达。方法应用免疫组化ABC法检测32例扁平苔藓皮损和12例健康人皮肤石蜡标本NGF及其受体TrkA,p75NTR表达状况。结果NGF及TNA在32例扁平苔藓皮损表皮角质形成细胞中均有不同程度的表达（＋＋-＋＋＋），表达部位为细胞质，高于健康人皮肤NGF（--＋）及TrkA（--＋）的表达，两组间差异均有统计学意义（P〈0．01）；而p75NTR的表达两组差异无统计学意义。扁平苔藓皮损中NGF与TrkA表达呈正相关（R2=0．535，P〈0．01）。NGF及其受体TNA、p75NTR在扁平苔藓不同发病年龄、部位以及不同性别患者角质形成细胞中的表达差异均无统计学意义。结论NGF通过其高亲和受体TrkA在扁平苔藓的发病中可能起着一定的作用。
- 钱悦陈思远黄长征冯爱平褚淑娟
- 关键词：扁平苔藓神经生长因子蛋白酪氨酸激酶类P75NTR
- 白花丹素对黑素瘤A375细胞体外增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:评价白花丹素对黑素瘤细胞体外增殖及凋亡的影响。方法:体外培养黑素瘤细胞A375细胞株,应用不同浓度的白花丹素进行处理,培养24 h后,MTT法测定对细胞增殖的影响;用流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western blot检测bcl-2的表达。结果:浓度为1～13 μmol/L的白花丹素能显著抑制A375细胞株的增殖,且随浓度增加抑制作用递增;白花丹素作用24 h的半数抑制浓度约为10μmol/L;当浓度为2.5μmol/L、5.0 μmol/L和10.0 μmol/L作用24 h,细胞的凋亡率分别为8.52%±0.96%、14.83%±1.34%和19.56%±1.85%,与空白对照组(4.58%±0.46%)比较差异有统计学意义(P<0.05);细胞内bcl-2蛋白表达量随药物浓度升高而递减,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:白花丹素体外能抑制黑素瘤细胞增殖,并诱导细胞凋亡及下调黑素瘤细胞bcl-2蛋白的表达。
- 张丽冯爱平谭志建钱悦蒋苹李艳秋
- 关键词：白花丹素黑素瘤细胞增殖BEL-2
- 血管内皮生长因子-阿柔比星脂质体靶向杀伤恶性黑素瘤细胞的实验观察
- 2008年
- 目的应用包裹阿柔比星的血管内皮生长因子（VEGF）的长循环脂质体（阿柔比星-VEGF-SSL）于体外靶向杀伤恶性黑素瘤细胞。方法通过体外结合试验，验证阿柔比星-VEGF—SSL对恶性黑素瘤A375细胞的特异结合能力。通过体外细胞毒试验（MTT），检测阿柔比星-VEGF—SSL对A375细胞增殖活性的影响。结果阿柔比星-VEGF—SSL可与A375细胞特异结合，结合率可达非特异性脂质体的2．15倍。阿柔比星-VEGF-SSL可特异抑制A375细胞的增殖活性。48h细胞毒试验阿柔比星-VEGF-SSL抑制A375细胞增殖活性的作用与游离阿柔比星相似（P〉0．05），优于无VEGF的阿柔比星脂质体（阿柔比星-SSL）（P〈0．05），而对非靶细胞（黑素细胞）增殖活性的抑制作用弱于两者。0．5h预处理试验表明：缩短药物与细胞接触时间后，阿柔比星-VEGF—SSL仍保持较强抑制A375细胞增殖活性的作用。结论阿柔比星-VEGF—SSL可特异性识别恶性黑素瘤A375细胞，并作为良好载体将阿柔比星带入瘤细胞，显著抑制A375细胞的增殖活性，实现其靶向杀伤作用。
- 陈宏翔童强钱悦吴艳冯爱平吴志洪严小枫涂亚庭
- 关键词：黑色素瘤脂质体
- Triton X-100在单菌落PCR技术中的优化作用被引量：5
- 2009年
- 在利用单菌落PCR法直接筛选含有外源基因的重组质粒以及发生同源重组的重组子时,通过0.1%TritonX-100处理模板对PCR技术进行优化。以大肠杆菌DH5α、单核细胞增生李斯特菌的重组克隆为例,单菌落经Triton X-100处理后再进行PCR,琼脂糖凝胶电泳图谱的条带更清晰、杂带减少;克隆鉴定的阳性率明显提高,且在15μL的PCR反应混合液体系中的扩增效果更明显。对单核细胞增生李斯特菌的检测方法可以推广适用于多种革兰氏阳性菌。
- 张晓莉冯莹颖张强罗勤蒋苹钱悦
- 关键词：TRITONX-100重组克隆
- 携带MART-1基因的减毒单核细胞增多性李斯特菌抑小鼠恶性黑素瘤的研究
- 2010年
- 目的 探讨携带黑素瘤分化抗原MART-1基因的减毒单核细胞增多性李斯特菌（LM）对恶性黑素瘤的抑制作用及其机制.方法 构建pERL3-MART-1载体,通过电转化建立携带MART-1基因的△inlB LM-MART-1和△actA/△inlB LM-MART-1重组李斯特菌.浓度梯度稀释法测定各减毒菌株半数致死量（LD50）.C57BL/6小鼠随机分为磷酸盐缓冲液（PBS）组,△inlB LM-MART-1组和△actA/△inlB LM-MART-1组.首次免疫后第7天于小鼠腹部皮下接种B16F10细胞,第14天、21天重复免疫小鼠,观察并记录肿瘤大小及小鼠生存状态.应用实时定量PCR检测肿瘤组织中MART-1表达量.流式细胞术检测小鼠脾细胞中CD4^＋CD25^＋T细胞阳性率.结果 经鉴定成功构建△inlB LM-MART-1和△actA/△inlB LM-MART-1.减毒株△inlB LM和△actA/△inlB LM的LD50比LM-EGDe标准株毒力分别下降100倍和10 000倍.体内抑瘤试验显示,与PBS组比较,△inlB LM-MART-1组抑瘤率为46.95%,△actA/△inlB LM-MART-1抑瘤率为83.96%,差异均有统计学意义（P〈0.05和0.01）. PBS组、△inlB LM-MART-1组和△actA/△inlB LM-MART-1组肿瘤组织中MART-1表达量递增,以PBS组表达量为1,后两组为8.988±0.207和11.315±0.445,各组间差异均有统计学意义（P值均〈0.05）,且三组小鼠脾细胞中CD4＋D25＋T 细胞阳性率依次为（2.52±0.20）%、（1.14±0.13）%和（O.44±0.15）%,组间差异均有统计学意义（P值〈0.01）.结论 携带MART-1基因的减毒LM毒性明显低于LM标准株,而且可以有效抑制黑素瘤生长,延长小鼠生存期.
- 蒋苹钱悦冯爱平陈思远褚淑娟张丽吴艳张娜罗勤
- 关键词：MART-1
- 黑素瘤抑制蛋白在黑素瘤中的研究现状
- 2007年
- 黑素瘤是一种高度恶性的肿瘤，它的临床及病理组织学已经研究得很深入，但是分子水平研究仍在不断发展。黑素瘤抑制蛋白在黑素瘤中强表达，但在黑素细胞中不表达，它可能是调节黑素瘤恶化中的关键蛋白。一些体内及体外模型均提示了黑素瘤抑制蛋白在黑素瘤的发生、发展中的直接作用以及在早期黑素瘤中调节重要的相关通路和蛋白。临床研究表明，黑素瘤抑制蛋白可作为转移性黑素瘤的血清标志物。
- 梁少姗钱悦涂亚庭
- 关键词：黑色素瘤抑制蛋白类肿瘤转移
- 黑素瘤抑制性活性蛋白及基质金属蛋白酶-9在恶性黑素瘤的表达
- 2008年
- 目的:探讨黑素瘤抑制性活性蛋白(MIA)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在恶性黑素瘤中的表达以及作用。方法:应用SP免疫组化技术对38例恶性黑素瘤石蜡标本以及32例色素痣石蜡标本检测MIA及MMP-9表达水平。结果:MIA在所有色素痣中表达阴性,而在原位黑素瘤、侵袭性黑素瘤、有淋巴结转移恶性黑素瘤、无淋巴结转移恶性黑素瘤阳性表达率分别为21.4%,91.6%、94.1%、42.8%,MMP-9在恶性黑素瘤阳性表达率为71.1%,MIA的表达与MMP-9的表达呈正相关。结论:MIA在恶性黑素瘤的发生发展中起着重要作用,这种作用可能是通过上调MMP-9的表达来实现的。MIA有可能成为临床诊断、治疗恶性黑素瘤的有力靶点。
- 钱悦梁少姗陈思远涂亚庭冯爱平
- 关键词：黑素瘤基质金属蛋白酶-9
- 黑素瘤抑制性活性因子在黑素瘤不同阶段及基底细胞癌中的表达被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨黑素瘤抑制性活性因子(MIA)在黑素瘤及基底细胞癌中的表达及其作用。方法:应用SP免疫组化技术检测38份黑素瘤石蜡标本、35份基底细胞癌石蜡标本以及32份色素痣石蜡标本中MIA的表达水平。结果:MIA在所有色素痣以及基底细胞癌中均呈阴性表达,而在原位黑素瘤、侵袭性黑素瘤、有淋巴结转移的黑素瘤、无淋巴结转移的黑素瘤阳性表达率分别为21.4%、91.6%、94.1%和42.8%。结论:MIA在黑素瘤的发生发展中起重要作用,MIA有可能成为临床诊断、治疗黑素瘤的靶点。
- 钱悦梁少姗陈思远冯爱平涂亚庭
- 携带MIA基因单核细胞增生性李斯特菌抑制恶性黑素瘤的研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨携带黑素瘤抑制性活性蛋白（MIA）基因的单核细胞增生性李斯特菌（LM）对黑素瘤的抑制作用。方法构建载体pERL3-hly—MIA，电转化单核细胞增生性李斯特菌建立携带MIA基因的单核细胞增生性李斯特菌（LM—hly—MIA），Western鉴定。实验小鼠随机分成生理盐水组（A组）、LM组（B组）、LM—hly—MIA组（C组），免疫后次日给予小鼠背部皮下接种1×10^7／mLB16细胞0．1mL。记录注射部位肿瘤的大小与小鼠的一般情况。结果经酶切及Western Blot鉴定表明成功构建LM—hly—MIA，体内试验显示生理盐水组、LM组、LM—hly—MIA组小鼠肿瘤平均重量分别为4．33±0．91g、3．36±0．41g、1．89±0．52g，其中LM的肿瘤抑制率为22．4％，LM—hly—MIA的肿瘤抑制率为61．5％（P〈0．05）。结论携带MIA基因减毒单核细胞增生性李斯特菌明显抑制黑素瘤B16的生长。
- 钱悦蒋苹褚淑娟陈思远冯爱平罗勤
- 关键词：黑色素瘤抑制蛋白
