四川省教育厅青年基金(09zb054)
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 相关作者：姚学萍曹随忠余树民沈留红张于更多>>
- 相关机构：四川农业大学扬州大学更多>>
- 发文基金：四川省教育厅青年基金中国博士后科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 牦牛S100A12基因的克隆及其在生殖器官中表达情况的检测被引量：2
- 2013年
- 为了解S100A12基因在牦牛生殖器官中的表达情况,采用RT-PCR技术从牦牛脾组织中扩增S100A12基因序列,用半定量RT-PCR技术和免疫组织化学染色方法分别检测S100A12基因mRNA和S100A12蛋白在牦牛脾、淋巴结、乳腺及生殖器官中的表达。结果显示,克隆的牦牛S100A12基因序列片段大小为279bp,包含一个完整开放阅读框(ORF),推导编码92个氨基酸;S100A12mRNA和蛋白在脾中表达量相对最高,在睾丸、附睾、淋巴结、乳腺、卵巢中相对强表达,在阴茎、阴道、子宫(子宫角、子宫体和子宫颈)中相对弱表达。结果表明,S100A12mRNA和蛋白在牦牛生殖器官中均有不同程度的表达,提示其在牦牛生殖过程中可能发挥一定的作用。
- 曹随忠崔亚飞姚学萍雍康杨德英沈留红余树民刘宗平
- 关键词：牦牛
- 成纤维细胞Toll样受体和NOD的表达及功能研究进展被引量：2
- 2014年
- Toll样受体(TLR)和核苷酸结合寡聚体结构域蛋白(NOD)是先天性免疫应答中识别各种病原微生物保守结构的模式识别受体,与多种细菌和病毒感染性疾病相关。成纤维细胞广泛分布于机体各个组织,通常是一种不活跃的细胞。研究发现,一些组织的成纤维细胞表达多种TLR和NOD,并积极主动参与先天性免疫反应。本文综述了TLR和NOD的组成、结构及功能,并总结了一些重要组织中成纤维细胞TLR和NOD的表达及其介导的免疫相关作用。
- 廖纯颖姚学萍曹随忠
- 关键词：TOLL样受体NOD成纤维细胞免疫识别
- TLRs基因在牦牛雄性生殖器官中表达情况的检测被引量：7
- 2014年
- 为了解Toll样受体（TLRs）基因在牦牛生殖系统中的表达情况，应用半定量RT—PCR技术检测了TLRs基因mRNA在雄性牦牛生殖组织中的表达水平。结果显示，TLR1mRNA和TLR3～TLR9mRNA在睾丸、附睾、输精管和阴茎中均相对高表达；TLR2mRNA在睾丸、附睾头、附睾体和阴茎中相对高表达，在附睾尾和输精管中相对低表达；TLR10mRNA在睾丸、附睾头、附睾体和阴茎中相对低表达，在附睾尾和输精管中不表达。结果表明，TLRsmRNA在雄性牦牛生殖组织中均有不同程度的表达，提示它在牦牛生殖过程中可能发挥一定的作用。
- 曹随忠李计尚张于廖纯颖沈留红余树民姚学萍
- 关键词：牦牛
- 奶牛乳腺成纤维细胞中Toll样受体与NOD样受体及其信号通路相关分子mRNA的检测被引量：4
- 2014年
- 先天性免疫应答中,由模式识别受体（pattern recognition receptor,PRR）识别病原微生物的病原体相关分子模式（pathogen associated molecular patterns,PAMP）,如脂多糖（liposachride,LPS）、肽聚糖（peptidoglycan,PGN）、脂磷壁酸（lipoteichoic acid）等。Toll样受体（Toll-like receptor,TLR）是典型的PRR，主要分布于免疫细胞的细胞膜表面。
- 廖纯颖文月玲王寒江涛张于姚学萍沈留红余树民曹随忠
- 关键词：TOLL样受体NOD样受体免疫应答
- 奶牛S100A12基因克隆、原核表达及体外抗菌活性分析
- 2013年
- 克隆奶牛S100A12基因并在大肠杆菌中高效表达。采用RT-PCR扩增奶牛外周血白细胞中S100A12基因,构建原核表达载体pCold TF-S100A12,在大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达并纯化。SDS-PAGE和Westernblotting分析显示S100A12基因以融合蛋白形式表达,表达量占菌体总蛋白的46.7%,纯化的重组蛋白(80mg/L)。琼脂扩散法测定重组蛋白对乳腺炎主要致病菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性。结果显示:重组蛋白对大肠杆菌有抗菌活性,而对金黄色葡萄球菌无抗菌活性。本研究为S100A12蛋白抗体制备及基因功能研究奠定了基础。
- 曹随忠雍康姚学萍崔亚飞杨德英余树民刘宗平
- 关键词：奶牛乳房炎原核表达抗菌活性
- NOD1和NOD2基因在牦牛雄性生殖器官中的表达检测
- 2014年
- 为了解NOD1和NOD2基因在牦牛生殖系统中的表达情况,从脾脏组织总RNA中RT-PCR扩增牦牛NOD1和NOD2基因,半定量RT-PCR分析NOD1和NOD2 mRNA在牦牛雄性生殖组织的表达水平。结果显示,NOD1在脾脏、睾丸、附睾头、附睾体、附睾尾、输精管和阴茎中均相对低表达,而NOD2在脾脏、睾丸、附睾头、附睾体、附睾尾、输精管和阴茎中均相对高表达。结果表明,NOD1和NOD2在牦牛雄性生殖组织中广泛表达,提示其在牦牛生殖过程中可能发挥一定的作用。
- 余树民李计尚张于廖纯颖姚学萍沈留红曹随忠
- 关键词：牦牛NOD2基因
- 奶牛气管抗菌肽(TAP)基因乳腺特异性表达载体的构建与鉴定
- 2013年
- 【目的】构建奶牛气管抗菌肽(TAP)基因乳腺特异性表达载体。【方法】根据GenBank中牛TAP基因cDNA序列(GenBank号:NM_174776)设计引物,从奶牛乳腺组织中RT-PCR扩增TAP基因编码序列,将其克隆到pMD19-T(simple)载体中测序。重组质粒pMD-TAP经EcoRⅠ+KpnⅠ双酶切回收目的基因片段,亚克隆到携带增强型绿色荧光蛋白的通用型乳腺特异性表达载体pBLG-EGFP中,采用脂质体法转染奶牛乳腺上皮细胞(bMEC)、COS-7细胞,并注射泌乳家兔乳腺组织,荧光显微镜检测转染细胞中绿色荧光蛋白的表达,半定量RT-PCR检测家兔乳腺组织中TAP mRNA的表达。【结果】成功构建了乳腺特异性表达载体pBLG-EGFP-TAP,该载体可在bMEC中特异性地表达绿色荧光蛋白;半定量RT-PCR检测发现,转染pBLG-EGFP-TAP可显著提高家兔乳腺组织中TAPmRNA的表达水平。【结论】成功构建了乳腺特异性表达载体pBLG-EGFP-TAP,为进一步研究奶牛TAP基因的表达特性及利用基因工程技术防治奶牛乳房炎提供了重要材料。
- 曹随忠姚学萍崔亚飞杨德英雍康余树民刘宗平
- 关键词：奶牛乳房炎Β-防御素
