国家自然科学基金(30772671)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
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- 载反义寡核苷酸阳离子脂质体的制备及体内外研究被引量：1
- 2009年
- 制备载端粒酶反义寡核苷酸的阳离子脂质体并考察其体外癌细胞的抑制作用及转染效率和小鼠体内分布情况。以磷脂-DOPE(二油酰磷脂酰乙醇胺)-十八胺-胆固醇为类脂成分,薄膜超声-吸附-冷冻干燥法制备稳定的载反义寡核苷酸阳离子脂质体。激光粒度仪测定冷冻干燥前后脂质体zeta电位及粒径,透射电镜观察其形态,葡聚糖凝胶柱分离未包封的反义寡核苷酸,紫外法测定冻干前后的载药率。MTT法检测反义寡核苷酸对乳腺癌细胞MCF-7的抑制。荧光显微镜观察不同时间细胞摄取荧光标记反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotides,asODN)的状况,计算转染效率和不同时间在小鼠心、肝、肺、肾、瘤体组织中的分布。海藻糖与甘露醇及甘氨酸为较好的冻干保护剂,制得的阳离子脂质体带正电荷,规则球形,大小较均匀,海藻糖作为保护剂复溶前后平均粒径为175nm和320nm,zeta电位在+32mV,脂质体的载药率复溶后为83.2%。脂质体介导的5′-FITC荧光标记的asODN在乳腺癌MCF-7细胞中的平均转染率在2、4、8h时分别为18%、26%、44%,并且细胞生长明显被抑制,与对照组比较,具有显著性差异(P<0.05)。阳离子脂质体-asODN复合物体内主要分布在肝、肾、肺和瘤体组织,与对照组比较差异显著。采用该处方和工艺可成功制备稳定性大有改善的反义寡核苷酸阳离子脂质体。该脂质体介导的端粒酶asODN能够有效抑制乳腺癌MCF-7细胞生长,体外转染效率较高。该给药系统可明显增加组织特别是瘤体对asODN的摄入量。
- 刘洋张振中李坤梅芊
- 关键词：反义寡核苷酸阳离子脂质体冷冻干燥转染效率肿瘤靶向
- PEI/ASON纳米组装体对肺腺癌A549细胞增殖活性及其hTERT基因表达的影响
- 2012年
- 目的以聚乙烯亚胺多聚阳离子纳米载体(polyethylenimine,PEI)作为端粒酶逆转录酶(human telomerasereverse transcriptase,hTERT)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)载体转染A549细胞,研究其对A549细胞的增殖活性及hTERT mRNA表达的影响。方法采用MTT法检测PEI/ASODN纳米组装体对细胞的增殖作用情况;激光共聚焦显微镜检测5'-FITC标记的ASODN(FASODN)转染细胞后PEI/FASODN纳米组装体的细胞摄入情况;RT-PCR检测转染后hTERT mRNA的表达;免疫细胞化学技术检测端粒酶hTERT蛋白的表达;流式细胞术Annexin-V-FITC和PI双标法检测细胞凋亡情况;PEI/ASON-PEG-CNGR组装体动物体内分布实验观察NGR的肿瘤靶向作用。结果 PEI/ASODN纳米组装体转染细胞后产生良好的生长抑制作用;FASODN转染细胞后,PEI/FASODN组细胞内有大量荧光物质,而单纯FASODN组细胞内无明显荧光;RT-PCR检测结果表明PEI/ASODN纳米组装体作用于A549细胞72 h时,hTERTmRNA水平明显降低,与空白对照组相比有显著差异(P<0.05);细胞hTERT蛋白的表达也显著降低;转染72 h后PEI/ASODN组出现明显早期凋亡和晚期凋亡,凋亡率分别为36.53%和54.28%;动物体内分布实验表明PEI/ASON-PEG-CNGR具有良好的肿瘤靶向作用。结论 PEI介导的hTERT ASODN能有效抑制A549细胞增殖,降低hTERT mRNA水平从而抑制hTERT蛋白的表达,使细胞产生凋亡,对该细胞生长有明显抑制作用。
- 王志平周建超张振中付蕾
- 关键词：聚乙烯亚胺反义寡核苷酸端粒酶逆转录酶
- 碳纳米管抗菌作用的研究进展及展望被引量：3
- 2013年
- 主要对碳纳米管抗菌性能的发现及近几年的研究进展做了较为全面的综述,对碳纳米管抗菌活性的影响因素(包括碳纳米管所含杂质、本身的理化性质以及外界因素)进行了多方位的阐述,不同的制备方式、杂质、化学修饰、分散度、培养介质等都会影响碳纳米管的抗菌活性;碳纳米管对细菌的作用机理目前还没有定论,可能为独特的物理作用方式——细胞膜损伤,也可能是碳纳米管诱导的氧化应激反应,其杀菌方式与所有抗生素的作用方式均不同。碳纳米管抗菌性的研究可能会开辟抗菌药物研究领域的新方向,为抗菌药物的研究提供新的思路。
- 李爱荣朱菡徐增瑞李梦张振中
- 关键词：碳纳米管抗菌理化性质
