国际科技合作与交流专项项目(2004DFB02000)
- 作品数：33 被引量：133H指数：7
- 相关作者：赵雪俭李扬赵丽娟王伟华赵丹更多>>
- 相关机构：吉林大学北华大学吉林大学中日联谊医院更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目中日政府间专项方式技术合作项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- RNAi沉默STAT3基因对人前列腺癌PC3细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用被引量：3
- 2007年
- 目的 探讨pSilencer1．0-U6-siRNA-STAT3重组质粒对人前列腺癌细胞PC3裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法 采用裸鼠前列腺癌模型模拟siRNA—STAT3基因治疗实验，观察siRNA—STAT3重组质粒的抗瘤疗效，Western blot法检测重组质粒对STAT3基因表达的影响，HE及Tunel染色方法观察肿瘤组织形态及细胞凋亡情况。结果 肿瘤接种后第49天重组质粒组肿瘤体积为（391±56）mm^3，盐水对照组为（1111±182）mm^3，空质粒对照组为（981±169）mm^3，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）；重组质粒抑制瘤体内STAT3及pTyr-STAT3基因表达率分别为77％及68％，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。HE染色证实重组质粒组出现大片细胞核固缩、破碎等凋亡征象，Tunel染色显示癌组织出现大量细胞凋亡。结论 pSilencer1．0-U6-siRNA-STAT3重组质粒能明显抑制人前列腺癌细胞PC3裸鼠移植瘤的生长，具有良好的应用前景。
- 高丽芳徐德启李峰邵月婷张灵孟艳赵雪俭
- 关键词：前列腺肿瘤基因沉默
- 人参单体皂苷Rh_2诱导小鼠前列腺癌RM-1细胞凋亡被引量：11
- 2007年
- 目的：探讨人参单体皂苷Rh2抗小鼠前列腺癌细胞RM-1的作用机制。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法检测不同浓度Rh2与RM-1细胞株存活率的关系;吖啶橙染色观察Rh2诱导细胞凋亡情况;流式细胞仪分析细胞凋亡周期,计算细胞平均凋亡指数。结果：RM-1细胞经Rh2处理后,细胞生长明显受抑制,当Rh2浓度为5、15、25和30mg·L^-1时,其生长抑制率分别为12.0%、36.1%、51.2%和69.3%,呈明显的浓度依赖性;吖啶橙荧光染色可见经药物处理的细胞呈现明显的凋亡形态;细胞周期G1期前出现凋亡峰,Rh2浓度为15和25mg·L^-1时,细胞凋亡率分别为41.9%和48.9%。结论：5-30mg·L^-1Rh2可诱导RM-1细胞凋亡,其具有明显的抗肿瘤作用。
- 何静春孟艳赵洪艳赵丽娟赵雪俭
- 关键词：细胞凋亡前列腺肿瘤细胞周期
- Survivin-siRNA对前列腺癌PC-3M细胞增殖的抑制作用被引量：13
- 2008年
- 目的:探讨survivin-siRNA对前列腺癌细胞株PC-3M的增殖抑制作用。方法:构建两个针对survivin siRNA表达载体,与脂质体和空质粒两个对照组一起分别转染前列腺癌PC-3M细胞后,利用半定量RT-PCR和Western blotting分别检测细胞survivin mRNA及蛋白表达水平,MTT法测定细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果:转染72h后,两个实验组细胞的survivin mRNA水平是脂质体组的48%±6%(n=3)和30%±5%(n=3),蛋白表达水平是脂质体组的38%±4%(n=3)和36%±4%(n=3)。MTT检测实验组细胞的生长速度分别是脂质体组的44.20%±2.08%(n=3)和39.20%±1.93%(n=3),流式细胞术发现实验组G1期细胞比例明显高于两个对照组,而G2期和S期细胞比例减少,细胞出现凋亡。结论:利用survivin-siRNA可明显抑制前列腺癌PC-3M细胞的增殖,细胞受阻于G1期,诱导细胞凋亡,为进一步进行动物体内研究奠定了基础。
- 刘艳波赵丽娟赵丽晶赵丹刘喜春高丽芳赵雪俭
- 关键词：前列腺肿瘤PC-3M细胞
- ATRA联合IFN-α对PC-3细胞株的生长抑制作用以及对GRIM-19和STAT3基因表达的影响被引量：7
- 2006年
- 目的:研究ATRA联合IFN-α对人激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞株的生长抑制作用及对凋亡相关基因GRIM-19和原癌基因STAT3表达的影响。方法:采用MTT比色法筛选ATRA和IFN-α联合应用的最佳时间和剂量;相差显微镜及吖啶橙染色观察其对PC-3细胞的促凋亡作用;DNA ladder提取试剂盒检测用药后细胞凋亡;RT-PCR方法观察用药后PC-3细胞GRIM-19 mRNA的表达;Western blot分别检测GRIM-19、STAT3的蛋白表达。结果:ATRA 1μmol/L联合IFN-α1 000 U/mL作用72 h对PC-3细胞有显著的增殖抑制作用,与溶媒对照组、ATRA或IFN-α单独应用组比较,差异显著(P<0.05)。形态学观察两药合用后PC-3细胞呈现典型的凋亡征象。DNA电泳图谱在ATRA和IFN-α两药合用组可见较AT-RA单独应用组更为明显的DNA ladder,IFN-α单独用药组及对照组没有出现DNA降解。RT-PCR结果表明,ATRA和IFN-α两药合用GRIM-19 mRNA表达增强,与对照组和ATRA、IFN-α组比较,差异显著(P<0.05)。Western blot结果显示,两药合用组GRIM-19蛋白表达增强,STAT3蛋白表达减弱,与对照组、ATRA、IFN-α组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:ATRA和IFN-α联合应用可抑制PC-3细胞的增殖并诱导凋亡,其机制之一可能是通过上调GRIM-19基因表达,进而下调原癌基因STAT3表达实现的。
- 邵月婷高丽芳孙连坤赵丹计国义胡嘉弟李扬赵雪俭
- 关键词：基因表达PC-3细胞
- 人参单体皂苷Rh_2与顺铂联合应用诱导小鼠前列腺癌凋亡被引量：6
- 2014年
- 目的人参单体皂苷Rh2与顺铂联合应用诱导小鼠前列腺癌凋亡的作用。方法 C57BL-6J雄性小鼠40只,共分5组,Rh2组,顺铂(CDDP)小剂量组,CDDP大剂量组,Rh2+CDDP小剂量组,模型组。建立小鼠前列腺癌动物模型,于第三日开始给药1次/d,连续给药15 d。量取瘤,体重,计算抑瘤率。采用RT-PCR技术及免疫组化试剂盒检测前列腺癌组织中半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)mRNA与蛋白的表达情况。结果 Rh2组与模型组小鼠体重相近(P>0.05)。Rh2与小剂量CDDP联合应用,抑瘤作用明显高于单纯小剂量CDDP的作用效果,其肿瘤抑制率与大剂量CDDP相近,Rh2与小剂量CDDP联合组caspase-3 mRNA及蛋白表达显著高于单纯CDDP及Rh2组(P<0.05)。结论人参单体皂苷Rh2与顺铂联合应用不但可以减少副作用而且可以通过明显增强caspase-3 mRNA表达而增强诱导小鼠前列腺癌细胞凋亡的作用。
- 何静春李峰赵丽娟
- 关键词：前列腺癌半胱氨酸蛋白酶-3
- 聚肌胞对小鼠前列腺癌的抑制作用被引量：3
- 2006年
- 目的:观察聚肌胞对小鼠前列腺癌的抑制作用。方法:将16只C57BL6/J纯系荷瘤小鼠按瘤重采用区组随机分组方法分为对照组和聚肌胞组,每组8只,每隔2日分别瘤内注射生理盐水和聚肌胞,第7次后切除瘤灶,称瘤重,计算瘤重抑制率,绘制前列腺癌生长曲线及荷瘤鼠生存曲线。前列腺癌组织HE染色观察形态学变化。结果:对照组和聚肌胞组瘤重分别为(4·14±1·56)和(1·58±0·67)g,两组瘤重比较差异具有显著性(P<0·05);聚肌胞组瘤重抑制率为67·85%;前列腺癌生长曲线显示,聚肌胞组小鼠前列腺癌生长较慢;聚肌胞组荷瘤小鼠的生存时间较对照组长(P<0·05);病理显示对照组较聚肌胞组前列腺癌细胞增殖活跃。结论:聚肌胞可以减慢小鼠前列腺癌的生长,延长荷瘤小鼠生存时间。
- 田原僮潘玉琢赵燕颖范文静赵丽娟赵雪俭
- 关键词：前列腺肿瘤聚肌胞苷酸死亡率
- Survivin-siRNA真核重组质粒的构建及对前列腺癌DU145细胞增殖抑制作用被引量：2
- 2010年
- 目的应用RNA干扰技术（RNAi），构建针对凋亡抑制因子survivin的siRNA，并检测其对DU145细胞增殖抑制的影响．方法构建重组质粒shRNA-sur1和shRNA-sur2并分别转染DU145细胞株，通过MTT法和流式细胞术观察其对细胞的增殖抑制作用及凋亡的影响．结果成功构建针对survivin干扰的两种真核表达质粒，转染72h后，两个实验组细胞的生长速度分别是脂质体组的（37．2％±5．8％）（n=3）和（43．5％±7．2％）（n=3）．流式细胞术发现：实验组细胞的G1期细胞比例明显高于对照组，而G2期和S期细胞比例减少，细胞出现凋亡，与脂质体组比较，两实验组细胞的凋亡率分别为（21．70％±6．45％），（14．835±5．65％）．结论成功构建针对survivin siRNA的真核重组质粒，两种质粒体外均可抑制DU145增殖并诱导其凋亡，为survivin介导的肿瘤基因沉默提供良好的基础．
- 刘艳波耿艳葛贺芦丽莉
- 关键词：SURVIVIN基因前列腺癌
- 外周血单个核细胞PSA mRNA及蛋白表达与前列腺癌微转移关系的研究被引量：4
- 2006年
- 目的观察前列腺癌患者外周血单个核细胞PSA mRNA及蛋白表达,探讨其与前列腺癌微转移的关系。方法取抗凝血,Ficoll离心分离单个核细胞,RT-PCR检测PSA mRNA表达,Western blot检测PSA蛋白表达。结果(1)血清PSA>40．0ng／ml者23例,两者均表达的19例,阳性符合率82．61％(19／23);血清PSA <20．0ng／ml者16例,两者均表达的5例,阳性符合率31．25％(5／16);(2)PSA mRNA及蛋白的阳性表达与临床分期、Gleason评分均呈正相关;(3)血清PSA<20．0ng／ml的16例患者随访18个月,1例PSA mRNA及蛋白均表达阳性者,于前列腺癌根治术后半年内死于癌转移。结论外周血单个核细胞PSA mRNA及蛋白的联合检测是判断前列腺癌微转移的有效手段之一,并可预示前列腺癌的病理分级和不良预后。
- 李扬毛建华张灵计国义潘玉琢赵雪俭高洪文王伟华孔祥波
- 关键词：单个核细胞前列腺特异性抗原微转移
- STEAP1在人前列腺组织中的表达与分布被引量：4
- 2005年
- 目的:探讨STEAP1在中国人前列腺组织中的表达和分布情况。方法:应用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学染色的方法,检测STEAP1在正常前列腺、前列腺癌组织中mRNA和蛋白表达水平及其在细胞中的定位。结果:RT-PCR结果显示前列腺癌STEAP1 mRNA高表达,正常前列腺则表达较弱;免疫印迹结果表明前列腺癌组织中STEAP1的表达水平高于正常前列腺组织的表达量;免疫组织化学染色显示阳性染色细胞主要分布在正常前列腺腺上皮细胞和前列腺癌腺上皮细胞,间质细胞、基底细胞染色阴性,着色部位主要在细胞膜及胞浆,而且在腺上皮细胞表现出一定的方向性,主要分布在前列腺腺管管腔一侧。结论:STEAP1在中国人前列腺癌组织中广泛表达,主要表达于靠近前列腺腺管一侧的前列腺上皮细胞膜,依据结构与功能相结合的原则,其表达的解剖分布与表达水平提示STEAP1与前列腺内物质代谢有关。
- 潘玉琢李扬赵丹毛建华高洪文计国义王伟华赵雪俭
- 关键词：前列腺肿瘤上皮
- DIM增强顺铂抑制PC-3细胞增殖及诱导凋亡的效应被引量：3
- 2008年
- 目的:观察顺铂(DDP)和3,3-二吲哚基甲烷(3,3-diindolylmethane,DIM)联合应用对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法检测PC-3细胞增殖抑制情况,用流式细胞术及吖啶橙染色法分析细胞凋亡的变化,用RT-PCR检测抑癌基因p21的表达变化。结果:60μmol.L-1的DIM与0.4 mg.L-1的DDP联合可有效抑制PC-3细胞增殖并诱导其凋亡,其效果与单用4 mg.L-1DDP相同。DIM与DDP联合试验中细胞生长抑制率和凋亡率也明显高于单用DIM处理组(P<0.05)。RT-PCR结果表明:单用DIM和DIM与DDP联合用药都能明显增强p21基因的表达,但联合用药的效果更明显。结论:DIM能显著增强DDP对PC-3细胞的增殖抑制和诱导凋亡的效应。
- 赵燕颖秦中国邱伟智潘玉琢赵丽娟赵雪俭
- 关键词：顺铂前列腺肿瘤
