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国家高技术研究发展计划(2006AA09Z401)

作品数:2 被引量:3H指数:1
相关作者:向华韩静周坚蔡双凤刘海龙更多>>
相关机构:中国科学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:生物学更多>>

文献类型

  • 2篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 3篇生物学

主题

  • 2篇嗜盐
  • 2篇嗜盐古菌
  • 2篇极端嗜盐古菌
  • 2篇古菌
  • 1篇代谢研究
  • 1篇质粒
  • 1篇生理
  • 1篇聚羟基脂肪酸...
  • 1篇基因
  • 1篇分子遗传
  • 1篇PHA
  • 1篇PHBV
  • 1篇B基因
  • 1篇穿梭表达载体
  • 1篇穿梭载体

机构

  • 3篇中国科学院

作者

  • 3篇向华
  • 1篇冯博
  • 1篇刘海龙
  • 1篇蔡双凤
  • 1篇周坚
  • 1篇苗荻
  • 1篇韩静
  • 1篇孙超岷

传媒

  • 2篇微生物学报

年份

  • 1篇2010
  • 1篇2009
  • 1篇2008
2 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
极端嗜盐古菌分子遗传与生理代谢研究
古菌是与细菌及真核生物并列的生命的第三种形式。古菌大多生活在极端环境,既具有原核生物相对简单的细胞组织及代谢特征,又具有与真核生物类似的遗传机器及调控机制, 为理解生命的基本特征及其环境适应机制提供了具有鲜明特色的研究体...
向华
文献传递
极端嗜盐古菌质粒pSCM201衍生穿梭表达载体的构建及应用被引量:1
2009年
[Objective] pSCM201 is the first unidirectional theta replication plasmid experimentally identified in the domain of archaea.For gene expression and function analysis of specific genes in model strain Haloarcula hispanica,a novel shuttle expression vector based on pSCM201 was developed.[Methods] By combining the minimal replicon of pSCM201,the pUC19 replicon of Escherichia coli,and two antibiotic genes,a new shuttle vector between haloarchaea and E.coli was established.Furthermore,the hsp5 core promoter,multiple clone sites and a C-terminal His·Tag sequence were added to construct the expression vector pSCM307.With the help of reporter gene bgaH,the replication ability and gene expression of pSCM307 were tested in H.hispanica AS2049 by PCR identification and β-galactosidase activity assay.[Results] pSCM307 could stably self-replicate in AS2049,and bgaH was successfully expressed under the control of hsp5 promoter.[Conclusions] A user-friendly expression vector was successfully constructed in haloarchaea.
苗荻孙超岷向华
关键词:嗜盐古菌穿梭载体
地中海富盐菌中phaB基因的鉴定及PHBV前体供应途径的分析被引量:2
2010年
【目的】进一步揭示地中海富盐菌(Haloferax mediterranei)中聚羟基丁酸羟基戊酸酯[poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate),PHBV]前体供应的途径并鉴定其中的关键基因。【方法】将细菌及其他古菌中已鉴定的与聚羟基脂肪酸酯前体(3-羟基脂酰-CoA)供应相关的酶与地中海富盐菌预测的全蛋白质组进行同源性比对,得到相似性比较高的5个基因,分别命名为:phaB1,phaB2,phaJ1,phaJ2和phaJ3。首先利用RT-PCR检测了5个基因在产PHBV的条件下的转录情况。然后利用同源重组双交换的方法,将5个基因分别或组合敲除,得到突变株:ΔphaB1,ΔphaB2,ΔphaJ1,ΔphaJ2,ΔphaJ3,ΔphaB1phaB2,ΔphaJ1phaJ2和ΔphaJ1phaJ2phaJ3。并在突变株ΔphaB1phaB2中分别互补phaB1和phaB2基因。【结果】无论是将3个phaJ基因单独敲除,还是组合敲除,对地中海富盐菌PHBV的积累都没有明显影响。单独敲除phaB1基因对PHBV的积累没有明显影响,单独敲除phaB2基因导致突变株PHBV产量明显下降,而且3-HV单体组分所占的摩尔比例也有所下降。将phaB1和phaB2基因同时敲除后,得到的突变株不再产生PHBV。【结论】在地中海富盐菌中可能主要存在由乙酰-CoA和丙酰-CoA提供PHBV前体的途径,其中编码乙酰乙酰-CoA还原酶的两个基因即为phaB1和phaB2。
冯博蔡双凤韩静刘海龙周坚向华
关键词:聚羟基脂肪酸酯
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