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国家科技重大专项(2011ZX08008-004)

作品数：10 被引量：28H指数：3
相关作者：成勇赵永聚宋绍征荣耀顾迎迎更多>>
相关机构：扬州大学西南大学东北农业大学更多>>
发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金江苏省科技支撑计划项目更多>>
相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 6篇生物学
  • 5篇农业科学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 2篇动物
  • 2篇山羊
  • 2篇细胞
  • 2篇基因
  • 1篇蛋白纯化
  • 1篇动物伦理
  • 1篇动物实验
  • 1篇多态
  • 1篇多态性
  • 1篇多态性分析
  • 1篇诱饵蛋白
  • 1篇诱饵载体
  • 1篇原核表达
  • 1篇人类免疫
  • 1篇人类免疫缺陷
  • 1篇人类免疫缺陷...
  • 1篇人乳铁蛋白
  • 1篇妊娠
  • 1篇妊娠率
  • 1篇乳蛋白

机构

  • 5篇扬州大学
  • 3篇西南大学
  • 1篇东北农业大学
  • 1篇山东省农业科...
  • 1篇上海交通大学
  • 1篇卫生部
  • 1篇重庆市荣昌县...
  • 1篇上海滔滔转基...

作者

  • 3篇成勇
  • 3篇赵永聚
  • 2篇荣耀
  • 2篇宋绍征
  • 2篇顾迎迎
  • 1篇张利清
  • 1篇胡伟
  • 1篇黄淑帧
  • 1篇余乾
  • 1篇张婷
  • 1篇何洪彬
  • 1篇赵谦
  • 1篇陈美珏
  • 1篇侯佩莉
  • 1篇李尧锋
  • 1篇赵博渊
  • 1篇王洪梅
  • 1篇臧矫
  • 1篇张楠阳
  • 1篇张汤杰

传媒

  • 3篇畜牧与兽医
  • 2篇中国生物工程...
  • 1篇黑龙江畜牧兽...
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇吉林农业大学...
  • 1篇中国畜牧兽医
  • 1篇科教文汇

年份

  • 1篇2016
  • 2篇2014
  • 3篇2013
  • 3篇2012
  • 1篇2011
共 10 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
酵母双杂交中诱饵蛋白载体的构建与鉴定方法被引量：3
2012年
酵母双杂交已是研究蛋白质相互作用的经典方法之一。该方法以真核生物酵母为模型,在体内研究活细胞内蛋白质的相互作用,具有高度敏感性,被很多研究者采用。综述了酵母双杂交系统中诱饵蛋白载体的构建,及其在转化酵母中的毒性、自激活性检测研究的最新进展。
李尧锋张楠阳赵永聚
关键词：酵母双杂交诱饵载体诱饵蛋白
CD_4分子结构和功能研究新进展被引量：2
2013年
CD4分子属于免疫球蛋白超家族,其胞外区由4个免疫球蛋白样的结构域组成,在胸腺细胞发育的过程中,CD4分子的表达受多种因素的影响。由于该分子在T淋巴细胞发育、信号转导、细胞间通讯、细胞免疫应答和体液免疫应答的过程中发挥着重要作用,而被深入研究,对其功能有了初步的了解。成熟人类Th细胞表面表达的CD4(T4)受体,具有调控并识别抗原的能力,最新研究发现,CD4分子在精子介导转基因过程的外源DNA内化机制中还扮演着不可或缺的角色。
赵博渊徐菊梅任天武赵永聚
关键词：CD4
BVDV/IBRV主要抗原表位E2/gD基因串联表达及免疫原性被引量：4
2014年
为开发研制牛病毒性腹泻-黏膜病毒(BVDV)及牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的联合亚单位疫苗,开展了BVDV E2蛋白、IBRV gD蛋白主要抗原表位串联表达及免疫原性研究。利用2步PCR法获得E2-gD基因,构建原核表达载体pET28a-E2-gD,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE结果显示重组蛋白表达,BCA工作盒测定纯化蛋白浓度为2.69 mg/mL;Western-blot结果显示其具有作为免疫原的特异性;免疫家兔制备抗血清,血清中和试验结果表明,中和抗体效价为44.7(IBRV)/22(BVDV)。这说明E2-gD蛋白免疫原性较好,可诱导产生较高效价的中和抗体。
侯亚兰侯佩莉李杰王洪梅何洪彬
关键词：BVDVE2免疫原性BVDVE2
试论动物实验与动物伦理被引量：2
2012年
动物实验是生物医学研究的重要手段之一,但在动物实验中如何关注动物伦理,是生命科学工作者必须思考的问题。本文在阐述动物实验重要性的基础上,对动物保护主义、动物福利、动物伦理及其与动物实验的关系进行了讨论,指出动物实验与动物伦理必须协调发展,生命科学工作者应该"善待活着的动物,减少动物死亡的痛苦",遵循"3R"(代替、减少、优化)原则,开展动物实验,推动生命科学的发展。
邢华张汤杰
关键词：动物伦理
转基因动物及其产品的安全评估方法研究进展被引量：1
2012年
目前,转基因动物技术发展迅速并广泛应用于食品、医药、农业和生物材料等众多领域,带来了巨大的经济效益和社会效益,且发展潜力巨大。同时,转基因动物及其产品的安全性问题也日益突出,表现在转基因动物本身及产品安全性和环境安全性两个主要方面。"实质等同性原则"是国际上转基因动物安全性评价的基本原则。从转基因动物及其产品作为食品、药品等的安全性评估;从转基因动物对生态环境安全和影响的评估和非预期效应的评估等三个方面进行了阐述,并对我国转基因动物评价体系的构建提出建议。
余乾赵二虎曹礼静赵谦赵永聚
关键词：转基因动物生态安全安全性评估
转录激活因子样效应物核酸酶介导的山羊β-乳球蛋白基因敲除和人乳铁蛋白基因定点整合被引量：9
2016年
为了敲除山羊乳中致敏源β-乳球蛋白(BLG)基因,同时在BLG基因座定点整合人乳铁蛋白(hLF)基因。首先针对山羊BLG第3外显子识别位点设计了1对特异性TALEN-3-L/R质粒对;同时,构建了含有1个HSV-TK负筛选基因的hLF基因打靶载体BLC14-TK。TALENs质粒对转染山羊胎儿成纤维细胞,2μg/m L嘌呤霉素筛选3 d,PCR扩增产物测序来验证其切割DNA活性。打靶载体BLC14-TK与TALEN-3-L/R质粒对共转染山羊胎儿成纤维细胞,经700μg/m L G418和2μg/m L GCV共筛选药物抗性细胞株;通过整合检测和同源重组检测来筛选hLF基因打靶细胞株;BLG~–/hLF^+打靶细胞株作为供核细胞进行山羊体细胞核移植。结果为:TALEN-3-L/R致突变率为25%-30%;获得BLG~–/hLF^+打靶细胞6株;共制作重构胚胎335枚,移植受体山羊23只,B超检测到30-35 d的妊娠受体9只(妊娠率39.1%),其中1只50日龄克隆胎儿验证为BLG~–/hLF^+基因型。以上结果表明获得BLG基因座定点整合hLF基因的基因打靶山羊是可行的,为培育羊乳中含低致敏原和富含hLF的山羊新品系奠定了基础。
宋绍征朱孟敏袁玉国荣耀徐晟陈思梅珺琰成勇
关键词：人乳铁蛋白基因打靶体细胞核移植
人白细胞介素-2原核表达条件优化和表达产物纯化被引量：2
2013年
通过构建原核表达载体、优化原核表达条件和纯化表达产物来获得人白细胞介素-2(IL-2)的融合蛋白(His-IL2)。将IL-2基因连接到pET100/D-TOPO载体中,经酶切鉴定和测序,构建了pET-IL2质粒。将质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,通过优化诱导温度、诱导时间及IPTG诱导终浓度来减少包涵体的生成,从而提高可溶性蛋白的产量,由SDS-PAGE和Western blot证明IPTG诱导终浓度为0.6 mmol/L、温度为25℃,诱导5 h时可溶性蛋白含量明显高于包涵体,且该融合蛋白能够被特异性抗体所识别。分别以葡聚糖凝胶层析和Ni-IDA树脂亲和层析纯化His-IL2融合蛋白,比较两种不同的纯化方法对其蛋白纯化效率的影响,SDS-PAGE分析得出Ni-IDA树脂亲和层析对此融合蛋白纯化的特异性高,纯度达到85%左右。His-IL2融合蛋白的优化表达和纯化为进一步研究融合蛋白的活性与功能奠定了基础。
吉学桥张利清陆睿成勇
关键词：IL-2可溶性蛋白蛋白纯化
应用氯前列烯醇诱导山羊多胎率的研究被引量：2
2011年
为了增加养羊业的经济效益,以及医学、药学进行山羊动物试验的需要,必须提高山羊的繁殖效率,增加山羊怀孕的多胎率。为此作者特设计采用氯前列烯醇(Cloprostenol)对华东地区的山羊(江苏海门山羊)进行同步处理并配种以达到提高山羊的多胎率,提高山羊利用效率的目的。试验分成两组,氯前列烯醇诱导组(T)136头和非诱导组(UT)136头。结果显示,采用氯前列烯醇诱导的山羊(T)多胎率达到78.7%(107/136),怀孕羔羊数平均达到了2.01只/胎(273/136),而未采用氯前列烯醇诱导的对照组山羊(UT)的多胎率只有39.0%(53/136),怀孕胎数平均为1.31只/胎(179/136),两组之间差异极显著(P<0.01),氯前列烯醇处理组羔羊出生后生长、发育正常。本试验结果表明,通过氯前列烯醇诱导可以明显提高山羊的怀孕多胎率,对山羊优良品种的繁育、种群的快速扩繁及试验用山羊的研制等具有重要的经济价值和应用价值。
胡伟李凯袁琦陈美珏黄淑帧
关键词：山羊氯前列烯醇干细胞
家兔超数排卵和胚胎移植妊娠率的影响因素分析被引量：3
2013年
应用FSH和HCG相结合的不同方法 (递减量与恒量法),对不同兔龄和是否经产的中国家兔进行了超数排卵处理。其中,递减量法超排处理:每间隔12 h依次肌肉注射15、15、10、10、5及5 U/只共60 U的FSH,6次之后间隔12 h,经耳缘静脉注射HCG 100 U/只,合笼;恒量法超排处理:每间隔12 h肌肉注射10 U/只共60 U的FSH,6次之后间隔12 h,经耳缘静脉注射HCG 100 U/只,合笼。17 h后,取卵经显微注射后移植到排卵点分布不同的家兔输卵管中,比较分析了超数排卵及胚胎移植妊娠率的影响因素,旨在优化兔超数排卵和胚胎移植方法。结果显示,①总量为60 U的FSH递减量肌肉注射法超排效果略优于恒量法(688枚、671枚),但差异不显著(P>0.05);②9～11月龄的母兔超排效果明显优于6～8月龄的母兔(794枚、565枚),差异显著(P<0.05);③经产母兔的超排效果明显优于未经产的母兔(887枚、472枚),差异显著(P<0.05);④经显微注射重组DNA的胚胎移植受体时,两侧卵巢均有排卵点的胚胎移植受体妊娠率明显高于一侧卵巢有排卵点和两侧卵巢均无排卵点的受体(81.25%、38.46%、37.50%),差异显著(P<0.05)。试验证明,通过肌肉注射递减总量为60 U的FSH对9～11月龄经产母兔的超排效果最佳,且两侧卵巢均有排卵点的受体胚胎移植妊娠率最高,为胚胎研究工作者提供了一定的参考依据。
宋绍征葛欣张利清成姚斌荣耀顾迎迎吉学桥刘昊成勇
关键词：超数排卵胚胎移植妊娠率显微注射
克隆山羊乳蛋白多态性分析
2014年
对2只来自同一细胞系的克隆山羊和3只无亲缘关系的白山羊应用限制性片段多态性(RFLP)和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)进行基因型和乳蛋白电泳图谱进行分析比较。研究结果显示:2只克隆羊基因指纹图谱完全相同,相同遗传背景的克隆山羊产后羊乳中乳蛋白组分存在差异,其中C50克隆羊酪蛋白含量和种类明显高于同一克隆的C4克隆山羊;1#、2#、3#正常白山羊基因指纹图谱分析相互不存在亲缘关系,3只正常白山羊产后第15天、第20天、第25天、第30天和150天奶样品乳蛋白电泳图谱不存在明显差异。结果提示:山羊乳蛋白多态性不仅与遗传多态性有关,而且可能与非染色体遗传或表观遗传相关。这一结果有助于乳蛋白遗传多态性研究,也可能为高产奶山羊培育提出新的思路。
庞云龙顾迎迎张婷臧矫成勇
关键词：山羊SDS-PAGE乳蛋白多态性基因型
全选 清除 导出
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